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（請(qǐng)以英文為準(zhǔn)，中文僅供參考）

試劑盒特點(diǎn)【喹乙醇檢測(cè)試劑盒】

1.AP單克隆抗體特異地與AP結(jié)合，和其它結(jié)構(gòu)相類(lèi)似的化學(xué)物質(zhì)不發(fā)生交叉反應(yīng)。單克隆抗體質(zhì)量穩(wěn)定每批次見(jiàn)幾乎沒(méi)有變化。

2.檢測(cè)范圍5μg/L - 500μg/L (ppb) 。通過(guò)固相萃取濃縮可以檢測(cè)更低的濃度。

3.這個(gè)試劑盒有很高的重復(fù)性，變異系數(shù)在10%之內(nèi)。

4.操作簡(jiǎn)單，整個(gè)過(guò)程僅花費(fèi)2.5小時(shí)

5.試劑盒的形式是96孔微孔板，可以同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣品，花費(fèi)合理。

檢測(cè)原理 （競(jìng)爭(zhēng)ELISA）

1. 競(jìng)爭(zhēng)性反應(yīng)

這個(gè)檢測(cè)方法依靠單克隆抗體來(lái)識(shí)別AP。樣品中的AP和一個(gè)AP-酶結(jié)合物預(yù)先混合然后加入到每個(gè)微孔中競(jìng)爭(zhēng)包被在微孔表面的特異性抗體。樣品中AP的濃度如果高于AP-酶結(jié)合物，AP將主要與抗體結(jié)合。反之樣品中AP的濃度如果低于于AP-酶結(jié)合物，AP-酶結(jié)合物將主要與抗體結(jié)合。

2. 顯色反應(yīng)

通過(guò)洗滌步驟去除沒(méi)有反應(yīng)的AP和過(guò)多的AP-酶結(jié)合物。通過(guò)加入底物來(lái)檢測(cè)AP。和微孔板中抗體結(jié)合的AP-酶結(jié)合物催化底物發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生有色物質(zhì)。通過(guò)一個(gè)孵育期用稀酸終止反應(yīng)。樣品中AP的濃度越高導(dǎo)致結(jié)合到微孔板抗體上的AP-酶結(jié)合物越少，從而產(chǎn)生的顏色越淡，吸光度越低。

3. 定量分析

利用已知濃度的AP標(biāo)準(zhǔn)的濃度和在450nm條件下獲得的吸光度值做出一條劑量反應(yīng)曲線(xiàn)（標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)）。把樣品的吸光度值用內(nèi)插法插入到標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)中可以精確的計(jì)算出樣品中AP的濃度。

AP 檢測(cè)流程【喹乙醇檢測(cè)試劑盒】

1.樣品處理

在操作前半小時(shí)從冰箱中拿出試劑盒使其恢復(fù)到室溫（18-25°C）。過(guò)濾樣品，加入甲醇和DMSO使甲醇的*終濃度為10% (v/v),DMSO的*終濃度為1%(v/v)。對(duì)于一些樣品進(jìn)行固相萃取是必要的。

2. 標(biāo)準(zhǔn)溶液

利用甲醇溶液（甲醇：水 0.8：8.2）把AP標(biāo)準(zhǔn)濃縮液稀釋10倍。然后對(duì)此溶液進(jìn)一步稀釋成設(shè)定的AP標(biāo)準(zhǔn)的濃度（5μg/L- 500μg/L）。在配制的時(shí)候先加甲醇溶液后加標(biāo)準(zhǔn)。

3. 抗原-酶結(jié)合物溶液

重新配制一瓶抗原-酶結(jié)合物溶液：抗原-酶結(jié)合物粉末(#3) + 緩沖液(#4, 白蓋).

4. 標(biāo)準(zhǔn)/樣品 與結(jié)合物混合

在沒(méi)有包被的微孔板中(#8)混合100μL AP標(biāo)準(zhǔn)（或樣品）和100μL酶結(jié)合物溶液。先加結(jié)合物后加標(biāo)準(zhǔn)或樣品。

5. 競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)

在包被抗體的微孔板(#1)的每個(gè)孔中加入100μL在第四步中混合的溶液，在室溫(18-25°C)孵育60分鐘。

6. 洗液

用蒸餾水以1：5的比例稀釋洗液（6倍濃縮）：1ml 洗液(#5) + 5ml蒸餾水

7. 沒(méi)有結(jié)合的物質(zhì)

每個(gè)微孔用300μL的洗液沖洗，并重復(fù)兩次。在吸水紙上用力的排板出去微孔中的液體。

8. 顯色

每個(gè)微孔加入100μL顯色試劑(#6, 棕色瓶)，在室溫(18-25°C)孵育30分鐘。然后加入每孔再100μL的終止液(#7, 黑蓋)終止反應(yīng)。

10. 定量

在450nm測(cè)定每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。利用內(nèi)插法把樣品的吸光度值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中AP的含量。

所需材料【喹乙醇檢測(cè)試劑盒】

必需 – 樣品濃縮時(shí)不需要

1.一次性玻璃試管(e.g. IWAKI, item No. 9831-1207)確保要使用一次性試管避免AP的吸附作用

2.玻璃纖維濾器(e.g. ADVANTEC Co., item No. 36481047 Φ47mm)和過(guò)濾設(shè)備

3.微量加液器(20μL - 200μL 和100μL - 1000μL, e.g. Gilson Pipetman P-200, P-1000)和吸頭

(e.g. ICN Superpack 96NS)

4.排槍(50μL - 300μL)

5.酶標(biāo)儀（450nm波長(zhǎng)）(e.g. TECAN Sunrise Remote)

6.計(jì)時(shí)器

7.Strip ejector (e.g. COSTAR, No.2578)

8.甲醇Methanol (HPLC grade)

9.DMSO(HPLC grade)

2）必需- 通過(guò)SPE 濃縮時(shí)需要

n         以上的材料都需要,再加上下面的材料

n         固體萃取柱(e.g. NEXUS SPE Cartridge Producer: VARIAN PART#:1210-3102 ABS ELUT- NEXUS, 200MG 6ML,30/PK)

n         丙酮(HPLC grade)

n         二氯甲烷(analytical reagent)

3、重要性

如果在試驗(yàn)過(guò)程中使用一些沒(méi)有使用過(guò)的廠家生產(chǎn)的產(chǎn)品試劑時(shí)需要做比較試驗(yàn)。

檢測(cè)步驟【喹乙醇檢測(cè)試劑盒】

重要性

1.僅用于研究、不用于個(gè)人

2.在操作前半小時(shí)從冰箱中拿出試劑盒使其恢復(fù)到室溫（18-25°C）。

3.不同試劑盒的中的試劑不要混用

4.儲(chǔ)存在2-8 °C

5.不使用過(guò)期產(chǎn)品

6.使用完試劑盒后根據(jù)當(dāng)?shù)氐姆ㄒ?guī)處理廢液。

7.為了增加準(zhǔn)確性推薦在檢測(cè)中做兩個(gè)重復(fù)。

注意

在試驗(yàn)中要穿保護(hù)性衣服，戴手套和眼鏡保證和試劑盒中的液體接觸。

1．樣品前處理

利用特定的玻璃纖維濾紙(1μm 孔徑)過(guò)濾水樣，加入DMSO和甲醇使DMSO終濃度為1% (v/v)、甲醇終濃度

為10% (v/v)。如果濾液要求濃縮和清洗需要固相萃取。

例子

1）將上面制備濾液過(guò)NEXUS cartridge柱（已經(jīng)用二氯甲烷(ex. 10ml)、甲醇(ex. 5ml)、蒸餾水(ex. 5ml)提前處理好的），流速10mL/min

2）用蒸餾水(ex. 5ml)和50%蒸餾水/甲醇(ex. 5ml)洗柱。真空干燥柱不超過(guò)45分鐘。

3）用二氯甲烷(ex. 6ml)洗脫分析物、然后用氮?dú)猓ㄔ?0攝氏度或更低的溫度）吹干。

4）加入甲醇和DMSO溶液溶解殘留物，調(diào)節(jié)溶液的終濃度到1%DMSO和10%甲醇溶液。

2.  標(biāo)準(zhǔn)溶液

制備甲醇溶液（甲醇：蒸餾水=0.8 ml/8.2ml）以備稀釋標(biāo)準(zhǔn)(#2, 10% v/v DMSO, 20% v/v

methanol)使用。利用上面制備的甲醇溶液以1：9的比例稀釋AP標(biāo)準(zhǔn)(#2)來(lái)配制設(shè)定的AP標(biāo)準(zhǔn)溶液(1% v/v DMSO, 10% v/v methanol)。

1）在配制標(biāo)準(zhǔn)溶液的過(guò)程中先加甲醇溶液后加標(biāo)準(zhǔn)(#2)。這樣可以減少AP對(duì)試管壁的吸附。

2）推薦使用一次性玻璃試管來(lái)稀釋標(biāo)準(zhǔn)，可以減少吸附和污染。

3）如果不經(jīng)過(guò)10倍稀釋儲(chǔ)存液的步驟直接稀釋到設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，那么標(biāo)準(zhǔn)的真實(shí)濃度將要比計(jì)劃的濃度要大，所測(cè)定的吸光度的值要小0.2-0.5。確保要先稀釋10倍。

4） 在測(cè)定前制備AP標(biāo)準(zhǔn)溶液，一旦標(biāo)準(zhǔn)溶液從濃縮的狀態(tài)稀釋后就不再穩(wěn)定了，不易保存很長(zhǎng)時(shí)間。每個(gè)檢測(cè)過(guò)程都要配制新的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

5） 用移液器吸頭混勻，不要渦旋震蕩器用劇烈震蕩來(lái)減少樣品中AP對(duì)試管壁表面的吸附。

6） 在使用完之后要確保標(biāo)準(zhǔn)濃縮液的蓋擰緊并放在冰箱，標(biāo)準(zhǔn)溶液必須被密封或把蓋擰緊以免甲醇揮

發(fā)。

7）保證標(biāo)準(zhǔn)溶液中甲醇的濃度為10%。過(guò)高的甲醇濃度可以損害抗體，太低的濃度導(dǎo)致結(jié)果讀數(shù)不正確。

8）不要隨意處理試驗(yàn)廢液，要按當(dāng)?shù)氐姆ㄒ?guī)來(lái)處理。

3. 抗原-酶結(jié)合物

重新配制一瓶抗原-酶結(jié)合物溶液：抗原-酶結(jié)合物粉末(#3) + 7ml緩沖液(#4, 白蓋)。

1.配制好的溶液要儲(chǔ)存在2-8°C，可以穩(wěn)定地保存2周。

2.  7mL足夠50個(gè)孔使用。

3.         用移液器吸頭混勻，轉(zhuǎn)移液體時(shí)不要產(chǎn)生氣泡。

4.在使用的時(shí)候配制。

4. 標(biāo)準(zhǔn)/樣品 與結(jié)合物混合

在沒(méi)有包被抗體的微孔板中(#8)加入100ul酶結(jié)合物溶液，然后再加入100ul在第二步中配制的AP標(biāo)準(zhǔn)溶液或100μL樣品（制備的1% (v/v) DMSO 和10 % (v/v) 的甲醇溶液）。用移液器吸頭混勻。

1.首先加入結(jié)合物溶液然后加入標(biāo)準(zhǔn)或樣品避免孔的內(nèi)表面的非特異性吸附。

2.用移液器吸頭混勻，轉(zhuǎn)移液體時(shí)不要產(chǎn)生氣泡。

3.用1% DMSO 和10%的甲醇溶液做一個(gè)空白。

5. 競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)【喹乙醇檢測(cè)試劑盒】

在包被抗體的微孔板(#1)的每個(gè)孔中加入100μL在第四步中混合的溶液，輕輕是震蕩微孔板使其內(nèi)部的液體混勻，在室溫(18-25°C)孵育60分鐘。

1.包被抗體的酶標(biāo)板共有12條，每條有8個(gè)孔，在檢測(cè)前取出所需的孔。然后把不用的再重新放好。

2.在轉(zhuǎn)移液體時(shí)要確保不產(chǎn)生氣泡，因此操作要輕。

3.用膠帶覆蓋微孔板避免污染和液體揮發(fā)。

4.在反應(yīng)期間不要移動(dòng)和振動(dòng)微孔

5.溫度控制在18-30°C

6.嚴(yán)格反應(yīng)時(shí)間

6. 洗液

用蒸餾水以1：5的比例稀釋洗液（6倍濃縮）(#5)：20ml 洗液(#5) + 100ml蒸餾水 。每次檢測(cè)配制所需體積的溶液，每個(gè)孔每次要求1.2mL的洗液，整個(gè)板需要120 mL。洗液要保存在2-8°C，在配制后大約可以穩(wěn)定保持一個(gè)月的時(shí)間。

7. 沒(méi)有結(jié)合的試劑

每個(gè)微孔用300μL的洗液沖洗，并多重復(fù)兩次。在吸水紙上用力的拍板除去微孔中的液體。

1.要確保除去任何遺留液體，否則可能引起測(cè)量錯(cuò)誤。

2.確保微孔板底部干凈，不要有手印或其它污垢，否則吸光度將有很大改變。

3.不要傾倒任何沒(méi)有處理的廢液，例如：浸泡的布或紙要燃燒掉。

8. 顯色反應(yīng)

在每個(gè)微孔中加入100ul顯色液(#6, brown vessel)。在室溫下孵育30min。然后每個(gè)微孔加入100ul終止液(#7,黑蓋)終止反應(yīng)。

1.孵育溫度控制在18-30°C

2.要使每個(gè)孔的反應(yīng)時(shí)間一致，尤其在測(cè)試多個(gè)樣品的時(shí)候

3.加入終止液后孔中的藍(lán)色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色

9. 定量【喹乙醇檢測(cè)試劑盒】

在450nm用酶標(biāo)儀測(cè)定每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)和樣品的吸光度值。

1.在終止反應(yīng)15分鐘內(nèi)測(cè)定吸光度值。

2.每次檢測(cè)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的標(biāo)準(zhǔn)至少做兩個(gè)重復(fù)。

3.確保微孔底面沒(méi)有手印和污物，否則測(cè)定的吸光度值有很大的改變。

4.樣品的檢測(cè)范圍5μg/L - 500μg/L，樣品中AP的濃度超過(guò)500μg/L時(shí)要用10%甲醇+1% DMSO稀釋后再測(cè)定。對(duì)于完全不知情的樣品做前處理時(shí)要做遠(yuǎn)不止一倍的稀釋。

計(jì)算樣品中AP濃度的方法

（1）電腦計(jì)算

利用酶標(biāo)儀分析軟件，用Log-Log (or Log-Linear)曲線(xiàn)。

（2）利用附帶的曲線(xiàn)圖計(jì)算

9236421       Switch, firmware loading, TWI          CNY                           

9236359       Sheath Filter with Quick Disconnect              CNY                           

9236346       1.5A Fuse LiquiChip          CNY                           

9236338       Quick disconnect Set         CNY                           

9236164       Syringe block, repl. kit, RapidPlate         CNY                           

9236153       Locator Plate, Tips, pos 2, BR RP          CNY                           

9235698       Cable 24V, RCS1              CNY                           

9235296       Capillary, Dispenser head, Mounting Tool            CNY                           

9235054       Incubator Tower (65°C) Board         CNY                           

9234941       Incubator Tower (65°C) Board DINCS           CNY                           

9238658       Cooling compressor T2178GK, 50Hz             CNY                           

9242060       Adapter plate, IQ/OQ, QS         CNY                           

9242026       Repair Thermo, Depot Repair, Palm Cycler          CNY                           

9241824       Pyro Q96 MD, Full Agreement  The Full Agreement, PyM provides full service coverage for the PyroMark instrument. Costs for service visits are fully covered including travel, labor, ａnd parts. The agreement also includes one on-site inspection service, with costs for labor ａnd parts covered. With a Full Agreement, there is a response time of 2 working days.       CNY                           

9241815       Pyro Q96 ID, PM Agreement            CNY                            【喹乙醇檢測(cè)試劑盒】

9241172       anti-rotation tool         CNY                           

9240960       Cable, cLLD, pipetting system, Qsym            CNY                           

9240949       Cable, y, portal, Qsym              CNY                           

9240678       Bimba Rotary Actuator, AP              CNY                           

9240777       CE Update, AP196/98        CNY                           

9241773       RGQ, Installation The Installation ａnd Introductory Training is an on-site service, conducted by a QIAGEN Service Specialist. It covers the handling of the Rotorgene-Q systems hardware ａnd trains the user on the operation of the Rotorgene software. After the training the user will be able to develop application programs, conduct a basic troubleshooting, ａnd understand the application output format.All travel ａnd labor costs ａnd well as material for the demonstration run are included. The service is documented in accordance with GMP/GLP requirements.     CNY                           

9241763       QIAgility, Full Agreement   "Repair service delivery: onsite

Service response time (repair): 48 hours/2 business days

Periodic inspection/maintenance: yes, 1/agreement year

Inspection/maintenance delivery: onsite

Cost coverage for repair parts: yes, included

Cost coverage for labor: yes, included

Cost coverage for travel: yes, included

Replacement system (Loaner) or PC repair provision: not included

Transportation cost coverage: not applicable"     CNY                           

9241372       Reflector, UV lamp, EZ1a          CNY                           

9243545       QIAsymphony SP, PM Service  "Service response time (repair): not applicable

Periodic inspection/maintenance: yes

Inspection/maintenance delivery: onsite

Cost coverage for Repair Parts : not included

Cost coverage for labor: yes, full coverage

Cost coverage for travel: yes, full coverage

Replacement system (Loaner) provision: not applicable

Transportation cost coverage: yes, full coverage"       CNY                           

9243045       Bracket, rear, transparent panel, Qsym         CNY                           

9242980       QIArent&go - Rent out fee QS RGQ System         CNY                           

9242764       QS RGQ, Premium Agreement "Repair service delivery QIAsymphony SP/AS: onsite

Service response time (repair) QIAsymphony: 24 hours/1 business day

Repair service delivery RGQ: send to Regional Repair Center

Service response time (repair) RGQ: 7-10 days turnaround time

Periodic inspection/maintenance: yes, 1/agreement year

Cost coverage for Repair Parts : yes, full coverage

Cost coverage for labor: yes, full coverage

Cost coverage for travel: yes, full coverage

Replacement system (Loaner) provision RGQ: yes, included (provision time 2-3 days)

Transportation cost coverage: yes, full coverage

QIAsymphony Response Time starts when customer inquiry is received by local tech service ends when a service specialist is onsite.

- Inquiry Channel: Local Tech-Service Hotline, Mo.- Fr. 08:00-17:00 Uhr

- Call Cut-off Time: 12:00 am; on business days

- Customer Availability: maximum 2 hours phone trouble shooting to identify error ａnd spare parts

- QIAsense: Systems need to be connected to QIAsense for faster download of log files

- Software: QIAsymphony need to be updated with the latest software version

- Remote Area: 24 Hr onsite response only available for geographical areas within field service travel capability ａnd pre-12:00 delivery capability of spare parts" CNY                           

9242750       Cooling adapter, PCR adapter, AS, Qsym            CNY                           

9242709       Validation Support, 2d, EZ1      The QIAGEN EZ1 Guided Validation Support service includes all travel ａnd labor charges for a site visit up to 2 days by a QIAGEN Specialist.  A QIAGEN specialist will provide an introduction to the EZ1 system ａnd the DNA Investigator silica chemistry utilized in the process, review the Handbook ａnd User Manual, ａnd practical hands-on operation.  The Guided Validation service includes experimental design consultation, internal validation documentation support, ａnd QIAGEN sponsored data templates. The QIAGEN Specialist will also aide the customer in running some samples to initiate the validation process.  Enough consumable chemistry ａnd accessories (QIAGEN or other vendors) should be purchased by the customer to cover the validation experimental design ａnd are not included in the cost of validation support.      CNY                           

9242699       QIAxcel, Full Agreement    "Repair service delivery send to Regional Repair Center

Service response time (repair) 7-10 days turnaround time

Periodic inspection/maintenance: yes, 1/agreement year

Inspection/maintenance delivery:

Cost coverage for Repair Parts : yes, full coverage

Cost coverage for labor: yes, full coverage

Cost coverage for travel: yes, full coverage

Replacement system (Loaner) provision: yes, included (provision time 2-3 days)

Transportation cost coverage: yes, full coverage"       CNY                           

9242508       QIAsymphony SPAS, Premium Agreement    "Repair service delivery: onsite

Service response time (repair): 24 hours/1 business day

Periodic inspection/maintenance: yes, 1/agreement year

Inspection/maintenance delivery: onsite

Cost coverage for Repair Parts : yes, full coverage

Cost coverage for labor: yes, full coverage

Cost coverage for travel: yes, full coverage

Replacement system (Loaner) provision: not applicable

Transportation cost coverage: not applicable

- QIAsense: Systems should to be connected to QIAsense for faster download of log files"       CNY                            【喹乙醇檢測(cè)試劑盒】

5000-1316    Rotary Shaker - Knob Locking         CNY                           

9241365       Grid, UV lamp, EZ1a          CNY                           

QY-x1301     人T淋巴細(xì)胞白血病,CD8+Molt-4                                       

QY-x1302     人B淋巴母細(xì)胞HMy2.CIR                                   

QY-x1303     人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞CCRF-CEM                                       

QY-x1304     總T淋巴細(xì)胞OKT3                                      

QY-x1305     人大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞HASMC                                       

QY-x1306     人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞HCPEpiC                                        【喹乙醇檢測(cè)試劑盒】

QY-x1307     人血管內(nèi)皮細(xì)胞VE                                       

QY-x1308     人血管內(nèi)皮細(xì)胞EC-304                                       

QY-x1309     人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC                                    

QY-x1310     人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC（原代）                                    

QY-x1311     人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVE-12/CRL2480                                      

QY-x1312     人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞ECV-304                                        

QY-x1313     人臍靜脈內(nèi)皮 (具有T24細(xì)胞特性)ECV-304                                    

QY-x1314     人腸系膜下腔動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞Ealy926                                   

QY-x1315     人腦膠質(zhì)細(xì)胞株（正常）HEB                                      

QY-x1316     人腦瘤細(xì)胞SF126                                        

QY-x1317     人腦瘤細(xì)胞SF763                                        

QY-x1318     人腦瘤細(xì)胞SF767                                        

QY-x1319     人腦瘤細(xì)胞SF17                                   

QY-x1320     人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞TG-905                                   

QY-x1321     人膠質(zhì)瘤細(xì)胞TJ905                                      

QY-x1322     人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞IMR-32                                         【喹乙醇檢測(cè)試劑盒】

QY-x1323     人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251                                       

QY-x1324     神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 CRT                                    

QY-x1325     人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞A172                                    

QY-x1326     神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 SHG-44                                     

QY-x1327     人XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞SF-295                                    

QY-x1328     人惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞U87MG                                       

QY-x1329     人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞SK-N-MC                                        

QY-x1330     人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞SK-N-SH                                         

QY-x1331     人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞SH-SY5Y                                        

QY-x1332     人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞（H4）H4                                          

QY-x1333     人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U373