【神經(jīng)少突起前質(zhì)膠質(zhì)細(xì)胞】下面是細(xì)胞株培養(yǎng)的具體無菌技術(shù)要點(diǎn)：

1. 實(shí)驗(yàn)開始前，無菌室和無菌操作臺(tái)需要紫外光照射30到60分鐘完全滅菌，用70%ethanol擦拭無菌操作臺(tái)面，并且打開無菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)行10分鐘之后，才可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只能處理一株細(xì)胞株，即使培養(yǎng)基完全相同也不可共用培養(yǎng)基，以避免細(xì)胞間污染或失誤混淆。實(shí)驗(yàn)完成后，請(qǐng)將實(shí)驗(yàn)物品拿出工作臺(tái)，用70%ethanol再次擦拭無菌操作臺(tái)面。操作間隔應(yīng)該讓無菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘到15分鐘后，才能進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株的操作。

2. 無菌操作工作的區(qū)域應(yīng)保持清潔和寬敞，必要物品（試管架、吸管、吸取器或吸管盒等）可以暫時(shí)放置，其它實(shí)驗(yàn)用品使用完畢后應(yīng)移出，有利于空氣流通。實(shí)驗(yàn)用品需70%ethanol擦拭后方可帶入無菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作過程應(yīng)在臺(tái)面的中央無菌區(qū)域內(nèi)完成，請(qǐng)勿在邊緣非無菌區(qū)域進(jìn)行操作。

3. 小心取用無菌實(shí)驗(yàn)物品，避免細(xì)菌污染。請(qǐng)勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處，也不要在打開的容器正上方進(jìn)行操作。容器打開后，請(qǐng)用手夾住瓶蓋并輕握瓶身，傾斜大約45°角取用，盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。

4. 工作人員應(yīng)當(dāng)首先注意自身安全，必須穿戴齊實(shí)驗(yàn)衣和實(shí)驗(yàn)手套后才能進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對(duì)于病毒感染或是來自人類的細(xì)胞株應(yīng)當(dāng)特別小心操作，并選擇適當(dāng)?shù)燃?jí)的無菌操作臺(tái)進(jìn)行（至少是Class II）。操作過程中，應(yīng)避免引起aerosol的產(chǎn)生，小心有毒性藥品，例如DMSO和TPA等，并避免針頭的傷害等等。

5. 定期檢測(cè)下列項(xiàng)目：

5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力

5.2. CO2培養(yǎng)箱的CO2濃度、溫度、和水盤是否有污染（水盤的水需用無菌水，每周定時(shí)更換）。

5.3. 無菌操作臺(tái)內(nèi)的airflow壓力，定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜，預(yù)濾網(wǎng)（300小時(shí)/預(yù)濾網(wǎng)，3000小時(shí)/HEPA）。

6. 水槽內(nèi)可添加消毒劑（Zephrin 1:750），需定期更換水槽中的水。

【神經(jīng)少突起前質(zhì)膠質(zhì)細(xì)胞】齊一生物友情提醒，本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床及診斷使用！

一細(xì)胞說明，具體詳細(xì)請(qǐng)見細(xì)胞附帶說明書

 二、客戶自備試劑

1、PBS  

2、 2、RPMI-1640 培養(yǎng)基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

3、0.25%  （W/V）胰蛋白酶（含 0.02% EDTA）

三、細(xì)胞背景

1、生長方式：貼壁

2、種屬：Homo sapiens  人

四、培養(yǎng)條件

1、培養(yǎng)基：RPMI-1640 培養(yǎng)基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

2、溫度：37.0°C

3、氣體:空氣  95%，CO2 5%

【神經(jīng)少突起前質(zhì)膠質(zhì)細(xì)胞】五、培養(yǎng)方法

 收到細(xì)胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個(gè)細(xì)胞生長情況：

 如果細(xì)胞未長滿，用 75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，留10ml 培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞已長滿（達(dá) 80-90%）。即可進(jìn)行傳代，具六、體步驟如下：

1，棄去培養(yǎng)液，用PBS洗 1-2次。

2，向瓶?jī)?nèi)加入 1.0-2.0ml 胰蛋白酶液，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺(tái)，吸取胰蛋白酶，加含有 6ml  含 10%血清的培養(yǎng)液，輕輕吹打細(xì)胞。

3，加入等量的的培養(yǎng)液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)

4，傳代比例：1:2-1:3  

七、常見問題及解決方案

1、培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細(xì)胞極大可能會(huì)污染，所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決。

2、細(xì)胞漂�。号囵B(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底，表明細(xì)胞活力正常，剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉，留 10ml 培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細(xì)胞生長至匯合度 80%，進(jìn)行消化傳代；如細(xì)胞還是不貼壁，將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo)，直到問題解決。

細(xì)胞培養(yǎng)代理品牌

細(xì)胞培養(yǎng)代理品牌

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None of our protocols use microtubes so this is an accessory that most likely KF customers would use. We do not ship this tray with the instrument"       CNY                                  

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9238466  Lubricant, silicon fluid          CNY                                  

9238223  Laser Alignment Solution (10ml)          CNY                                  

QY-L0036       白當(dāng)歸腦26091-79-2    Byakangelicol  26091-79-2     20mg                   

QY-L0037       白當(dāng)歸素19573-01-4    Byakangelicin  19573-01-4     20mg                   

QY-L0038       歐當(dāng)歸內(nèi)酯A88182-33-6     Levistilide A    88182-33-6     20mg                   

QY-L0039       二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯5058-13-9      Columbianadin       5058-13-9      20mg                   

QY-L0040       二氫歐山芹素3804-70-4      Columbianetin 3804-70-4      20mg                   

QY-L0041       白楊素480-40-0    Chrysin   480-40-0 20mg                   

QY-L0042       7-O-甲基白楊素    "7-O-Methylchrysin

"             20mg                   

QY-L0043       白藜蘆醇501-36-0       Resveratrol     501-36-0 20mg                    【神經(jīng)少突起前質(zhì)膠質(zhì)細(xì)胞】

QY-L0044       虎杖苷27208-80-6       Polydatin 27208-80-6     20mg                   

QY-L0045       乙酰白藜蘆醇42206-94-0    AcetylResveratrol   42206-94-0     20mg                   

QY-L0046       苯甲酰新烏頭原堿63238-67-5    Benzoylmesaconine 63238-67-5     20mg                   

QY-L0047       苯甲酰烏頭原堿466-24-0    Benzoylaconine      466-24-0 20mg                   

QY-L0048       苯甲酰次烏頭原堿       Benzoylhypacoitine        20mg                   

QY-L0049       次烏頭6900-87-4  Hypaconitine   6900-87-4      20mg                   

QY-L0050       新烏頭2752-64-9  Mesaconitine   2752-64-9      20mg                   

QY-L0051       烏頭302-27-2       Aconitine 302-27-2 20mg                   

QY-L0052       高烏甲素32854-75-4    Lappaconitine(p)    32854-75-4     20mg                   

QY-L0053       乙酰烏頭77181-26-1    Acetylaconitine       77181-26-1     20mg                   

QY-L0054       氫溴酸高烏甲素97792-45-5       Lappaconitine Hydrobromide 97792-45-5     20mg                   

QY-L0055       烏頭原堿(滴定法95%)509-20-6  Aconine   509-20-6 20mg                   

QY-L0056       新烏頭原堿                  20mg                   

QY-L0057       次烏頭原堿                  20mg                   

QY-L0058       草烏甲素79592-91-9    Bulleyaconitine A；Crassicauline A       79592-91-9     20mg                   

QY-L0059       苯甲酸65-85-0      Benzoic acid   65-85-0   20mg                    【神經(jīng)少突起前質(zhì)膠質(zhì)細(xì)胞】

QY-L0060       表告依春1072-93-1      Goitrine   1072-93-1      20mg                   

QY-L0061       靛玉紅479-41-4    Indirubin 479-41-4 20mg                   

QY-L0062       靛藍(lán)482-89-3       Indigo     482-89-3 20mg                   

QY-L0063       白樺脂酸472-15-1       Betulinic acid 472-15-1 20mg                   

QY-L0064       白樺脂醇473-98-3       Betulin     473-98-3 20mg                   

QY-L0065       白樺脂醛13159-28-9    Betulinicaldehyde    13159-28-9     20mg                   

QY-L0066       表白樺脂酸38736-77-5       Epibetulinic acid     38736-77-5     20mg