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技術(shù)文章
上海遠(yuǎn)慕詳述： 免疫酶組織化學(xué)技術(shù)
點(diǎn)擊次數(shù)：214 發(fā)布時(shí)間：2016/10/28 10:01:16
免疫酶組織化學(xué)技術(shù)的概述
免疫組織化學(xué)（immunohistochemistry，IHC）或稱免疫細(xì)胞化學(xué)（1CC）是根據(jù)特異性抗原抗體反應(yīng)的原理來(lái)定位組織或細(xì)胞內(nèi)的抗原或抗體成分。自1940年Coons創(chuàng)建了免疫熒光組化技術(shù)檢測(cè)冰凍切片中的相關(guān)抗原成分以來(lái)，已有60涂年的歷史。
免疫組織化學(xué)技術(shù)根據(jù)示蹤物的不同可構(gòu)成不同的免疫組織化學(xué)方法，如標(biāo)記熒光素或熒光蛋白可構(gòu)成免疫熒光組化技術(shù)；如標(biāo)記酶（HRP或AKP）可構(gòu)成免疫酶組化技術(shù)；如標(biāo)記金或鐵可構(gòu)成免疫膠體金（銀）或膠體鐵技術(shù)。
1967年Nakane創(chuàng)建的免疫酶組織化學(xué)技術(shù)是目前開展免疫組織化學(xué)技術(shù)*常用的方法。該技術(shù)是借助于抗體與抗原的特異性結(jié)合并利用酶作用底物所產(chǎn)生的顏色反應(yīng)來(lái)顯示抗原存在的一種技術(shù)。其基本原理與免疫熒光技術(shù)相同，是在免疫熒光技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的，所不同的是免疫酶組織化學(xué)技術(shù)是用酶標(biāo)記抗體。其方法是以酶作示蹤物，與抗原或抗體結(jié)合，然后根據(jù)酶與底物間產(chǎn)生的可溶性或不溶性顏色產(chǎn)物，借助于光鏡或電鏡觀察細(xì)胞及亞細(xì)胞水平的抗原或抗體的存在和分布。
Nakane等將辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記在抗體免疫球蛋白分子上，制成酶標(biāo)抗體，成功地創(chuàng)建了酶標(biāo)抗體技術(shù)。
1970年，Sternberger利用酶免疫學(xué)原理，建立了非標(biāo)記抗體免疫過(guò)氧化物酶法，即PAP復(fù)合物法。自那以后，免疫酶組織化學(xué)技術(shù)有了很大的發(fā)展，得到廣泛應(yīng)用，相繼出現(xiàn)了親和免疫組化技術(shù)、免疫堿性磷酸酶技術(shù)、多聚螯合物酶技術(shù)、自動(dòng)免疫組織化學(xué)染色技術(shù)等新技術(shù)。它與免疫熒光技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn)：
①不需要特殊顯微鏡，目前已成為*常用的IHC方法，應(yīng)用廣泛；
②定位準(zhǔn)確，對(duì)比度好；
③染色標(biāo)本可長(zhǎng)期保存；
④可用蘇木精等染料復(fù)染，便于與形態(tài)學(xué)相結(jié)合；
⑤顯色反應(yīng)的產(chǎn)物顏色易分辨，且電子密度大，便于光鏡及電鏡觀察；
⑥可根據(jù)酶和底物／供氫體的不同顯示不同的顏色，可非常容易地進(jìn)行雙重或多重染色。
免疫組織化學(xué)（immunohistochemistry，IHC）或稱免疫細(xì)胞化學(xué)（1CC）是根據(jù)特異性抗原抗體反應(yīng)的原理來(lái)定位組織或細(xì)胞內(nèi)的抗原或抗體成分。自1940年Coons創(chuàng)建了免疫熒光組化技術(shù)檢測(cè)冰凍切片中的相關(guān)抗原成分以來(lái)，已有60涂年的歷史。
免疫組織化學(xué)技術(shù)根據(jù)示蹤物的不同可構(gòu)成不同的免疫組織化學(xué)方法，如標(biāo)記熒光素或熒光蛋白可構(gòu)成免疫熒光組化技術(shù)；如標(biāo)記酶（HRP或AKP）可構(gòu)成免疫酶組化技術(shù)；如標(biāo)記金或鐵可構(gòu)成免疫膠體金（銀）或膠體鐵技術(shù)。
1967年Nakane創(chuàng)建的免疫酶組織化學(xué)技術(shù)是目前開展免疫組織化學(xué)技術(shù)*常用的方法。該技術(shù)是借助于抗體與抗原的特異性結(jié)合并利用酶作用底物所產(chǎn)生的顏色反應(yīng)來(lái)顯示抗原存在的一種技術(shù)。其基本原理與免疫熒光技術(shù)相同，是在免疫熒光技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的，所不同的是免疫酶組織化學(xué)技術(shù)是用酶標(biāo)記抗體。其方法是以酶作示蹤物，與抗原或抗體結(jié)合，然后根據(jù)酶與底物間產(chǎn)生的可溶性或不溶性顏色產(chǎn)物，借助于光鏡或電鏡觀察細(xì)胞及亞細(xì)胞水平的抗原或抗體的存在和分布。
Nakane等將辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記在抗體免疫球蛋白分子上，制成酶標(biāo)抗體，成功地創(chuàng)建了酶標(biāo)抗體技術(shù)。
1970年，Sternberger利用酶免疫學(xué)原理，建立了非標(biāo)記抗體免疫過(guò)氧化物酶法，即PAP復(fù)合物法。自那以后，免疫酶組織化學(xué)技術(shù)有了很大的發(fā)展，得到廣泛應(yīng)用，相繼出現(xiàn)了親和免疫組化技術(shù)、免疫堿性磷酸酶技術(shù)、多聚螯合物酶技術(shù)、自動(dòng)免疫組織化學(xué)染色技術(shù)等新技術(shù)。它與免疫熒光技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn)：
①不需要特殊顯微鏡，目前已成為*常用的IHC方法，應(yīng)用廣泛；
②定位準(zhǔn)確，對(duì)比度好；
③染色標(biāo)本可長(zhǎng)期保存；
④可用蘇木精等染料復(fù)染，便于與形態(tài)學(xué)相結(jié)合；
⑤顯色反應(yīng)的產(chǎn)物顏色易分辨，且電子密度大，便于光鏡及電鏡觀察；
⑥可根據(jù)酶和底物／供氫體的不同顯示不同的顏色，可非常容易地進(jìn)行雙重或多重染色。
原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
