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多糖的分離純化、分子修飾及生物活性的研究

點擊次數(shù):620 發(fā)布時間:2008/11/21 21:34:17
一、實驗目的 
采用復合酶法及熱水法提取百合多糖, 并對得到的多糖進行抗氧
化活性的比較研究
二、實驗原理
百合多糖溶于水,不溶于醇,即水溶醇沉。再用seveg試劑除去蛋白。
三、試劑與器材
藥用百合、纖維素酶R-10(5000-10000U/g)、果膠酶5000U/g、胰酶、Sephadex G-75、紫外、可見分光光度計、熒光分光光度計、高速冷凍離心機、部分收集器。
四、操作方法 
1、用熱水法提取百合多糖(LBPs)。
2、用復合酶法提取百合多糖。
3、比較百合多糖的提取率
4、檢測多糖的生物活性。
1)O2-·的抑制作用。
2)對·OH的抑制作用。
3)H2O2誘導的人血紅細胞氧化溶血的抑制作用
4)對人紅細胞膜脂質(zhì)過氧化的抑制作用
5、用Sephadex G-75對粗多糖進行純化。。
五、關鍵步驟與注意事項
1、熱水法提取多糖需嚴格控制溫度、時間和加水比。
2、復合酶法提取百合多糖時需嚴格控制加酶量、pH、溫度和時間。
3、檢測抗氧化活性時需注意各種條件的影響。
4、百合多糖的純化時需考慮柱的長度和直徑,
 

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