ELISA酶聯(lián)法試劑盒操作因固相載體的形成不同而有所差異，國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。本文將敘述板式ELISA各個(gè)操作步驟的注意要點(diǎn)，珠式、管式及磁性球ELSIA，國(guó)外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用，兩者均有詳細(xì)的使用說(shuō)明，嚴(yán)格遵照規(guī)定操作，必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果。齊一生物銷(xiāo)售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

首先齊一生物優(yōu)質(zhì)的試劑盒，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠必要條件。所以ELISA試劑盒的購(gòu)買(mǎi)，試劑質(zhì)量的保證以及實(shí)驗(yàn)前實(shí)驗(yàn)儀器的檢察都是很有重要性的。保證實(shí)驗(yàn)材料的質(zhì)量之后要嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行。齊一生物銷(xiāo)售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

【大鼠鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒現(xiàn)貨】齊一生物ELISA試劑盒

1.精心挑選的進(jìn)口抗體、標(biāo)準(zhǔn)品、顯色劑和酶標(biāo)板全部為進(jìn)口產(chǎn)品實(shí)現(xiàn)*佳性能；

2.原材料批量進(jìn)口加上自配的特殊配方稀釋劑保證高品質(zhì)產(chǎn)品性能的同時(shí)兼顧成本；

3.采用技術(shù)，嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)方案組裝生產(chǎn)；

4.預(yù)包被微孔板的批內(nèi)和批間變異系數(shù)均小于10 ％；

5.經(jīng)過(guò)嚴(yán)格交叉反應(yīng)和干擾測(cè)試及穩(wěn)定性試驗(yàn)；

6.明確的敏感度；

7.針對(duì)所有樣品類(lèi)型達(dá)到*佳的性能；

8.廣泛的檢測(cè)范圍可以滿足大多數(shù)檢測(cè)要求；

9.完善的售后服務(wù)和免費(fèi)的技術(shù)支持免去您的后顧之憂；

10.強(qiáng)大的生產(chǎn)能力和充足的儲(chǔ)備、操作熟練的技術(shù)人員及高效的生產(chǎn)流程，隨時(shí)可以組裝出您定制的產(chǎn)品。

【大鼠鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒現(xiàn)貨】齊一生物僅供實(shí)驗(yàn)人、大鼠、小鼠、兔等動(dòng)物實(shí)驗(yàn)標(biāo)本檢測(cè)使用！得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失，請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買(mǎi)說(shuō)明！齊一生物銷(xiāo)售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

ELISA試劑盒問(wèn)題描述

標(biāo)準(zhǔn)曲線梯度差：

吸液或加液不準(zhǔn)請(qǐng)檢查移液器及吸頭

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋不正確溶解標(biāo)準(zhǔn)品稍微旋轉(zhuǎn)瓶身，輕輕混勻使粉末完全溶解

洗滌不完全保證洗滌時(shí)間和洗滌次數(shù)及每孔的加液量

顯色很弱或無(wú)色：

孵育時(shí)間太短保證充足的孵育時(shí)間

實(shí)驗(yàn)溫度不正確使用推薦的實(shí)驗(yàn)溫度

試劑體積不夠或漏加、稀釋不正確檢查吸液及加液過(guò)程，保證所有試劑按順序足量添加

讀數(shù)數(shù)值低：

酶標(biāo)儀設(shè)置不正確 在酶標(biāo)儀上檢查波長(zhǎng)及濾光片設(shè)置

提前打開(kāi)酶標(biāo)儀預(yù)熱：變異系數(shù)大加液不正確檢查加液情況

【大鼠鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒現(xiàn)貨】背景值高：

檢測(cè)抗體的工作濃度使用推薦的稀釋倍數(shù)

酶標(biāo)板洗滌不完全重新閱讀操作手冊(cè)，保證清洗完全；如果用自動(dòng)洗板機(jī)，請(qǐng)檢查所有的出口是否有堵塞

洗液有污染配制新鮮的洗液

靈敏度低：

ELISA試劑盒保存按說(shuō)明書(shū)要求保存相關(guān)試劑

讀數(shù)前未終止OD讀數(shù)前應(yīng)在每孔中加入終止液

齊一生物客戶寄標(biāo)本時(shí)需注明以下情況：

1、標(biāo)本編號(hào)；2、所測(cè)項(xiàng)目；3、是否做復(fù)孔；3、聯(lián)系方式；4、實(shí)驗(yàn)后標(biāo)本是否寄回。

客戶必知：

客戶應(yīng)對(duì)所提供的材料及信息負(fù)責(zé)，如因客戶提供的材料及信息不準(zhǔn)確而引起的實(shí)驗(yàn)延誤或經(jīng)濟(jì)損失由客戶承擔(dān)。

試劑盒樣本要求

在收集標(biāo)本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測(cè)，對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本，及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆�，如有特殊原因需要周期收集�?biāo)本，請(qǐng)?jiān)炷Ｈ〔暮螅瑢?biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差，蛋白極易降解，直接影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量，所以避免反復(fù)凍融。具體操作注意事項(xiàng)請(qǐng)與我司技術(shù)人員溝通。齊一生物銷(xiāo)售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

【大鼠鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒現(xiàn)貨】液體類(lèi)標(biāo)本：標(biāo)本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心。

3. 尿液、胸腹水、腦脊液：用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。

5. 培養(yǎng)細(xì)胞:檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

6. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶）。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清置于-20度或-70度保存，如有必要，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

7. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

8.不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

9.如果樣品不能立即檢測(cè)，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解

凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

9239498  V-Housing, LX100         CNY                            【大鼠鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒現(xiàn)貨】

9239490  EX Laser Driver, Uniphase           CNY                           

9239390  PCR Plate Adapter, M96        CNY                           

9236510  BR 3000, PM Service    The Overhaul covers all travel ａnd labor costs plus all necessary parts to perform a Preventative Maintenance,. The instrument will also be thoroughly checked ａnd inspected to determine if any additional parts are required to get the instrument running to its optimal performance. There will be an additional charge for any such parts if any are needed. CNY                           

9232764  Disposable Troughs, 20 / 30 ml (10)    Troughs holding up to 20 ml of liquid; pack of 10       CNY                           

9236472  BR 9600, Full Agreement       The Full Agreement 9600 provides full service coverage for the BioRobot 9600. Costs for service visits are fully covered including travel, labor, ａnd parts. The agreement also includes one annual preventive maintenance visit, with costs for labor ａnd parts covered. With a Full Agreement, there is a priority response time of 48 hours (2 working days).       CNY                           

9236443  BR, Installation       The Installation, BR Universal facilitates the quick implementation of the BioRobot into the lab routine by minimizing the instrument start-up phase. It covers the hardware ａnd software installation of the BioRobot Universal instrument ａnd provides the user with an introductory training on operation ａnd user maintenance. The installation includes labor ａnd travel costs. The performance of the installation process is documented on a GMP/GLP-compliant Field Service document.    CNY                           

9239155  Assembly, vertical axis, TWI        CNY                           

9239108  Assy, Sample Needle, Actuator linkage         CNY                           

9232693  MTP-Plate Holder  2.01              CNY                           

9232629  Bottle, 500-ml, yellow fitting         CNY                           

9232602  Vacuum manifold, plate holder bottomless           CNY                           

9232579  Cooling block, 1,5ml             CNY                           

9238951  Locking lever, BS15              CNY                           

9238798  Rectangular bucket, sealable with cap          CNY                           

9238794  Angle rotor 6 x 250 ml          CNY                           

9016913  Tubing, press relief valve inlet DISU v2              CNY                            【大鼠鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒現(xiàn)貨】

9238942  Keyboard-Display assembly, BS15        CNY                           

9238753  Screwdriver, hex2mm, z-drive BR8             CNY                           

9238916  Power supply 40W, BS96             CNY                           

9238748  Coupling, CPC, screw, male, V2          CNY                           

9238716  Seal for lid, 1350 mm           CNY                           

9238898  Front panel, BS15          CNY                           

9238699  Frontpanel w. keyboard foil (Zent1)             CNY                           

9231793  Motor, gripper, handler, BR8000           CNY                           

9238690  Computer board Zent2, no Eprom        CNY                           

9231434  Probe, 0,4mm, ceramic coated for PK80            CNY                           

9020071  Keypad, TLyser             CNY                           

9020070  Controller 100-120V/200-240V, TLyser        CNY                           

9014996  Shaker, Highspeed Unit, BR8 RD          CNY                           

9014870  X-Motor, BR8        CNY                           

9014790  Tip Disposal Bags MDx Autoclavable bags for collection ａnd disposal of used disposable tips, pack of 15     CNY                           

QY-L0191       淫羊藿次苷I（95%）  Icarisid I               20mg                   

QY-L0192       脫水淫羊藿素38226-86-7    Anhydroicaritin      38226-86-7     20mg                   

QY-L0193       淫羊藿素737-52-0       Oxypeucedanin      737-52-0 20mg                   

QY-L0194       川陳皮素10236-47-2    Naringin  10236-47-2     20mg                   

QY-L0195       去甲基川陳皮素2174-59-6  Demethylnobiletin   2174-59-6      20mg                   

QY-L0196       刺芒柄花素485-72-3    Formotin 485-72-3 20mg                   

QY-L0197       芒柄花苷486-62-4       Ononin    486-62-4 20mg                   

QY-L0198       川楝素58812-37-6       Toosendanin   58812-37-6     20mg                   

QY-L0199       次野鳶尾黃素41743-73-1    Irisflorentin     41743-73-1     20mg                   

QY-L0200       射干苷611-40-5    Tectoridin       611-40-5 20mg                   

QY-L0201       鳶尾黃素548-77-6       Tectorigenin    548-77-6 20mg                   

QY-L0202       柴胡皂苷A20736-09-8  Saikosaponin A       20736-09-8     20mg                   

QY-L0203       柴胡皂苷B158558-08-0      "Saikosaponin B1

"      "58558-08-0

"      20mg                    【大鼠鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒現(xiàn)貨】

QY-L0204       柴胡皂苷B258316-41-9       Saikosaponin B2     58316-41-9     20mg                   

QY-L0205       柴胡皂苷C20736-08-7  Saikosaponin C      20736-08-7     20mg                   

QY-L0206       柴胡皂苷D20874-52-6 Saikosaponin D      20874-52-6     20mg                   

QY-L0207       蟾毒靈465-21-4    Bufalin    465-21-4 20mg                   

QY-L0208       蟾毒它靈 471-95-4      Bufotaline       471-95-4      20mg                   

QY-L0209       華蟾酥毒基（97%）470-37-1     Cinobufagin    470-37-1 20mg                   

QY-L0210       華蟾毒它靈 1108-68-5       Cinobufotalin 1108-68-5     20mg                   

QY-L0211       日蟾毒它靈    Gamabufalin          20mg                   

QY-L0212       沙蟾毒精（95%）17008-69-4     Bufarenogin    17008-69-4     20mg                   

QY-L0213       酯蟾毒配基（97%）465-39-4     Resibufogenin 465-39-4 20mg                   

QY-L0214       常春藤皂苷元465-99-6       Hederagenin    465-99-6 20mg                   

QY-L0215       α-常春藤皂苷35790-95-5   A-Hederin       35790-95-5     20mg                   

QY-L0216       蟲(chóng)草素73-03-0      Cordycepin     73-03-0   20mg                   

QY-L0217       腺苷58-61-7  Adenosine       58-61-7   20mg                   

QY-L0218       重樓皂苷I50773-41-6   Chonglou Saponin I       50773-41-6     20mg                   

QY-L0219       重樓皂苷II76296-72-5 Chonglou Saponin II      76296-72-5     20mg                    【大鼠鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒現(xiàn)貨】

QY-L0220       薯蕷皂苷19057-60-4    Dioscin   19057-60-4     20mg                   

QY-L0221       重樓皂苷Ⅵ55916-51-3 Polyphyllin VI 55916-51-3     20mg                   

　　b. 抑制率法

　　抑制率表示標(biāo)本在競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合中標(biāo)本對(duì)陰性反應(yīng)顯色的抑制程度，按下式計(jì)算：

　　抑制率（%）= （陰性對(duì)照A值-標(biāo)本A值）×100%/陰性對(duì)照A值

　　一般規(guī)定抑制率≥50%為陽(yáng)性，＜50%為陰性。

 定量測(cè)定

　　ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的一致，因此在定量測(cè)定中，每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙，以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，中央較呈直線的部分是*理想的檢測(cè)區(qū)域。

　　測(cè)定小分子量物質(zhì)常用競(jìng)爭(zhēng)法，其標(biāo)準(zhǔn)曲線中吸光度與受檢物質(zhì)的濃度呈負(fù)相關(guān)。標(biāo)準(zhǔn)曲線的形狀因試劑盒所用模式的差別而略有不同。ELISA測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線注意圖中橫坐標(biāo)為對(duì)數(shù)關(guān)系，這更有利于測(cè)定系統(tǒng)的表達(dá)。

        講述完了以上ELISA實(shí)驗(yàn)的操作要點(diǎn)，可以發(fā)現(xiàn)其實(shí)很多步驟都并不復(fù)雜，重要的是操作的時(shí)候一定要注重細(xì)節(jié)，熟能生巧，才可以掌握ELISA實(shí)驗(yàn)的精髓所在。

9019663  PyroMark Vac Prep Tool, PyroQ96VW               CNY                              【大鼠毒蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)ELISA試劑盒現(xiàn)貨】

9019618  Motor, Z-axis, Cx2             CNY                             

9019615  Pipettor, spring, Cx2                  CNY                             

9019600  O-ring, filter housing seal, 2mm, CX1                CNY                             

9019572  Pulley, Idler X-axis, Cxx              CNY                             

9019569  Stop pin, X-axis, Cxx          CNY                             

9019536  Pipetting Station RD, RCS                  CNY                             

9019534  Home flag, Z-axis, CQx              CNY                             

9019531  UV light assembly, QIA              CNY                             

9019396  Motor, stepper, rotor drive, RG3              CNY                             

9019352  Solenoid, cooling flap, RG6                CNY                             

9019351  Fan, cooling blower, RG6                   CNY                             

9019334  Kit, Heater FET & drivers, RG6                  CNY                             

9234763  cable, flat band, 1500 mm                CNY                             

9234433  Boundary, SIS, rigth          CNY                             

1027286  AllStars Neg. siRNA AF 555 (5 nmol)                  CNY                             

9233457  Flange, pressure sensor            CNY                              【大鼠毒蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)ELISA試劑盒現(xiàn)貨】

9019231  Motor - X/Y, PyroQ24                 CNY                             

9019224  Pump - Pressure, PyroQ24                 CNY                             

9019219  Gripper arm kit, PyroQ96MD           CNY                             

9019210  Barcode reader, PyroQ96MD           CNY                             

9011927  Tip-disposal unit, v1.02             CNY                             

1066849  PG AIV-H7 RT-PCR Assay (48) LE Z             CNY                             

1066853  PG AIV-H9 RT-PCR Assay (48) LE Z             CNY                             

9232908  Card, dispenser unit, BR8000           CNY                             

1061066  Sample Preparation Reagents, 30ml Z             CNY                             

1061122  HBV PCR REAGENT VI               CNY                             

9016585  Plate Stacker Ambient Temp, RCS1          CNY                             

9016567  Z-Rack, RCS1             CNY                             

9016534  Transportation box , Twister I           CNY                             

9016532  Transportation box 3, LiquiChip                 CNY                             

9016531  Transportation box 2, LiquiChip                 CNY                             

QY-L0005 桉油精470-82-6      Cineole     470-82-6  20mg                          

QY-L0006 安石榴苷65995-63-3      Punicalagin       65995-63-3       20mg                          

QY-L0007 石榴皮鞣素65995-64-4 Punicalin  65995-64-4       20mg                          

QY-L0008 澳洲茄堿19121-58-5      Solasonine        19121-58-5       20mg                          

QY-L0009 澳洲茄邊堿20318-30-3 Solamargine     20318-30-3       20mg                          

QY-L0010 澳洲茄胺  126-17-0       Solasodine        126-17-0  20mg                          

QY-L0011 阿多尼弗林堿                            20mg                           【大鼠毒蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)ELISA試劑盒現(xiàn)貨】

QY-L0012 安格洛苷C 115909-22-3         Angoroside C 115909-22-3  20mg                          

QY-L0013 阿馬堿483-04-5      Raubasine         483-04-5  20mg                          

QY-L0014 補(bǔ)骨脂甲素19879-32-4 Coryfolin  19879-32-4       20mg                          

QY-L0015 補(bǔ)骨脂乙素20784-50-3 Corylifolinin      20784-50-3       20mg                          

QY-L0016 補(bǔ)骨脂定18642-23-4      Psoralidin 18642-23-4       20mg                          

QY-L0017 補(bǔ)骨脂酚10309-37-2      Bakuchiol 10309-37-2       20mg                          

QY-L0018 補(bǔ)骨脂素 66-97-7  Psoralen          66-97-7  20mg                          

QY-L0019 異補(bǔ)骨脂素523-50-2      Isopsoralen       523-50-2  20mg                          

QY-L0020 補(bǔ)骨脂寧 53947-92-5    Corylin      53947-92-5    20mg                          

QY-L0021 補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚 19879-30-2         Bavachinin A    19879-30-2       20mg                          

QY-L0022 新補(bǔ)骨脂異黃酮41060-15-5 Neobavaisoflavone  41060-15-5       20mg                          

QY-L0023 花椒毒素298-81-7 8-Methoxypsoralen 298-81-7  20mg                          

QY-L0024 花椒毒酚2009-24-7       Xanthotol        2009-24-7        20mg                          

QY-L0025 薄荷腦1490-04-6   DL-Menthol      1490-04-6         20mg                          

QY-L0026 L-薄荷醇2216-51-5         L-Menthol         2216-51-5         20mg                          

QY-L0027 DL-薄荷醇15356-70-4    Menthol   15356-70-4       20mg                           【大鼠毒蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)ELISA試劑盒現(xiàn)貨】

QY-L0028 胡薄荷酮89-80-5   Menthone        89-80-5    20mg                          

QY-L0029 巴豆苷1818-71-9   2-Hydroxyadenosine         1818-71-9         20mg                          

QY-L0030 貝母甲素23496-41-5      Peimine    23496-41-5       20mg                          

QY-L0031 貝母乙素18059-10-4      Peiminine          18059-10-4       20mg                          

QY-L0032 貝母辛19773-24-1 Peimisine 19773-24-1       20mg                          

QY-L0033 西貝母堿61825-98-7      Imperialine       61825-98-7       20mg                          

QY-L0034 西貝母堿苷     Sipeimine-3β-D-glucoside                20mg                 .       

QY-L0035 土貝母苷甲102040-03-9        Tubeimoside I  102040-03-9    20mg