高回收率(75%-105%)，多種樣品的低成本提取方法；高重復(fù)性；檢測(cè)過程只需要不到1.5小時(shí)；五合一處理方法更省時(shí)、經(jīng)濟(jì)、環(huán)保。

產(chǎn)品概述

群勃龍檢測(cè)試劑盒酶聯(lián)免疫反應(yīng)測(cè)試盒基于競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)反應(yīng)原理，含有群勃龍檢測(cè)試劑盒(SEM)的抗體已經(jīng)包被于微孔板上。藥物分析時(shí)，樣品同SEM-HRP共同被添加到板孔中。如果樣品中含有SEM，會(huì)競(jìng)爭(zhēng)SEM抗體，抑制SEM-HRP與板上包被的抗體結(jié)合。加入底物后，產(chǎn)物的顏色強(qiáng)弱與樣品中SEM的濃度成反比。

 試劑盒組成

已包被的酶標(biāo)板（可拆式）                                            12×8 孔

標(biāo)準(zhǔn)液（0，0.025，0.1，0.4，1.6，6.4ppb）                              6×2.0mL

回收用10ppb(Spiking)——可選                                        1×0.8ml

HRP酶標(biāo)抗原(HRP-Conjugated)                                         1×6mL

10×樣品提取液(Sample Extraction Buffer)                             1×25mL

20×濃縮洗液(Wash Solution)                                          1×30mL

終止液(Stop Buffer)                                                  1×20mL

TMB底物(TMB Substrate)                                               1×10mL

50mM 2-硝基苯甲醛(2-Nitrobenzaldehyde)                               1×1.8mL

本試劑盒應(yīng)當(dāng)在2-8℃的溫度下儲(chǔ)存，有效期為一年。如果超過3個(gè)月不使用試劑盒，

請(qǐng)將SEM-HRP酶標(biāo)抗原放置-20℃或者冰凍保存。

檢測(cè)試劑盒以外需要提供的設(shè)備或材料

1)      酶標(biāo)儀(450 nm)

2)      恒溫培養(yǎng)箱

3)      勻漿器

4)      蒸干器

5)      漩渦振蕩器

6)      移液槍(50，100mL，1mL各一支)

7)      多道移液器（50-300mL）

8)      乙酸乙酯

9)      0.1M K₂HPO₄

10) 正己烷

注意事項(xiàng)

實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)閱讀以下文字，以保證獲得*佳實(shí)驗(yàn)效果。

1)      標(biāo)準(zhǔn)品中含有群勃龍檢測(cè)試劑盒，請(qǐng)小心使用。

2)      不要使用過期的試劑盒。

3)      不同批次的試劑盒不要混用，抗體和微孔板具有盒與批次的特異性。

4)      盡量保持室溫20-25℃，避免在通風(fēng)口操作防止溫度過低，過熱和/或者蒸發(fā)。同樣的，不要在陽(yáng)光直射下實(shí)驗(yàn)，防止過熱及蒸發(fā)。在孵育期間，如果工作臺(tái)溫度過低，應(yīng)該鋪墊若干紙巾或者其他物料。

5)      水質(zhì)量很重要，確保使用蒸餾或者去離子水。

6)      加入樣品或者試劑到空的微孔板時(shí)，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接觸。

7)      孵育時(shí)間的計(jì)算越規(guī)范越好，保持添加標(biāo)準(zhǔn)品的一致性，先添加標(biāo)準(zhǔn)品后添加樣品。

8)      從低濃度到高濃度地添加標(biāo)準(zhǔn)品，降低影響標(biāo)準(zhǔn)品曲線質(zhì)量的風(fēng)險(xiǎn)。

9)      將微孔板置于放有干燥劑的密封袋中，冷藏保存。

樣品的準(zhǔn)備【群勃龍檢測(cè)試劑盒】

確保樣品的正確保存，一般來(lái)說(shuō)，樣品在2-4只能保存1-2天，如果要保存更長(zhǎng)時(shí)間，就要保存在-20冷凍保存，在用之前需要將冷凍的樣品在室溫下或冰箱內(nèi)解凍。

1×樣品提取液

按1：9的比例配制樣品提取濃縮液和雙蒸餾水。

1）飼料（用于檢測(cè)添加到飼料中的魚粉、蝦粉或動(dòng)物組織的SEM）

（1）    取0.5g勻質(zhì)樣品，加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL蒸餾水，0.5mL 1M HCl和20 µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，渦旋振蕩1min；

（2）    50°C恒溫培養(yǎng)3小時(shí)，在培養(yǎng)期間，每1h振蕩5秒；

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH，6 mL 乙酸乙酯，轉(zhuǎn)速渦旋震蕩1min；

（4）    室溫下4000g離心10分鐘；

（5）    取3mL乙酸乙酯上清液（含0.25g初始樣品）到另一試管（避免觸及下層水相！如果

移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機(jī)相），在60-70 °C減壓蒸餾或60-70°C氮?dú)獯蹈桑?/span>

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；

（7）    加入1mL1×樣品提取液，轉(zhuǎn)速渦旋振蕩2分鐘；

（8）    室溫下4000g離心10分鐘；

（9）    每孔取100 µL下清液，進(jìn)行樣品測(cè)試。

稀釋倍數(shù)：4.0

2）魚/蝦/肉（牛肉/雞肉/豬肉）：可用于五合一前處理方法

（1）    稱取1g勻漿樣品加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL蒸餾水，0.5mL 1M HCl和20µL50 mM 2-硝基苯甲醛，渦旋震蕩30秒；

（2）    50°C恒溫培養(yǎng)3h，培養(yǎng)期間，每1h振蕩5秒；（說(shuō)明書后的**標(biāo)記方法可供選擇）

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH， 6 mL 乙酸乙酯，渦旋震蕩振蕩30s；

（4）    室溫下（20-25℃）4000g離心10分鐘；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品)到另一試管（避免觸及下層水相！如果移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機(jī)相），如果出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，上清液不足3mL，請(qǐng)85℃水浴3分鐘。在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮?dú)獯蹈桑?/span>

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；（注：肝臟組織富含脂肪、色素等，為防止乳化現(xiàn)象，建議選用4mL正己烷溶解，渦旋震蕩30秒后，再進(jìn)行下一步操作）

（7）    加入1mL1×樣品提取液，劇烈振蕩1分鐘；

（8）    室溫下4000g離心10分鐘；

（9）    每孔取100 µL下清液，進(jìn)行樣品測(cè)試。

注意：為了避免過高的背景值，建議用空白樣品做平行，從取3ml乙酸乙酯上清旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)開始。

稀釋倍數(shù)：2.0

3）雞蛋【群勃龍檢測(cè)試劑盒】

（1）    稱取1g雞蛋樣品加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL蒸餾水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，劇烈振蕩30秒；

（2）    50°C恒溫培養(yǎng)3小時(shí)，在培養(yǎng)期間，每1h振蕩5秒；（說(shuō)明書后的**標(biāo)記方法可供選擇）

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH， 6 mL 乙酸乙酯，渦旋震蕩振蕩30s；

（4）    室溫下4000g離心10分鐘；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管（避免觸及下層水相！如果移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機(jī)相），在60-70℃減壓蒸餾或60-70℃氮?dú)獯蹈桑?/span>

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；

（7）    加入1mL1×樣品抽提工作液體，劇烈振蕩2分鐘；

（8）    室溫下4000g離心10分鐘；

（9）    每孔取100µL下清液，進(jìn)行樣品測(cè)試。

稀釋倍數(shù)：2.0

注意：為了避免過高的背景值，建議用空白樣品做平行，從取3ml乙酸乙酯上清旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)開始。

4）蜂蜜

（1）    稱取1g蜂蜜加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL雙蒸水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，劇烈振蕩1分鐘；

（2）    50°C恒溫培養(yǎng)3小時(shí)；（說(shuō)明書后的**標(biāo)記方法可供選擇）

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，轉(zhuǎn)速振蕩1min；

（4）    室溫下4000g離心10分鐘；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管（避免觸及下層水相！如果移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機(jī)相），在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮?dú)獯蹈桑?/span>

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；

（7）    加入1mL1×樣品提取液，劇烈振蕩2分鐘；

（8）    室溫下4000g離心10分鐘；

（9）    每孔取100 µL下清液，進(jìn)行樣品測(cè)試。

稀釋倍數(shù)：2.0

5）牛奶

（1）    對(duì)于含脂牛奶，取待測(cè)牛奶樣品3ml室溫4000g，5min。除去上層脂肪層。（對(duì)于脫脂奶粉，次步略）

（2）    取1ml樣品，加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL雙蒸水，0.5mL 1M HCL和40µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，劇烈振蕩1分鐘；

（3）    50°C恒溫培養(yǎng)3小時(shí)；（說(shuō)明書后的**標(biāo)記方法可供選擇）

（4）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH，6 mL 乙酸乙酯，轉(zhuǎn)速振蕩1min；室溫下4000g離心10分鐘；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管（避免觸及下層水相！如果移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機(jī)相），在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮?dú)獯蹈桑?/span>

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；

（7）    加入1mL1×樣品提取液，劇烈振蕩2分鐘；

（8）    室溫下4000g離心10分鐘；

（9）    每孔取100 µL下清液，進(jìn)行樣品測(cè)試。

     稀釋倍數(shù)：2.0

6）血清【群勃龍檢測(cè)試劑盒】

（1）        稱取1g血清加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL雙蒸水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，劇烈振蕩1分鐘；

（2）        50°C恒溫培養(yǎng)3小時(shí)；（說(shuō)明書后的**標(biāo)記方法可供選擇）

（3）        加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，轉(zhuǎn)速振蕩1min；

（4）        室溫下4000g離心10分鐘；

（5）        取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管（避免觸及下層水相！如果移

取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機(jī)相），在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮?dú)獯蹈桑?/span>

（6）        用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；

（7）        加入1mL1×樣品提取液，劇烈

（8）        振蕩2分鐘；

（9）        室溫下4000g離心10分鐘；

（10）    每孔取100 µL下清液，進(jìn)行樣品測(cè)試。

     稀釋倍數(shù)：2.0

7）尿樣

（1）    取3ml尿樣，4000g離心5min。

（2）    離心后稱取1ml，加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL雙蒸水，0.5mL 1M HCL和40µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，劇烈振蕩1分鐘；

（3）    50°C恒溫培養(yǎng)3小時(shí)；（說(shuō)明書后的**標(biāo)記方法可供選擇）

（4）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，轉(zhuǎn)速振蕩1min；

（5）    室溫下4000g離心10分鐘；

（6）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管（避免觸及下層水相！如果移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機(jī)相），在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮?dú)獯蹈桑?/span>

（7）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；

（8）    加入1mL1×樣品提取液，劇烈振蕩2分鐘；

（9）    室溫下4000g離心10分鐘；

（10）    每孔取100 µL下清液，進(jìn)行樣品測(cè)試。

稀釋倍數(shù)：2.0

檢測(cè)步驟

試劑的準(zhǔn)備

注意：試劑在使用之前要在室溫下解凍1-2小時(shí)，確定在使用前閱讀過注意事項(xiàng)。準(zhǔn)備適量的檢測(cè)用試劑，所有的試劑搖勻后使用。準(zhǔn)備足夠所有小管所需的用量，不能將試劑倒回原來(lái)的瓶子中，處理試劑時(shí)建議用廢棄的瓶子以降低污染的風(fēng)險(xiǎn)。

1x洗液的制備

1體積的20x洗液同19體積的蒸餾水混合

檢測(cè)

\以下為計(jì)算份量的表格，用戶可根據(jù)自己的需要來(lái)確定需要配置多少試劑。

（1）    加入100mL的標(biāo)準(zhǔn)品于所設(shè)定的孔中；

（2）    加入100mL的樣品于所設(shè)定的孔中

（3）    在每孔中加入50mL 1×SEM-HRP，輕敲微孔板邊緣混勻1分鐘；

（4）    室溫（22.5±2.5）°C避光孵育30分鐘；

（5）    洗板3次，每次應(yīng)該加入250mL 1×洗液，*后一次使板盡量甩干并在吸水紙上吸干；

（6）    每孔加入100mL的TMB底物；

（7）    在室溫（22.5±2.5）°C避光孵育20分鐘后，每孔加入100mL的終止液終止反應(yīng);

（8）    在450nm或450/650nm下讀OD值 (讀數(shù)前，用吸水紙將板底部的指痕和水分擦去，避免影響讀數(shù))。

10．結(jié)果計(jì)算【群勃龍檢測(cè)試劑盒】

（1）    分別計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)、質(zhì)控和樣品的平均吸光度值和相對(duì)吸光度值。

相對(duì)吸光度值 (%) = (標(biāo)準(zhǔn)或樣品吸光度值/零標(biāo)準(zhǔn)吸光度值) ´ 100

（2）    以相對(duì)吸光度值為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

（3）    從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取質(zhì)控和樣品的濃度值。

（4）    樣品檢測(cè)下限計(jì)算方法如下：

樣品檢測(cè)下限 = (0.025ng/g) ´ (稀釋倍數(shù))

樣品定量下限 = (0.1ng/g) ´ (稀釋倍數(shù))

例如，肉類樣品的稀釋倍數(shù)是2.0,那么肉類樣品的檢測(cè)下限是0.05ppb,定量檢測(cè)下限是0.2ppb。

800090     Ready-Run Rxns.               CNY                             

765312     PAXgene TissueFIX Cont. (50 ml) Kit                  CNY                             

132009     EasyXtal 15-Well Tool X-Seal (100)   "100 empty 15-well crystallization plates with X-Seal crystallization supports (5 boxes of 20)

For manual setup of hanging ｄrop crystallization experiments."    CNY                              【群勃龍檢測(cè)試劑盒】

762931     Buffer BM3 Wash buffer 8 x 150 ml conc.                 CNY                             

204054     QuantiFast SYBR Green PCR Kit (400)               CNY                             

203741     QIAGEN Fast Cycling PCR Kit (50)    "Trial Kit: For 50 x 20 µl reactions: 1 x 0.5 ml Fast Cycling Master Mix (2x), RNase-free water, 10 x CoralLoad Fast Cycling Dye, 5 x Q-Solution

-to be used as sample Kit"        CNY                             

159340     Sterile Foam-Tipped Swabs (100)              CNY                             

158906     Cell Lysis Solution (125 ml)                 CNY                             

35061       Ni-NTA HisSorb Plates (5)          5 Ni-NTA-coated, transparent 96-well plates  CNY                             

678891     ipsogen MLL-DUP e2e8 Standards            CNY                             

678591     ipsogen MLL-AF9 e8e10 Standards           CNY                             

678191     ipsogen MLL-AF4 e10e4 Standards           CNY                             

34460       Penta.His HRP Conjugate Kit   125 ul Penta-His HRP Conjugate, 5 g Blocking Reagent, 50 ml Blocking Reagent Buffer (10x concentrate)    CNY                             

32746       EasyXpress Linear Template Fab Kit (100)                 CNY                             

32501       EasyXpress Protein Synthesis Kit (5)         "- Kit for cell-free protein expression in E.coli cell-free extracts.

- The same as the EasyXpress Protein Synthesis Kit (20) (former EasyXpress Protein Synthesis Mini Kit), but only 5 instead of 20 reactions

- Ideal for testing ａnd expression of QIAgenes"       CNY                             

30900       Glutathione HiCap Matrix (10 ml)             CNY                             

28181       QIAquick 96 PCR Purification Kit (4)         For purification of 4 x 96 PCR reactions: 4 QIAquick 96 Plates, Buffers, Collection Microtubes (1.2 ml), Caps        CNY                             

9011595  Tip adapter, 300 µl, 120 mm, v2.04                  CNY                             

9011565  Shaker, 4-plate for Plato 7                 CNY                             【群勃龍檢測(cè)試劑盒】

9013185  Tubing, waste, Dispense           CNY                             

9013174  Connector, tubing, 1-8, BR8000                CNY                             

9013169  Tubing, syringe inlet 1, BR8000                 CNY                             

9011433  BGR Z-Motor P1300 Spez. MWG              CNY                             

9011422  Tip Rack Holder, RCS1               CNY                             

9243119  Green Laser Contr. Coherent 115M-13, LC               CNY                             

9243556  HC2, Full Agreement        "Service response time (on-site repair):not applicable

Periodic inspection/maintenance: yes, 1/agreement year

Cost coverage depot repair (parts, labor, packaging, shipping): yes, full coverage

For defect DML, after customer calling QIAGEN technical service hotline before 12 am:

- A special package containing a replacement unit shall be sent to the customer within 2 working days.

- Customer shall send the defect unit to QIAGEN Regional Repair Center following the instructions attached with the packaging.  

For DML owned by customer, QIAGEN Regional Repair Center will send back the repaired original unit to customers within 7-10 working days.

PC, Monitor, Heater, Shaker, Washer, Printer ａnd Votexer:

- A new unit shall be sent to customer within  7-10 working days at no extra cost

- Customer shall send the defect unit to QIAGEN for disposal

- On-site installation of PC ａnd application software is not covered by the agreement

The Preventive Maintenance (PM) service ensures the correct operation of the equipment. During the PM, all the instrument modules are inspected by a qualified QIAGEN service technician. The Preventive Maintenance is performed under the manufacturer guidelines ａnd documented according to GLP / GMP"    CNY                             

101.901-24       #HLA-DQB1*0602; DQA1*0102 incl.Taq (24)           CNY                             

9241033  #Tube insert, 11 mm, sample carr            CNY                             

9242760  #Warranty PLUS 1, Prem/RRL, 1PM,QSYM RGQ              CNY                             

677491     ipsogen NPM1 mut A gDNA MutaQuant Stds          CNY                             

9011164  Roller, deflection, X-drive, BR8000           CNY                             

9010980  BGR 1-er Shaker PK80 (1177)           CNY                             

133215     NeXtalStock MMT pH 9.0 (200)                 CNY                             

NG0361   Xmol/L草酸     6元/100ml                                           

NG0362   Hank’s液      24元/200ml                                         

NG0363   2,4－二硝基苯肼   8元/100ml                                           

NG0364   4.0mol/L氫氧化鈉 8元/100ml                                           

NG0365   任氏液     6元/100ml                                           

NG0366   超氧化物歧化酶SOD檢測(cè)試劑盒         1管 比色法                                

NG0367   丙二醛MDA檢測(cè)試劑盒       1管 比色法                                

NG0368   黃嘌呤氧化酶XOD檢測(cè)試劑盒    1管 比色法                                

NG0369   總抗氧化能力T－AOC檢測(cè)試劑盒      1管 比色法                                

NG0370   羥自由基檢測(cè)試劑盒     1管 比色法                                 【群勃龍檢測(cè)試劑盒】

NG0371   髓過氧化物酶MPO檢測(cè)試劑盒   1管 比色法                                

NG0372   過氧化氫酶CAT檢測(cè)試劑盒          1管 紫外比色法                                

NG0373   谷胱甘肽－S轉(zhuǎn)移酶GSH－ST檢測(cè)試劑盒 1管 比色法                                

NG0374   谷胱甘肽過氧化物酶GSH－PX檢測(cè)試劑盒         1管 比色法                                

NG0375   氧化型谷胱甘肽GSSG檢測(cè)試劑盒       1管 比色法                                

NG0376   谷胱甘肽還原酶GR檢測(cè)試劑盒  1管 比色法                                

NG0377   還原型谷胱甘肽GSH檢測(cè)試劑盒         1管 比色法                                

NG0378   巰基-SH檢測(cè)試劑盒       1管 比色法                                

NG0379   單胺氧化酶MAO檢測(cè)試劑盒       1管 紫外比色法                                

NG0381   一氧化氮NO硝酸還原酶法檢測(cè)試劑盒      1管 比色法                                

NG0382   一氧化氮合成酶誘導(dǎo)型檢測(cè)試劑盒     1管 比色法                                

NG0383   一氧化氮合成酶總NOS檢測(cè)試劑盒    1管 比色法                                

NG0384   乳酸LD血清、組織檢測(cè)試劑盒  1管 比色法                                

NG0385   乳酸LD全血檢測(cè)試劑盒       1管 比色法                                

NG0386   乳酸脫氫酶LDH檢測(cè)試劑盒         1管 比色法                                

NG0387   ATP酶鈉鉀、鈣鎂ATP酶檢測(cè)試劑盒  1管 比色法                                 【群勃龍檢測(cè)試劑盒】

NG0388   鈉鉀、鈣鎂ATP酶中任一項(xiàng)檢測(cè)試劑盒     1管 比色法                                

NG0389   超微量ATP酶檢測(cè)試劑盒     1管 比色法                                

NG0390   鈉鉀、鈣鎂ATP酶中任一項(xiàng)檢測(cè)試劑盒                                                   

NG0391   琥珀酸脫氫酶SDH檢測(cè)試劑盒    1管 比色法                                

NG0392   肌酸激酶CK檢測(cè)試劑盒       1管 比色法                                

NG0393   膽堿酯酶CHE檢測(cè)試劑盒    1管 比色法                                

NG0394   乙酰膽堿酯酶T－CHE檢測(cè)試劑盒       1管 比色法