【甲狀腺濾泡上皮細胞】下面是細胞株培養(yǎng)的具體無菌技術要點：

1. 實驗開始前，無菌室和無菌操作臺需要紫外光照射30到60分鐘完全滅菌，用70%ethanol擦拭無菌操作臺面，并且打開無菌操作臺風扇運行10分鐘之后，才可以進行實驗操作。每次操作只能處理一株細胞株，即使培養(yǎng)基完全相同也不可共用培養(yǎng)基，以避免細胞間污染或失誤混淆。實驗完成后，請將實驗物品拿出工作臺，用70%ethanol再次擦拭無菌操作臺面。操作間隔應該讓無菌操作臺運轉10分鐘到15分鐘后，才能進行下一個細胞株的操作。

2. 無菌操作工作的區(qū)域應保持清潔和寬敞，必要物品（試管架、吸管、吸取器或吸管盒等）可以暫時放置，其它實驗用品使用完畢后應移出，有利于空氣流通。實驗用品需70%ethanol擦拭后方可帶入無菌操作臺內。實驗操作過程應在臺面的中央無菌區(qū)域內完成，請勿在邊緣非無菌區(qū)域進行操作。

3. 小心取用無菌實驗物品，避免細菌污染。請勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處，也不要在打開的容器正上方進行操作。容器打開后，請用手夾住瓶蓋并輕握瓶身，傾斜大約45°角取用，盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。

4. 工作人員應當首先注意自身安全，必須穿戴齊實驗衣和實驗手套后才能進行實驗。對于病毒感染或是來自人類的細胞株應當特別小心操作，并選擇適當?shù)燃壍臒o菌操作臺進行（至少是Class II）。操作過程中，應避免引起aerosol的產(chǎn)生，小心有毒性藥品，例如DMSO和TPA等，并避免針頭的傷害等等。

5. 定期檢測下列項目：

5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力

5.2. CO2培養(yǎng)箱的CO2濃度、溫度、和水盤是否有污染（水盤的水需用無菌水，每周定時更換）。

5.3. 無菌操作臺內的airflow壓力，定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜，預濾網(wǎng)（300小時/預濾網(wǎng)，3000小時/HEPA）。

6. 水槽內可添加消毒劑（Zephrin 1:750），需定期更換水槽中的水。

【甲狀腺濾泡上皮細胞】齊一生物友情提醒，本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床及診斷使用！

一細胞說明，具體詳細請見細胞附帶說明書

 二、客戶自備試劑

1、PBS  

2、 2、RPMI-1640 培養(yǎng)基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

3、0.25%  （W/V）胰蛋白酶（含 0.02% EDTA）

三、細胞背景

1、生長方式：貼壁

2、種屬：Homo sapiens  人

四、培養(yǎng)條件

1、培養(yǎng)基：RPMI-1640 培養(yǎng)基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

2、溫度：37.0°C

3、氣體:空氣  95%，CO2 5%

【甲狀腺濾泡上皮細胞】五、培養(yǎng)方法

 收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況：

 如果細胞未長滿，用 75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，留10ml 培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞已長滿（達 80-90%）。即可進行傳代，具六、體步驟如下：

1，棄去培養(yǎng)液，用PBS洗 1-2次。

2，向瓶內加入 1.0-2.0ml 胰蛋白酶液，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，吸取胰蛋白酶，加含有 6ml  含 10%血清的培養(yǎng)液，輕輕吹打細胞。

3，加入等量的的培養(yǎng)液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)

4，傳代比例：1:2-1:3  

七、常見問題及解決方案

1、培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細胞極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。

2、細胞漂�。号囵B(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉，留 10ml 培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細胞生長至匯合度 80%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。

細胞培養(yǎng)代理品牌

細胞培養(yǎng)代理品牌

【甲狀腺濾泡上皮細胞】齊一生物科技（上海）有限公司是一家專業(yè)生產(chǎn)和銷售各種生化試劑,細胞株、原代細胞、菌種、醫(yī)藥中間體,標準品和對照品的大型化學科技公司. 齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490；Web:www.qiyibio.com

9019715  PyroMark Q24 User Manual         CNY                                  

9019648  Mixer module w. top plate, PyroQ96ID        CNY                                  

9019643  Sensor, solenoid, EZ1xl         CNY                                  

9019589  Cable harness, x axis, C34            CNY                                  

9019587  PCB, mainboard, QGY          CNY                                  

9019582  End cap, Y-arm, Cxx             CNY                                  

9019551  Fuse, 2A        CNY                                  

9019513  Adapter, reagent tub plate, CX1            CNY                                  

9019502  TANK UPPER BUFFER ASSY GS        CNY                                  

218073    miScript SYBR Green PCR Kit (200)           CNY                            【甲狀腺濾泡上皮細胞】   

218061    miScript Reverse Transcription Kit (50)              CNY                                  

217504    miRNeasy FFPE Kit (50)              CNY                                  

9019441  Mother board ( micro board V 2.1 )            CNY                                  

204245    QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit (1000)       For 1000 x 50 ul reactions:  25 ml QuantiTect SYBR Green RT-PCR Master Mix (providing a final concentration of 2.5 mM MgCl2), 0.5 ml QuantiTect RT Mix, 20 ml RNase-free water   CNY                                  

204156    QuantiFast SYBR Green RT-PCR Kit (2000)        CNY                                  

204074    Rotor-Gene SYBR Green PCR Kit (400)      The Rotor-Gene SYBR Green PCR Kit is dedicated for use with the Rotor-Gene Q cycler, providing ultrafast, highly specific quantification in real-time PCR ａnd two-step RT-PCR using SYBR Green I.      CNY                                  

9019432  Hose, cooling blower, RG3           CNY                                  

9019423  Belt, toothed, source optics, RG3         CNY                                  

9019394  Gasket, cooling flap, RG3            CNY                                  

9019385  EPROM, IC main board, state F/W, RG3            CNY                                  

9019367  Gasket, lower chamber, RG6        CNY                                  

1027419  Flexitube siRNA 20 nmol W Modification            CNY                                  

1027412  FlexiPlate siRNA - 0.25 nmol        CNY                                  

9019323  Board, main, no microprocessor, RG6         CNY                                  

9234699  Mikrowin              CNY                                  

9020439  Cap - Vacuum bottle, PyroVW             CNY                            【甲狀腺濾泡上皮細胞】   

9234458  Coupling, CPC, screw, male         CNY                                  

9233726  Rack for Murex Reagents GE 14/15 (P1/3)         CNY                                  

9019199  Hinge kit - Robot, PyroQ96MD            CNY                                  

1074536  QIAsymphony Circulating NA Kit(48),cus,G              CNY                                  

9019880  Lid with LED, silver, RGQ           CNY                                  

9019839  PyroMark Computer (OPC), PyroQ96         CNY                                  

9019813  Service kit, pipettor 8 ch w/tool, Cx8          CNY                                  

QKG-196              規(guī)格：200次                            

QKG-197              規(guī)格：1000次                                 

QKG-198       超純RNA提取試劑盒 Ultrapure RNA Kit (DNase I) 規(guī)格：50次                              

QKG-199       病毒RNA提取試劑盒 RNApure Virus Kit  規(guī)格：50次                              

QKG-200       miRNA提取試劑盒 miRNA Purification Kit       規(guī)格：50次                              

QKG-201       固定組織RNA提取試劑盒 RNApure FFPE Kit 規(guī)格：50次                              

QKG-202       血液RNA提取試劑盒 RNApure Blood Kit 規(guī)格：50次                              

QKG-203       血液RNA提取試劑盒 RNApure Blood Kit (DNase I)       規(guī)格：50次                              

QKG-204       動物組織/細胞RNA提取試劑盒 RNApure Tissue&Cell Kit     規(guī)格：50次                              

QKG-205       動物組織/細胞RNA提取試劑盒 RNApure Tissue&Cell Kit (DNase I)    規(guī)格：50次                              

QKG-206       細菌RNA提取試劑盒 RNApure Bacteria Kit     規(guī)格：50次                               【甲狀腺濾泡上皮細胞】

QKG-207       細菌RNA提取試劑盒 RNApure Bacteria Kit (DNase I)    規(guī)格：50次                              

QKG-208       植物RNA提取試劑盒 RNApure Plant Kit  規(guī)格：50次                              

QKG-209       植物RNA提取試劑盒 RNApure Plant Kit (DNase I) 規(guī)格：50次                              

QKG-210       全能型植物RNA提取試劑盒 OminiPlant RNA Kit (DNase I)  規(guī)格：50次                              

QKG-211 游離RNA(血清血漿尿液等)提取試劑 RNApure Circulating Reagent      規(guī)格：50次                              

QKG-212       酵母RNA提取試劑盒 RNApure Yeast Kit (DNase I) 規(guī)格：50次                              

QKG-213       RNA純化試劑盒 RNA Cleanup Kit     規(guī)格：20次                              

QKG-214       DNA/RNA提取試劑盒 AllPure DNA/RNA Kit    規(guī)格：50次                              

QKG-215       DNA/RNA/Protein提取試劑盒 AllPure DNA/RNA/Protein Kit  規(guī)格：50次                              

QKG-216       磁珠法DNA純化回收試劑盒 MagBead DNA Purification Kit (for NGS Size Selection) 規(guī)格：5ml                                

QKG-217              規(guī)格：50ml                               

QKG-218       磁珠法瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 MagBead Gel Extraction Kit   規(guī)格：100次                            

QKG-219              規(guī)格：400次                            

QKG-220       磁珠法血液DNA提取試劑盒 MagBead Blood DNA Kit    規(guī)格：48次                              

QKG-221              規(guī)格：100次                            

QKG-222              規(guī)格：400次                             【甲狀腺濾泡上皮細胞】

QKG-223       磁珠法血片DNA提取試劑盒 MagBead Blood Spots DNA Kit  規(guī)格：100次                                      

QKG-224              規(guī)格：400次                            

QKG-225       游離DNA樣本保存管 Cell-Free DNA Storage Tube (5 ml)      規(guī)格：5支                                

QKG-226              規(guī)格：50支