1. 定量PCR儀的開(kāi)關(guān)機(jī)順序是怎樣的？
按照正確的開(kāi)關(guān)機(jī)順序操作，有助于延長(zhǎng)儀器的使用壽命，減少儀器出故障的頻率。開(kāi)機(jī)順序：先開(kāi)電腦，待電腦完全啟動(dòng)后再開(kāi)啟定量PCR儀主機(jī)，等主機(jī)面板上的綠燈亮后即可打開(kāi)定量PCR的收集軟件，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。關(guān)機(jī)順序：確認(rèn)實(shí)驗(yàn)已經(jīng)結(jié)束后，首先關(guān)閉信號(hào)收集軟件，然后關(guān)掉定量PCR儀主機(jī)的電源，*后關(guān)閉電腦。
2. 哪些種類(lèi)的反應(yīng)管和蓋子適合定量PCR實(shí)驗(yàn)使用？有何需要注意的地方？
定量PCR實(shí)驗(yàn)可以使用以下耗材：96孔光學(xué)反應(yīng)板配合光學(xué)膜，0.2 ml光學(xué)八聯(lián)反應(yīng)管配合光學(xué)膜，0.2 ml光學(xué)八聯(lián)反應(yīng)管配合平蓋的光學(xué)八聯(lián)管蓋。ABI公司生產(chǎn)的定量PCR耗材的具體使用方法和貨號(hào)見(jiàn)下表：
3. 為什么要定期對(duì)電腦進(jìn)行磁盤(pán)碎片整理？怎樣整理？
當(dāng)運(yùn)行實(shí)時(shí)定量PCR儀及使用軟件分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)，計(jì)算機(jī)會(huì)刪除并創(chuàng)建若干文件，計(jì)算機(jī)硬盤(pán)的空閑空間會(huì)被分割成越來(lái)越多的小塊。當(dāng)硬盤(pán)驅(qū)動(dòng)器上文件以分解的碎片存儲(chǔ)時(shí)，程序需要更長(zhǎng)的時(shí)間才能存取文件，因?yàn)楸仨毝啻螌ふ椅募槠源嫒〔煌钠瑪唷Ｋ槠韺?shí)用程序?qū)⒁粋�(gè)文件分解開(kāi)的多個(gè)碎片合并在一起，并存儲(chǔ)到硬盤(pán)的同一個(gè)位置，從而清除文件碎片，進(jìn)而優(yōu)化系統(tǒng)性能。
碎片整理的方法如下：
· 在Windows桌面上，選擇開(kāi)始(start),我的電腦(My computer)。
· 在(我的電腦)窗口中，用鼠標(biāo)右鍵單擊硬盤(pán)驅(qū)動(dòng)器，并選擇(屬性)property。
· 在(屬性)對(duì)話(huà)框中選擇工具(Tools)選項(xiàng)卡，單擊開(kāi)始整理(Defragment now)。
· 單擊碎片整理(Defragment)。
· 當(dāng)顯示“碎片整理完畢”對(duì)話(huà)框時(shí)，單擊（確定）。
· 在“本地磁盤(pán)屬性”對(duì)話(huà)框中，單擊（確定）。
· 為計(jì)算機(jī)機(jī)中剩余的驅(qū)動(dòng)器重復(fù)如上步驟。
4. 何時(shí)執(zhí)行windows service pack更新？
不要執(zhí)行該操作。除非美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)公司代表通知您更新操作系統(tǒng)，否則請(qǐng)不要更新控制定量 PCR 儀的計(jì)算機(jī)的操作系統(tǒng)。新版本的 Microsoft Windows 操作系統(tǒng)有可能與SDS 軟件存在沖突，并導(dǎo)致儀器不能正常運(yùn)行。如果您希望安裝 service pack（更新包）以更新操作系統(tǒng)，應(yīng)查看隨 SDS 軟件提供的版本說(shuō)明，避免兼容性問(wèn)題。
5. 應(yīng)該備份哪些數(shù)據(jù)？
應(yīng)該定期備份您的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，備份頻率推薦每周一次，用光盤(pán)刻錄。同時(shí)您也應(yīng)該備份定量PCR儀的各種純熒光光譜校正文件、背景文件和安裝驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，這些文件所在的目錄是C：/Appliedbiosystems/SDS Document。下圖是校正文件的樣本。
6. 怎么樣的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境才能保證儀器設(shè)備正常運(yùn)行？
良好的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境有助于延長(zhǎng)儀器的使用壽命，減少儀器出故障的頻率。推薦做到以下幾個(gè)方面：
電源：推薦配備合適的UPS或穩(wěn)壓器。
通風(fēng)：儀器的通風(fēng)應(yīng)該沒(méi)有阻擋。
溫度：推薦實(shí)驗(yàn)室配備空調(diào)，溫度應(yīng)該控制在10-30°C之間。
濕度：20-80%；對(duì)于潮濕的省份，推薦實(shí)驗(yàn)室配備除濕機(jī)。
空間：易于操作，安全。
7. 怎樣判斷定量PCR儀的樣本加熱塊是否被污染？怎樣清除污染？
一個(gè)辦法是運(yùn)行背景校正反應(yīng)板，當(dāng)一個(gè)或多個(gè)反應(yīng)孔連續(xù)顯示出不正常的高信號(hào)，則表明該孔可能被熒光污染物。另外一種辦法是在不放任何物品到樣本塊上的前提下，執(zhí)行ROI的校正，當(dāng)某個(gè)孔的信號(hào)明顯高出其他孔時(shí)，則表明該孔被污染。
清除樣本加熱塊污染的步驟如下：
用移液器吸取少量乙醇并滴入每個(gè)污染的反應(yīng)孔中。
吹打數(shù)次。
將廢液吸入廢液杯中。
重復(fù)以上步驟：乙醇三次，去離子水三次。
確認(rèn)反應(yīng)孔中的殘留液體蒸發(fā)完
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