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ELISA酶聯(lián)法試劑盒操作因固相載體的形成不同而有所差異，國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。本文將敘述板式ELISA各個(gè)操作步驟的注意要點(diǎn)，珠式、管式及磁性球ELSIA，國(guó)外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用，兩者均有詳細(xì)的使用說(shuō)明，嚴(yán)格遵照規(guī)定操作，必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果。

首先優(yōu)質(zhì)的試劑盒，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠必要條件。所以ELISA試劑盒的購(gòu)買(mǎi)，試劑質(zhì)量的保證以及實(shí)驗(yàn)前實(shí)驗(yàn)儀器的檢察都是很有重要性的。保證實(shí)驗(yàn)材料的質(zhì)量之后要嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行。

 1、標(biāo)本的采取和保存

可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定（如血清、尿液），有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用方法。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。

　　血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。如在冰箱中保存過(guò)久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。一般說(shuō)來(lái)，在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，超過(guò)一周測(cè)定的需低溫冰存。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩�；鞚峄蛴谐恋淼难鍢�(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾，澄清后再檢測(cè)。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落，所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè)，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無(wú)菌操作，也可加入適當(dāng)防腐劑。

2、ELISA試劑盒的準(zhǔn)備

　　按Elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測(cè)量較正。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。

 3、加樣

　　在ELISA中一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。　　加標(biāo)本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以免發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測(cè)定（如間接法ELISA）需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標(biāo)本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器，使加液過(guò)程迅速完成。

【雞白介素17(IL-17)ELISA試劑盒現(xiàn)貨】5、洗滌

　　洗滌在ELISA過(guò)程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟，但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。ELSIA就是靠洗滌來(lái)達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過(guò)洗滌以清除殘留在板孔中沒(méi)能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，而在洗滌時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來(lái)�？梢哉f(shuō)在ELISA操作中，洗滌是*主要的關(guān)鍵技術(shù)，應(yīng)引起操作者的高度重視，操作者應(yīng)嚴(yán)格按要求洗滌，不得馬虎。

　　洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動(dòng)洗滌儀外，手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種，過(guò)程如下：

　　（1）浸泡式 a.吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液；b.用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去）；c.浸泡，即將洗滌液注滿板孔，放置1-2分鐘，間歇搖動(dòng)，浸泡時(shí)間不可隨意縮短；d.吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)徹底，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干；e.重復(fù)操作c和d，洗滌3-4次（或按說(shuō)明規(guī)定）。在間接法中如本底較高，可增加洗滌次數(shù)或延長(zhǎng)浸泡時(shí)間。

　　微量滴定板多采用浸泡式洗滌法。洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的結(jié)合是疏水性的，非離子型洗滌劑既含疏水基團(tuán)，也含親水基團(tuán)，其疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水基團(tuán)借疏水鍵結(jié)合，從而削弱蛋白質(zhì)與固相載體的結(jié)合，并借助于親水基團(tuán)和水分子的結(jié)合作用，使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀態(tài)，從而脫離固相載體。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20，其濃度可在0.05%-0.2%之間，高于0.2%時(shí)，可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗(yàn)的靈敏度。

　�。�2）流水沖洗式 流水沖洗法*初用于小珠載體的洗滌，洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來(lái)水。洗滌時(shí)附接一特殊裝置，使小珠在流水沖擊下不斷地滾動(dòng)淋洗，持續(xù)沖洗2分鐘后，吸干液體，再用蒸餾水浸泡2分鐘，吸干即可。浸泡式猶如盆浴，流水沖洗式則好比淋浴，其洗滌效果更為徹底，且也簡(jiǎn)便、快速。已有實(shí)驗(yàn)表明，流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔表面，洗滌效果更佳。

【雞白介素17(IL-17)ELISA試劑盒現(xiàn)貨】 6、顯色和比色

1 顯色

　　顯色是ELISA中的*后一步溫育反應(yīng)，此時(shí)酶催化無(wú)色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。在一定時(shí)間內(nèi)，陰性孔可保持無(wú)色，而陽(yáng)性孔則隨時(shí)間的延長(zhǎng)而呈色加強(qiáng)。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行。在定量測(cè)定中，加入底物后的反應(yīng)溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。定性測(cè)定的顯色可在室溫進(jìn)行，時(shí)間一般不需要嚴(yán)格控制，有時(shí)可根據(jù)陽(yáng)性對(duì)照孔和陰性對(duì)照孔的顯色情況適當(dāng)縮短或延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，及時(shí)判斷。

　　OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應(yīng)20-30分鐘后即不再加深，再延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，可使本底值增高。OPD底物液受光照會(huì)自行變色，顯色反應(yīng)應(yīng)避光進(jìn)行，顯色反應(yīng)結(jié)束時(shí)加入終止液終止反應(yīng)。OPD產(chǎn)物用硫酸終止后，顯色由橙黃色轉(zhuǎn)向棕黃色。

　　TMB受光照的影響不大，可在室溫中置于操作臺(tái)上，邊反應(yīng)觀察結(jié)果。但為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性，宜在規(guī)定的適當(dāng)時(shí)間閱讀結(jié)果。TMB經(jīng)HRP作用后，約40分鐘顯色達(dá)頂峰，隨即逐漸減弱，至2小時(shí)后即可完全消退至無(wú)色。TMB的終止液有多種，疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉（SDS）等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止。這類終止劑尚能使藍(lán)色維持較長(zhǎng)時(shí)間（12-24小時(shí)）不褪，是目視判斷的良好終止劑。此外，各類酸性終止液則會(huì)使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色，此時(shí)可用特定的波長(zhǎng)（450nm）測(cè)讀吸光值。

2 比色

　　比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體，然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。以軟板為載體的試驗(yàn)，需先將板置于標(biāo)準(zhǔn)96孔的座架中，才可進(jìn)行比色。在加底物液顯色前，先將軟板邊緣剪凈，這樣，此板就可完全平妥坐入座架中。

　　比色時(shí)應(yīng)先以蒸餾水校零點(diǎn)，測(cè)讀底物孔（未經(jīng)任何反應(yīng)僅加底物液的孔）和空白孔（以生理鹽水或稀釋液代替標(biāo)本作全過(guò)程的孔），以記錄本次試驗(yàn)的試劑狀況。其后可用空白孔以蒸餾水校零點(diǎn)，以上各孔的吸光度需減去空白孔的吸光度，然后進(jìn)行計(jì)算。

　　比色結(jié)果的表達(dá)以往通用光密度（oplical density，OD），現(xiàn)按規(guī)定用吸光度（absorbence，A），兩者含義相同。通常的表示方法是，將吸收波長(zhǎng)寫(xiě)于A字母的右下角，如OPD的吸收波長(zhǎng)為492nm，表示方法為"A492nm"或"OD492nm"。

3 酶標(biāo)比色儀

　　酶標(biāo)比色儀簡(jiǎn)稱酶標(biāo)儀，通常指專用于測(cè)讀ELISA結(jié)果吸光度的光度計(jì)。針對(duì)固相載體形式的不同，各有特制的適用于板、珠和小試管的設(shè)計(jì)。許多試劑公司配套供應(yīng)酶標(biāo)儀。酶標(biāo)儀的主要性能指標(biāo)有：測(cè)讀速度、讀數(shù)的準(zhǔn)確性、重復(fù)性、精確度和可測(cè)范圍、線性等等。優(yōu)良的酶標(biāo)儀的讀數(shù)一般可精確到0.001，準(zhǔn)確性為±1%，重復(fù)性達(dá)0.5%。舉例說(shuō)，若某孔測(cè)得的A值為1.083，則該孔相對(duì)于空氣的真實(shí)A值應(yīng)為1.083±0.01（1.073~1.093），重復(fù)測(cè)定數(shù)次，其A值均應(yīng)1.083±0.05（1.078~1.088）在之間。酶標(biāo)儀的可測(cè)范圍視各酶標(biāo)儀的性能而不同。普通的酶標(biāo)儀在0.000~2.000，新型號(hào)的酶標(biāo)儀上限拓寬達(dá)2.900，甚至更高。超出可測(cè)上限的A值常以"*"或"over"或其它符號(hào)表示。應(yīng)注意可測(cè)范圍與線性范圍的不同，線性范圍常小于可測(cè)范圍，比如某一酶標(biāo)儀的可測(cè)范圍為0.000~2.900，而其線性范圍僅0.000~2.000，這在定量ELISA中制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)應(yīng)予注意。

　　酶標(biāo)儀不應(yīng)安置在陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下，操作時(shí)室溫宜在15~30℃，使用前先預(yù)熱儀器15-30分鐘，測(cè)讀結(jié)果更穩(wěn)定。

　　測(cè)讀A值時(shí)，要選用產(chǎn)物的敏感吸收峰，如OPD用492nm波長(zhǎng)。有的酶標(biāo)儀可用雙波長(zhǎng)式測(cè)讀，即每孔先后測(cè)讀兩次，次在*適波長(zhǎng)（W1），第二次在不敏感波長(zhǎng)（W2），兩次測(cè)定間不移動(dòng)ELISA板的位置。例如OPD用492nm為W1，630nm為W2，*終測(cè)得的A值為兩者之差（W1-W2）。雙波長(zhǎng)式測(cè)讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

　　各種酶標(biāo)儀性能有所不同，使用中應(yīng)詳細(xì)參照說(shuō)明書(shū)。

【雞白介素17(IL-17)ELISA試劑盒現(xiàn)貨】 7、結(jié)果判斷

定性測(cè)定

　　定性測(cè)定的結(jié)果判斷是對(duì)受檢標(biāo)本中是否含有待測(cè)抗原或抗體作出"有"或"無(wú)"的簡(jiǎn)單回答，分別用"陽(yáng)性"、"陰性"表示。"陽(yáng)性"表示該標(biāo)本在該測(cè)定系統(tǒng)中有反應(yīng)。"陰性"則為無(wú)反應(yīng)。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果，即用滴度來(lái)表示反應(yīng)的強(qiáng)度，其實(shí)質(zhì)仍是一個(gè)定性試驗(yàn)。在這種半定量測(cè)定中，將標(biāo)本作一系列稀釋后進(jìn)行試驗(yàn)，呈陽(yáng)性反應(yīng)的稀釋度即為滴度。根據(jù)滴度的高低，可以判斷標(biāo)本反應(yīng)性的強(qiáng)弱，這比觀察不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判斷為強(qiáng)陽(yáng)性、弱陽(yáng)性更具定量意義。

　　在間接法和夾心法ELSIA中，陽(yáng)性孔呈色深于陰性孔。在競(jìng)爭(zhēng)法ELISA中則相反，陰性孔呈色深于陽(yáng)性孔。兩類反應(yīng)的結(jié)果判斷方法不同，分述于下。

　�。�1） 間接法和夾心法

　　這類反應(yīng)的定性結(jié)果可以用肉眼判斷。目視標(biāo)本也無(wú)色或近于無(wú)色者判為陰性，顯色清晰者為陽(yáng)性。但在ELSIA中，正常人血清反應(yīng)后�？沙霈F(xiàn)呈色的本底，此本底的深淺因試劑的組成和實(shí)驗(yàn)的條件不同而異，因此實(shí)驗(yàn)中必須加測(cè)陰性對(duì)照。陰性對(duì)照的組成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判斷結(jié)果時(shí)，更宜用顯色深于陰性對(duì)照作為標(biāo)本陽(yáng)性的指標(biāo)。

　　目視法簡(jiǎn)捷明了，但頗具主觀性。在條件許可下，應(yīng)該用比色計(jì)測(cè)定吸光值，這樣可以得到客觀的數(shù)據(jù)。先讀出標(biāo)本（sample，S）、陽(yáng)性對(duì)照（P）、和陰性對(duì)照（N）的吸光值，然后進(jìn)行計(jì)算。計(jì)算方法有多種，大致可分為陽(yáng)性判定值法和標(biāo)本與陰性對(duì)照比值法兩類。

　　a． 陽(yáng)性判定值

　　陽(yáng)性判定值（cut-off value）一般為陰性對(duì)照A值加上一個(gè)特定的常數(shù)，以此作為判斷結(jié)果陽(yáng)性或陰性的標(biāo)準(zhǔn)。

　　用此法判斷結(jié)果要求實(shí)驗(yàn)條件十分恒定，試劑的制備必須標(biāo)準(zhǔn)化，陽(yáng)性和陰性的對(duì)照品應(yīng)符合一定的規(guī)格，須配用精密的儀器，并嚴(yán)格按規(guī)定操作。陽(yáng)性判定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過(guò)對(duì)大量標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)而得到的。現(xiàn)舉某種檢測(cè)HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對(duì)照品為不含HBsAg的復(fù)鈣人血漿，陽(yáng)性對(duì)照品HBsAg的含量標(biāo)明為P=9±2ng/ml。每次試驗(yàn)設(shè)2個(gè)陽(yáng)性對(duì)照和3個(gè)陰性對(duì)照。測(cè)得A值后，先計(jì)算陰性對(duì)照A值的平均數(shù)（NCX）和陽(yáng)性對(duì)照A值的平均數(shù)（PCX），兩個(gè)平均數(shù)的差（P-N）必須大于一個(gè)特定的數(shù)值（例0.400），試驗(yàn)才有效。3個(gè)陰性對(duì)照A值均應(yīng)≥0.5×NCX，并≤1.5×NCX，如其中超出此范圍，則棄去，而已另兩個(gè)陰性對(duì)照重新計(jì)算NCX；如有兩個(gè)陰性對(duì)照A值超出以上范圍，則該次實(shí)驗(yàn)無(wú)效。陽(yáng)性判定值按下式計(jì)算：

　　陽(yáng)性判定值=NCX+0.05

　　標(biāo)本A值＞陽(yáng)性判定值的為陽(yáng)性，小于陽(yáng)性判定值的為陰性。應(yīng)注意的是，式中0.05為該試劑盒的常數(shù)，只適合于該特定條件下，而不是對(duì)各種試劑均可通用。

　　根據(jù)以上敘述可以看出，在這種方法中陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照也起到試驗(yàn)的質(zhì)控作用，試劑變質(zhì)和操作不當(dāng)均會(huì)產(chǎn)生"試驗(yàn)無(wú)效"的后果。

　　b.標(biāo)本/陰性對(duì)照比值

　　在實(shí)驗(yàn)條件（包括試劑）較難保證恒定的情況下，這種判斷法較為合適。在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的A值后，計(jì)算S/N值。也有寫(xiě)作P/N的，這里的P不代表陽(yáng)性（positive），而是病人（patient）的縮寫(xiě)，不應(yīng)誤解。為避免混淆，更宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA中，有些作者定出S/N為陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)，現(xiàn)多為各種測(cè)定所沿用。實(shí)際上每一測(cè)定系統(tǒng)應(yīng)該用實(shí)驗(yàn)求出各自的S/N的閾值。更應(yīng)注意的是，N所代表的陰性對(duì)照是不含受檢物質(zhì)的人血清。有的試劑盒中所設(shè)陰性對(duì)照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液，以致反應(yīng)后產(chǎn)生的本底可能較正常人血清的本底低得多。因此，這類試劑盒規(guī)，如N<0.05（或其他數(shù)值），則按0.05計(jì)算，否則將出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。

【雞白介素17(IL-17)ELISA試劑盒現(xiàn)貨】　�。�2）競(jìng)爭(zhēng)法

　　在競(jìng)爭(zhēng)法ELISA中，陰性孔呈色深于陽(yáng)性孔。陰性呈色的強(qiáng)度取決于反應(yīng)中酶結(jié)合物的濃度和加入競(jìng)爭(zhēng)抑制物的量，一般調(diào)節(jié)陰性對(duì)照的吸光度在1.0-1.5之間，此時(shí)反應(yīng)*為敏感。

　　競(jìng)爭(zhēng)法ELISA不易用自視判斷結(jié)果，因肉眼很難辨別弱陽(yáng)性反應(yīng)與陰性對(duì)照的顯色差異，一般均用比色計(jì)測(cè)定，讀出S、P和N的吸光值。計(jì)算方法主要也有兩種，即陽(yáng)性判定值法和抑制率法。

　　a. 陽(yáng)性判定值法

　　與間接法和夾心法中的陽(yáng)性判定值法基本相同，但在計(jì)算公式中引入陽(yáng)性對(duì)照A值，現(xiàn)舉某種檢測(cè)抗HBc的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對(duì)照為不含抗HBc的復(fù)鈣人血漿，陽(yáng)性對(duì)照中抗HBc含量為125±100u/ml。每次試驗(yàn)設(shè)2個(gè)陽(yáng)性對(duì)照和3個(gè)陰性對(duì)照。測(cè)得A值后，先計(jì)算陰性對(duì)照A值的平均值（NCX）和陽(yáng)性對(duì)照A值的平均數(shù)（PCX），兩個(gè)平均數(shù)的差（N-P）必須大于一個(gè)特定的數(shù)值（例如0.300）,試驗(yàn)才有效。3個(gè)陰性對(duì)照A值均應(yīng)小于2.000，而且應(yīng)≥0.5×NCX并≤1.5×NCX，如其中超出此范圍，則棄去，而以另2個(gè)陰性對(duì)照重新計(jì)算×NCX；如有2個(gè)陰性對(duì)照A超出以上范圍，則該次實(shí)驗(yàn)無(wú)效。陽(yáng)性判定值按下式計(jì)算：

　　陰性判定值=0.4×NCX+0.6×PCX

　　標(biāo)本A值≤陽(yáng)性判定值的反應(yīng)為陽(yáng)性，A＞陽(yáng)性判定值的反應(yīng)為陰性。

　　b. 抑制率法

　　抑制率表示標(biāo)本在競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合中標(biāo)本對(duì)陰性反應(yīng)顯色的抑制程度，按下式計(jì)算：

　　抑制率（%）= （陰性對(duì)照A值-標(biāo)本A值）×100%/陰性對(duì)照A值

　　一般規(guī)定抑制率≥50%為陽(yáng)性，＜50%為陰性。

 定量測(cè)定

　　ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的一致，因此在定量測(cè)定中，每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙，以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，中央較呈直線的部分是*理想的檢測(cè)區(qū)域。

　　測(cè)定小分子量物質(zhì)常用競(jìng)爭(zhēng)法，其標(biāo)準(zhǔn)曲線中吸光度與受檢物質(zhì)的濃度呈負(fù)相關(guān)。標(biāo)準(zhǔn)曲線的形狀因試劑盒所用模式的差別而略有不同。ELISA測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線注意圖中橫坐標(biāo)為對(duì)數(shù)關(guān)系，這更有利于測(cè)定系統(tǒng)的表達(dá)。

        講述完了以上ELISA實(shí)驗(yàn)的操作要點(diǎn)，可以發(fā)現(xiàn)其實(shí)很多步驟都并不復(fù)雜，重要的是操作的時(shí)候一定要注重細(xì)節(jié)，熟能生巧，才可以掌握ELISA實(shí)驗(yàn)的精髓所在。

800160     Single Read, w/o prep      "Sequencing of plasmid DNA ａnd PCR products, including DNA quality control

Repetition of sequencing, if necessary

Data collected to maximal read length" CNY                             

800101     Basic Read Tubes               CNY                             

765512     PAXgene Tissue STABILIZER Conc. (150 ml)              CNY                             

132007     EasyXtal 15-well Tool (100)                CNY                             

201207     Taq DNA Polymerase (5000)    "20 x 250 units Taq DNA Polymerase, 10x PCR Buffer,* 5x Q-Solution, 25 mM MgCl2

NEW! Now with 10x CoralLoad PCR Buffer

Taq DNA Polymerase is now supplied with CoralLoad PCR Buffer, which has all of the advantages of QIAGEN PCR Buffer but can also be used to directly load the PCR reaction onto an agarose gel without the need to add a gel loading buffer. CoralLoad PCR Buffer provides the same high PCR specificity ａnd minimal reaction optimization as conventional QIAGEN PCR Buffer. Additionally, it contains two marker dyes: an orange dye ａnd a red dye, that facilitate estimation of DNA migration distance ａnd optimization of agarose gel run time."         CNY                             

9238319  V-drive unit, BR8000, V2          CNY                             

9238178  QIAplate Holder, SBS, black              CNY                             

9238134  Multiwell-Plate Holder, SBS              CNY                             

9240675  Tee, Barbed, Plastic, AP96                CNY                              【雞白介素17(IL-17)ELISA試劑盒現(xiàn)貨】

9240653  Pressure Pump, Gast, 120V, AP96            CNY                             

9240624  Solid State Relay, AP196/98               CNY                             

9240576  Cable Assy, Capper, X51,CCW, AP96/196           CNY                             

9240546  Motor, Shutter Door, Eppendorf, AP196/98               CNY                             

9240544  Centrifuge, 5810RA, Eppendorf, AP196/98                CNY                             

9240513  Mouse, Standard, AP                 CNY                             

9240508  Software & Std. Protocols, AP98               CNY                             

9240499  Reagent Pump, AP            CNY                             

9240378  Autopure, Installation      The Installation, AUTOPURE facilitates the quick implementation of the AUTOPURE into the lab routine by minimizing the instrument start-up phase. It covers the hardware ａnd software installation of the AUTPOURE instrument ａnd provides the user with an introductory training on operation ａnd user maintenance. The installation includes labor ａnd travel costs. The performance of the installation process is documented on a GMP/GLP-compliant Field Service document.         CNY                             

9240242  Connector, disp. tip adapter drive, TR              CNY                             

9239959  EZ1, Premium Agreement       The Premium Cover Agreement EZ1 provides full service coverage for the BioRobot EZ1. Costs for service visits are fully covered including travel, labor, ａnd parts. The agreement also includes one annual preventive maintenance visits, with costs for labor ａnd parts covered. With a Full Agreement, there is a priority response time of 24 hours (1 working day).         CNY                             

9020028  ZB sensor, 320mm, EZ1xl                   CNY                             

9020018  Upgrade kit, vacuum chamber, CAS-1820                 CNY                             

9019987  PCB, small breakout, 8 core, Cxx               CNY                             

9019927  Cover, tip ejector (UV), Cx8               CNY                             

9019926  PCB, Microboard, Cxx                CNY                              【雞白介素17(IL-17)ELISA試劑盒現(xiàn)貨】

9019488  Filter, polycap incl. tube/coupling, CX1             CNY                             

9238856  #Basic Cover Agreement MDx, 2PM, 1yr         The Basic Cover Agreement MDx, 2PM provides full service coverage for the BioRobot MDx. Costs for service visits are fully covered including travel, labor, ａnd parts. The agreement also includes two annual preventive maintenance visits, with costs for labor ａnd parts covered. With a Basic Cover Agreement, the response time is 5 working days.         CNY                             

9238839  #Twister II, Basic Agreement, no PM      The Basic Cover Agreement BR Twister II provides full service coverage for the BioRobot Twister II. Costs for service visits are fully covered including travel, labor, ａnd parts. With a Basic Cover Agreement, the response time is 5 working days.     CNY                             

9241178  Fuse, 4A, 250VAC, QX                CNY                             

9238830  BR 3000, Basic Agreement      The Basic Cover Agreement 3000 provides full service coverage for the BioRobot 3000. Costs for service visits are fully covered including travel, labor, ａnd parts. The agreement also includes one annual preventive maintenance visit, with costs for labor ａnd parts covered. With a Basic Cover Agreement, the response time is 5 working days.     CNY                            

9238813  Rectangular carrier for 20 RIA-tubes                CNY                             

QY-x2284 HAN 人羊膜細(xì)胞                                                 

QY-x2285 H-bc 人膀胱癌細(xì)胞                                                     

QY-x2286 HBF 人膀胱組織來(lái)源細(xì)胞                                                  

QY-x2287 NRK-52E 大鼠腎細(xì)胞DMEM培養(yǎng)基，添加4 mM L-谷氨酰胺，含1.5 g/L 碳酸氫鈉4.5 g/L 葡萄糖, 95%; 小牛血清, 5%                                                        

QY-x2288 NRK大鼠腎細(xì)胞含1.5g/L 碳酸氫鈉， 4.5g/L 葡萄糖， 4mM L-谷氨酰胺的DMEM，90%；胎牛血清或新生牛血清，10%。 ： -                                                   

QY-x2289 NIH/3T3 鼠成纖維細(xì)胞系 含1.5g/L 碳酸氫鈉， 4.5g/L 葡萄糖，4mM L-谷氨酰胺的DMEM，90%；BCS，10%。 ： 與原始的...                                                  

QY-x2290 NCI-N87 [N87]人胃癌細(xì)胞 RPMI 1640 medium with 2 mM L-glutamine adjusted to contain ...                                                       【雞白介素17(IL-17)ELISA試劑盒現(xiàn)貨】

QY-x2291 NCI-H292人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)含2mM L-谷氨酰胺，10mM HEPES，1mM 丙酮酸鈉，4.5g/L 葡萄糖，1.5g/L ...                                               

QY-x2292 NAMALWA 人Burkitt&#39;s淋巴瘤細(xì)胞B 淋巴細(xì)胞；Burkitt淋巴瘤形態(tài)： 淋巴母細(xì)胞含1.5g/L 碳酸氫鈉， 4.5g/L 葡萄糖， 10mM HEPE...                                                    

QY-x2293 MRC-5 人胚肺細(xì)胞 含1.0mM丙酮酸鈉，0.1mM非必需氨基酸和1.5克/升碳酸氫鈉的EMEM，90%；胎牛血清，10%。 ： MRC-5細(xì)胞系來(lái)自...                                                        

QY-x2294 MGC80-3 人胃癌細(xì)胞RPMI 1640+10%胎牛血清或新生牛血清 ： 從一位53歲 性原發(fā)性胃低分化粘液腺癌患者建立。                                                       

QY-x2295 MFC小鼠胃癌細(xì)胞 RPMI 1640+10%胎牛血清或新生牛血清 ： 源自615小鼠。狗腎細(xì)胞 MDCK (NBL-2) 詢價(jià) ATCC                                                        

QY-x2296 MDCK (NBL-2) 狗腎細(xì)胞含 1.5g/L 碳酸氫鈉，0.1mM 非必需氨基酸，1.0mM 丙酮酸鈉，2mM L-谷氨酰胺和Earle&#39;...                                                        

QY-x2297 MDCK犬腎細(xì)胞系添加2mM L-谷氨酰胺，1.0mM丙酮酸鈉，0.1mM非必需氨基酸，1.5g/L碳酸氫鈉的EMEM，90%；FBS，10%。 ： 1...                                                   

QY-x2298 MDBK (NBL-1) 牛腎細(xì)胞 含 1.5g/L 碳酸氫鈉，0.1mM 非必需氨基酸，1.0mM 丙酮酸鈉，2mM L-谷氨酰胺和Earle&#39...                                                  

QY-x2299 MDA-MB-453 人乳腺癌細(xì)胞 L-15+10%胎牛血清 ： 從胸水中建立的人乳腺癌細(xì)胞株。                                                

QY-x2300 MDA-MB-231 人乳腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移性胸膜滲出液形態(tài)：Leibovitz&rsquo;s L15培養(yǎng)液，添加10%胎牛血清。 ： MDA-MB-231來(lái)...                                                       

QY-x2301 MCF7人乳腺癌細(xì)胞EMEM加1.0mM丙酮酸鈉，0.1mM非必需氨基酸和1.5克/升碳酸氫鈉，添加0.01毫克/毫升牛胰島素和10%胎牛血... 恒河猴腎細(xì)胞 LLC-MK2 詢價(jià) ATCC                                                

QY-x2302 LLC-MK2 恒河猴腎細(xì)胞 含1.68g/L碳酸氫鈉的199培養(yǎng)基，99%；新生牛血清，1%。 ： LLC-MK2細(xì)胞株源自六只成年綠猴的腎細(xì)胞懸液。 據(jù)報(bào)...                                                     

QY-x2303 LLC小鼠肺癌細(xì)胞 DMEM+10%胎牛血清或新生牛血清 ： 小鼠Lewis肺癌細(xì)胞                                               

QY-x2304 L929小鼠成纖維細(xì)胞RPMI 1640+10%胎牛血清或新生牛血清 ： 親本L的亞克隆，是*早建立的連續(xù)培養(yǎng)物。 L細(xì)胞源自100天的...                                                        

QY-x2305 L6 大鼠成肌細(xì)胞含4mM L-谷氨酰胺，1.0mM 丙酮酸，4.5g/L 葡萄糖和1.5g/L碳酸氫鈉的DMEM 90%；胎牛血清 10%。 ...                                                     

QY-x2306 Jurkat人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 RPMI-1640 10%FBS ： 細(xì)胞株來(lái)源于一個(gè)14歲 孩的外周血。 經(jīng)佛波酯和外源凝集素或抗T3單克...                                                       【雞白介素17(IL-17)ELISA試劑盒現(xiàn)貨】

QY-x2307 Huh-7 人肝癌細(xì)胞 DMEM 10%FBS ： 據(jù)說(shuō)產(chǎn)甲胎蛋白，胰酶&alpha;抗體，血漿銅藍(lán)蛋白，纖維蛋白原，纖維粘連蛋白等。                                                      

QY-x2308 HT-29 人結(jié)腸癌細(xì)胞 McCoy&rsquo;s 5a 10%FBS ： 1964年，該細(xì)胞系由J.Fogh 用移植培養(yǎng)方法和含15%FBS的F12培...                                                      

QY-x2309 HT-1080 人纖維肉瘤細(xì)胞系DMEM 10%FBS ： 這株細(xì)胞含有活化的N-ras癌基因。                                              

QY-x2310 HMy2.CIR人B淋巴母細(xì)胞IMDM 10%FBS ： ARH-77細(xì)胞株的快速生長(zhǎng)突變株HMy.2 B用&gamma;射線照射，選擇HLA...                                                   

QY-x2311 HL-7702 人肝正常細(xì)胞RPMI1640+20%FBS ： -                                                      

QY-x2312 HL-60 人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞IMDM 10%FBS ： 這是一株早幼粒細(xì)胞。 外周血白細(xì)胞來(lái)自一位患有急性粒-單核細(xì)胞白血病的36歲白人 性。 自發(fā)...                                                

QY-x2313 HK-2腎小管株 DMEM/F12+bpE(0.05mg/ml)+EGF(5ng/ml) + 10%FBS ： -