高回收率(75%-105%)，多種樣品的低成本提取方法；高重復(fù)性；檢測過程只需要不到1.5小時；五合一處理方法更省時、經(jīng)濟(jì)、環(huán)保。

產(chǎn)品概述

阿苯達(dá)唑檢測試劑盒酶聯(lián)免疫反應(yīng)測試盒基于競爭性酶聯(lián)反應(yīng)原理，含有阿苯達(dá)唑檢測試劑盒(SEM)的抗體已經(jīng)包被于微孔板上。藥物分析時，樣品同SEM-HRP共同被添加到板孔中。如果樣品中含有SEM，會競爭SEM抗體，抑制SEM-HRP與板上包被的抗體結(jié)合。加入底物后，產(chǎn)物的顏色強(qiáng)弱與樣品中SEM的濃度成反比。

 試劑盒組成

已包被的酶標(biāo)板（可拆式）                                            12×8 孔

標(biāo)準(zhǔn)液（0，0.025，0.1，0.4，1.6，6.4ppb）                              6×2.0mL

回收用10ppb(Spiking)——可選                                        1×0.8ml

HRP酶標(biāo)抗原(HRP-Conjugated)                                         1×6mL

10×樣品提取液(Sample Extraction Buffer)                             1×25mL

20×濃縮洗液(Wash Solution)                                          1×30mL

終止液(Stop Buffer)                                                  1×20mL

TMB底物(TMB Substrate)                                               1×10mL

50mM 2-硝基苯甲醛(2-Nitrobenzaldehyde)                               1×1.8mL

本試劑盒應(yīng)當(dāng)在2-8℃的溫度下儲存，有效期為一年。如果超過3個月不使用試劑盒，

請將SEM-HRP酶標(biāo)抗原放置-20℃或者冰凍保存。

檢測試劑盒以外需要提供的設(shè)備或材料

1)      酶標(biāo)儀(450 nm)

2)      恒溫培養(yǎng)箱

3)      勻漿器

4)      蒸干器

5)      漩渦振蕩器

6)      移液槍(50，100mL，1mL各一支)

7)      多道移液器（50-300mL）

8)      乙酸乙酯

9)      0.1M K₂HPO₄

10) 正己烷

注意事項

實驗前請閱讀以下文字，以保證獲得*佳實驗效果。

1)      標(biāo)準(zhǔn)品中含有阿苯達(dá)唑檢測試劑盒，請小心使用。

2)      不要使用過期的試劑盒。

3)      不同批次的試劑盒不要混用，抗體和微孔板具有盒與批次的特異性。

4)      盡量保持室溫20-25℃，避免在通風(fēng)口操作防止溫度過低，過熱和/或者蒸發(fā)。同樣的，不要在陽光直射下實驗，防止過熱及蒸發(fā)。在孵育期間，如果工作臺溫度過低，應(yīng)該鋪墊若干紙巾或者其他物料。

5)      水質(zhì)量很重要，確保使用蒸餾或者去離子水。

6)      加入樣品或者試劑到空的微孔板時，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接觸。

7)      孵育時間的計算越規(guī)范越好，保持添加標(biāo)準(zhǔn)品的一致性，先添加標(biāo)準(zhǔn)品后添加樣品。

8)      從低濃度到高濃度地添加標(biāo)準(zhǔn)品，降低影響標(biāo)準(zhǔn)品曲線質(zhì)量的風(fēng)險。

9)      將微孔板置于放有干燥劑的密封袋中，冷藏保存。

樣品的準(zhǔn)備【阿苯達(dá)唑檢測試劑盒】

確保樣品的正確保存，一般來說，樣品在2-4只能保存1-2天，如果要保存更長時間，就要保存在-20冷凍保存，在用之前需要將冷凍的樣品在室溫下或冰箱內(nèi)解凍。

1×樣品提取液

按1：9的比例配制樣品提取濃縮液和雙蒸餾水。

1）飼料（用于檢測添加到飼料中的魚粉、蝦粉或動物組織的SEM）

（1）    取0.5g勻質(zhì)樣品，加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL蒸餾水，0.5mL 1M HCl和20 µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，渦旋振蕩1min；

（2）    50°C恒溫培養(yǎng)3小時，在培養(yǎng)期間，每1h振蕩5秒；

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH，6 mL 乙酸乙酯，轉(zhuǎn)速渦旋震蕩1min；

（4）    室溫下4000g離心10分鐘；

（5）    取3mL乙酸乙酯上清液（含0.25g初始樣品）到另一試管（避免觸及下層水相！如果

移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機(jī)相），在60-70 °C減壓蒸餾或60-70°C氮?dú)獯蹈桑?/span>

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；

（7）    加入1mL1×樣品提取液，轉(zhuǎn)速渦旋振蕩2分鐘；

（8）    室溫下4000g離心10分鐘；

（9）    每孔取100 µL下清液，進(jìn)行樣品測試。

稀釋倍數(shù)：4.0

2）魚/蝦/肉（牛肉/雞肉/豬肉）：可用于五合一前處理方法

（1）    稱取1g勻漿樣品加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL蒸餾水，0.5mL 1M HCl和20µL50 mM 2-硝基苯甲醛，渦旋震蕩30秒；

（2）    50°C恒溫培養(yǎng)3h，培養(yǎng)期間，每1h振蕩5秒；（說明書后的**標(biāo)記方法可供選擇）

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH， 6 mL 乙酸乙酯，渦旋震蕩振蕩30s；

（4）    室溫下（20-25℃）4000g離心10分鐘；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品)到另一試管（避免觸及下層水相！如果移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機(jī)相），如果出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，上清液不足3mL，請85℃水浴3分鐘。在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮?dú)獯蹈桑?/span>

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；（注：肝臟組織富含脂肪、色素等，為防止乳化現(xiàn)象，建議選用4mL正己烷溶解，渦旋震蕩30秒后，再進(jìn)行下一步操作）

（7）    加入1mL1×樣品提取液，劇烈振蕩1分鐘；

（8）    室溫下4000g離心10分鐘；

（9）    每孔取100 µL下清液，進(jìn)行樣品測試。

注意：為了避免過高的背景值，建議用空白樣品做平行，從取3ml乙酸乙酯上清旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)開始。

稀釋倍數(shù)：2.0

3）雞蛋【阿苯達(dá)唑檢測試劑盒】

（1）    稱取1g雞蛋樣品加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL蒸餾水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，劇烈振蕩30秒；

（2）    50°C恒溫培養(yǎng)3小時，在培養(yǎng)期間，每1h振蕩5秒；（說明書后的**標(biāo)記方法可供選擇）

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH， 6 mL 乙酸乙酯，渦旋震蕩振蕩30s；

（4）    室溫下4000g離心10分鐘；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管（避免觸及下層水相！如果移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機(jī)相），在60-70℃減壓蒸餾或60-70℃氮?dú)獯蹈桑?/span>

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；

（7）    加入1mL1×樣品抽提工作液體，劇烈振蕩2分鐘；

（8）    室溫下4000g離心10分鐘；

（9）    每孔取100µL下清液，進(jìn)行樣品測試。

稀釋倍數(shù)：2.0

注意：為了避免過高的背景值，建議用空白樣品做平行，從取3ml乙酸乙酯上清旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)開始。

4）蜂蜜

（1）    稱取1g蜂蜜加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL雙蒸水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，劇烈振蕩1分鐘；

（2）    50°C恒溫培養(yǎng)3小時；（說明書后的**標(biāo)記方法可供選擇）

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，轉(zhuǎn)速振蕩1min；

（4）    室溫下4000g離心10分鐘；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管（避免觸及下層水相！如果移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機(jī)相），在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮?dú)獯蹈桑?/span>

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；

（7）    加入1mL1×樣品提取液，劇烈振蕩2分鐘；

（8）    室溫下4000g離心10分鐘；

（9）    每孔取100 µL下清液，進(jìn)行樣品測試。

稀釋倍數(shù)：2.0

5）牛奶

（1）    對于含脂牛奶，取待測牛奶樣品3ml室溫4000g，5min。除去上層脂肪層。（對于脫脂奶粉，次步略）

（2）    取1ml樣品，加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL雙蒸水，0.5mL 1M HCL和40µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，劇烈振蕩1分鐘；

（3）    50°C恒溫培養(yǎng)3小時；（說明書后的**標(biāo)記方法可供選擇）

（4）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH，6 mL 乙酸乙酯，轉(zhuǎn)速振蕩1min；室溫下4000g離心10分鐘；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管（避免觸及下層水相！如果移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機(jī)相），在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮?dú)獯蹈桑?/span>

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；

（7）    加入1mL1×樣品提取液，劇烈振蕩2分鐘；

（8）    室溫下4000g離心10分鐘；

（9）    每孔取100 µL下清液，進(jìn)行樣品測試。

     稀釋倍數(shù)：2.0

6）血清【阿苯達(dá)唑檢測試劑盒】

（1）        稱取1g血清加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL雙蒸水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，劇烈振蕩1分鐘；

（2）        50°C恒溫培養(yǎng)3小時；（說明書后的**標(biāo)記方法可供選擇）

（3）        加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，轉(zhuǎn)速振蕩1min；

（4）        室溫下4000g離心10分鐘；

（5）        取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管（避免觸及下層水相！如果移

取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機(jī)相），在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮?dú)獯蹈桑?/span>

（6）        用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；

（7）        加入1mL1×樣品提取液，劇烈

（8）        振蕩2分鐘；

（9）        室溫下4000g離心10分鐘；

（10）    每孔取100 µL下清液，進(jìn)行樣品測試。

     稀釋倍數(shù)：2.0

7）尿樣

（1）    取3ml尿樣，4000g離心5min。

（2）    離心后稱取1ml，加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL雙蒸水，0.5mL 1M HCL和40µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，劇烈振蕩1分鐘；

（3）    50°C恒溫培養(yǎng)3小時；（說明書后的**標(biāo)記方法可供選擇）

（4）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，轉(zhuǎn)速振蕩1min；

（5）    室溫下4000g離心10分鐘；

（6）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管（避免觸及下層水相！如果移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機(jī)相），在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮?dú)獯蹈桑?/span>

（7）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；

（8）    加入1mL1×樣品提取液，劇烈振蕩2分鐘；

（9）    室溫下4000g離心10分鐘；

（10）    每孔取100 µL下清液，進(jìn)行樣品測試。

稀釋倍數(shù)：2.0

檢測步驟

試劑的準(zhǔn)備

注意：試劑在使用之前要在室溫下解凍1-2小時，確定在使用前閱讀過注意事項。準(zhǔn)備適量的檢測用試劑，所有的試劑搖勻后使用。準(zhǔn)備足夠所有小管所需的用量，不能將試劑倒回原來的瓶子中，處理試劑時建議用廢棄的瓶子以降低污染的風(fēng)險。

1x洗液的制備

1體積的20x洗液同19體積的蒸餾水混合

檢測

\以下為計算份量的表格，用戶可根據(jù)自己的需要來確定需要配置多少試劑。

（1）    加入100mL的標(biāo)準(zhǔn)品于所設(shè)定的孔中；

（2）    加入100mL的樣品于所設(shè)定的孔中

（3）    在每孔中加入50mL 1×SEM-HRP，輕敲微孔板邊緣混勻1分鐘；

（4）    室溫（22.5±2.5）°C避光孵育30分鐘；

（5）    洗板3次，每次應(yīng)該加入250mL 1×洗液，*后一次使板盡量甩干并在吸水紙上吸干；

（6）    每孔加入100mL的TMB底物；

（7）    在室溫（22.5±2.5）°C避光孵育20分鐘后，每孔加入100mL的終止液終止反應(yīng);

（8）    在450nm或450/650nm下讀OD值 (讀數(shù)前，用吸水紙將板底部的指痕和水分擦去，避免影響讀數(shù))。

10．結(jié)果計算【阿苯達(dá)唑檢測試劑盒】

（1）    分別計算標(biāo)準(zhǔn)、質(zhì)控和樣品的平均吸光度值和相對吸光度值。

相對吸光度值 (%) = (標(biāo)準(zhǔn)或樣品吸光度值/零標(biāo)準(zhǔn)吸光度值) ´ 100

（2）    以相對吸光度值為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

（3）    從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取質(zhì)控和樣品的濃度值。

（4）    樣品檢測下限計算方法如下：

樣品檢測下限 = (0.025ng/g) ´ (稀釋倍數(shù))

樣品定量下限 = (0.1ng/g) ´ (稀釋倍數(shù))

例如，肉類樣品的稀釋倍數(shù)是2.0,那么肉類樣品的檢測下限是0.05ppb,定量檢測下限是0.2ppb。

9001905  #QIAgility (w/o PC) System       QIAgility (w/o PC) System combines the QIAgility instrument ａnd installation. The Installation plus Introductory Training is an on-site service, conducted by a QIAGEN Service Specialist. It provides the user with training on operation ａnd user maintenance. All travel ａnd labor cost included for Installation. Performance of the installation process is documented on a GMP/GLP-compliant Field Service document.    CNY                             

800383     Open Reading Frame Search            CNY                             

9019052  Notebook 2 XP          CNY                             

9020200  ZLV PCB, USB, 18Q            CNY                             

9020580  Cable, DB9 M/F (UL) 6ft, DML 3000                  CNY                             

9020588  Pulley, belt, DML 3000              CNY                             

9021016  Robot Stage, X Axis, VR, DCU           CNY                             

9013376  Maintenance Kit BR 8000 Research                  CNY                             

9013279  BGR Upgrade-Kit Scanner PK80                CNY                             

9013272  Peristaltic Pump, RCS1              CNY                             

9013190  Motor, rotor, buffer track, BR8000          CNY                              【阿苯達(dá)唑檢測試劑盒】

132772     NeXtal Stock Jeffamine M-600 (200)        100% v/v O-(2-Aminopropyl)-O＇-(2-methoxyethyl)polypropylene 500 - 200mL (20 x 10 ml tube)       CNY                             

132620     NeXtal Stock Tricine (50) 1M Tricine - 50mL (4 x 12,5 ml tube)        CNY                             

132560     NeXtal Stock Magnesium chloride (50)    2M Magnesium chloride hexahydrate - 50mL (4 x 12,5 ml tube)    CNY                            

800171     Easy-Read Tubes, w/o prep      "Sequencing of plasmid DNA ａnd PCR products

DNA quality control not included

No repetition of sequencing

Data collected to maximal read length" CNY                             

132546     NeXtal Stock Ferric chloride (50)      1M Ferric Chloride Hexahydrate - 50mL (4 x 12,5 ml tube)     CNY                             

132008     EasyXtal 15-Well Tool X-Seal (20)      "20 empty 15-well crystallization plates with X-Seal crystallization supports

For manual setup of hanging ｄrop crystallization experiments."    CNY                             

203645     HotStarTaq Plus Master Mix Kit (1000)   "For 1000 x 20 µl reactions: 12 x 0.85 ml HotStarTaq Plus Master Mix, containing 1000 units of HotStarTaq Plus DNA Polymerase total, 4 x 0.55 ml CoralLoad Concentrate, 8 x 1.9 ml RNase-Free Water

HotStarTaq Plus Master Mix Kits offer all the benefits of great specificity, sensitivity, ａnd performance as HotStarTaq Plus DNA Polymerase NOW in a ｍaster mix format, which offers even faster results ａnd added convenience."  CNY                             

203603     HotStarTaq Plus DNA Polymerase (250)  1 x 250 units HotStarTaq Plus DNA Polymerase, 10x PCR Buffer, 10x CoralLoad PCR Buffer, 5x Q-Solution, 25 mM MgCl2        CNY                             

203601     HotStarTaq Plus DNA Polymerase (50)    Non published.          CNY                             

201912     dNTP Set, PCR Grade 100mM, (4x100µl)        dNTP Set is a complete set of individual, highly pure dNTPs: 100 mM each dATP, dCTP, dGTP, dTTP for 1000 x 50ul PCR reactions      CNY                             

201223     Taq PCR Core Kit (250)     "250 units Taq DNA Polymerase, 10x PCR Buffer,* 5x Q-Solution, 25 mM MgCl2, dNTP Mix†

NEW! Now with 10x CoralLoad PCR Buffer

Taq DNA Polymerase is now supplied with CoralLoad PCR Buffer, which has all of the advantages of QIAGEN PCR Buffer but can also be used to directly load the PCR reaction onto an agarose gel without the need to add a gel loading buffer. CoralLoad PCR Buffer provides the same high PCR specificity ａnd minimal reaction optimization as conventional QIAGEN PCR Buffer. Additionally, it contains two marker dyes: an orange dye ａnd a red dye, that facilitate estimation of DNA migration distance ａnd optimization of agarose gel run time."         CNY                             

180840     GeneRead qPCR SYBR Green/ROX MM (2)               CNY                             

180830     GeneRead qPCR SYBR Green/Fluor MM (2)              CNY                             

158767     Gentra Puregene Cell Kit (8 x 108)           CNY                             

34650       RGS·His Antibody, BSA-free (100 µg)       100 ug mouse anti-RGS(H)4 (lyophilized, BSA-free, for 1000 ml working solution)         CNY                             

32582       EasyXpress Disulfide Insect 10 rxns Kit              CNY                              【阿苯達(dá)唑檢測試劑盒】

32149       QIAexpress Type IV Kit     5 ug each: pQE-30, pQE-31, pQE-32 (N-terminal 6xHis); 10 ml Ni-NTA Agarose. pQE-40        CNY                             

31014       Ni-NTA Spin Columns (50)         50 Ni-NTA Spin Columns, Collection Tubes        CNY                             

30600       Ni-NTA Fast Start Kit (6)            CNY                             

9021350  Piston, connecting rod, TLyser LT              CNY                             

9022027  Sensor, Y-axis, with cable, QXA                  CNY                             

9002142  careHPV test Controller            CNY                             

QY-x1921 A2 肺腺癌 HL-60 白血病                                                 

QY-x1922 A549 肺腺癌 Daudi B淋巴細(xì)胞瘤                                                     【阿苯達(dá)唑檢測試劑盒】

QY-x1923 A549/DDP 肺腺癌/順鉑耐藥株 Raji Burkitt淋巴瘤                                                

QY-x1924 Calu-3 肺腺癌RAMOS B淋巴細(xì)胞瘤                                                

QY-x1925 GLC-82 肺腺癌 THP 1 單核細(xì)胞型淋巴瘤                                                       

QY-x1926 H1299 肺腺癌 U-937 淋巴瘤                                                   

QY-x1927 NCI-H157 非小細(xì)胞肺腺癌 RPMI-8226 多發(fā)骨髓瘤                                                      

QY-x1928 LTEP-P 小細(xì)胞肺癌 SHG-44 腦惡性膠質(zhì)瘤                                                     

QY-x1929 NCI-H209 小細(xì)胞肺癌 U251 神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤                                                        

QY-x1930 NCI-H345 小細(xì)胞肺癌 M17 神經(jīng)母細(xì)胞瘤                                                     

QY-x1931 NCI-H446 小細(xì)胞肺癌 LAN-5 神經(jīng)母細(xì)胞瘤                                                  

QY-x1932 Bcap-37 乳腺髓樣癌 LAN-6 神經(jīng)母細(xì)胞瘤                                                     

QY-x1933 BT474 乳腺導(dǎo)管瘤 SK-N-SH 神經(jīng)母細(xì)胞瘤                                                    

QY-x1934 MDA-MB-157 乳腺癌 SH-SY5Y 神經(jīng)母細(xì)胞瘤                                               

QY-x1935 MDA-MB-231 乳腺導(dǎo)管癌 SF126 腦瘤                                                    

QY-x1936 MDA-MB-453 乳腺癌 SF17 腦瘤                                                      

QY-x1937 T47D 乳腺導(dǎo)管癌 SF763 腦瘤                                                 

QY-x1938 ZR-75-1 乳腺導(dǎo)管癌 SF767 腦瘤                                                       【阿苯達(dá)唑檢測試劑盒】

QY-x1939 A10大鼠主動脈平滑肌                                                       

QY-x1940 人主動脈平滑肌　CNE-1 高分化鼻咽鱗癌 1640+10%胎牛血清                                                   

QY-x1941 CNE-2 低分化鼻咽鱗癌 1640+10%胎牛血清                                                    

QY-x1942 KB 口腔表皮樣癌 1640+10%胎牛血清                                                      

QY-x1943 Hep-2 喉癌 1640+10%胎牛血清                                               

QY-x1944 Ec109 食管癌 1640+10%胎牛血清                                                    

QY-x1945 KYSE 450 食管癌 1640+10%胎牛血清                                              

QY-x1946 KYSE 150 食管鱗癌 1640+10%胎牛血清                                                   

QY-x1947 EC97076 食管癌 1640+10%胎牛血清                                               

QY-x1948 BGC-823 胃腺癌 1640+10%胎牛血清                                               

QY-x1949 MGC-803 胃腺癌 1640+10%胎牛血清                                                       

QY-x1950 SGC7901 胃低分化腺癌 1640+10%胎牛血清(P53基因第六外顯子204位密碼發(fā)生缺失突變)                                                  

QY-x1951 MKN-45 低分化胃癌 1640+10%胎牛血清                                                

QY-x1952 HuTu-80 十二指腸腺癌 MEM+非必需氨基酸+10%胎牛血清                                                 

QY-x1953 Caco-2 結(jié)腸癌 MEM+非必需氨基酸+10%胎牛血清