【胎盤羊膜細(xì)胞】下面是細(xì)胞株培養(yǎng)的具體無菌技術(shù)要點(diǎn)：

1. 實(shí)驗(yàn)開始前，無菌室和無菌操作臺需要紫外光照射30到60分鐘完全滅菌，用70%ethanol擦拭無菌操作臺面，并且打開無菌操作臺風(fēng)扇運(yùn)行10分鐘之后，才可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只能處理一株細(xì)胞株，即使培養(yǎng)基完全相同也不可共用培養(yǎng)基，以避免細(xì)胞間污染或失誤混淆。實(shí)驗(yàn)完成后，請將實(shí)驗(yàn)物品拿出工作臺，用70%ethanol再次擦拭無菌操作臺面。操作間隔應(yīng)該讓無菌操作臺運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘到15分鐘后，才能進(jìn)行下一個細(xì)胞株的操作。

2. 無菌操作工作的區(qū)域應(yīng)保持清潔和寬敞，必要物品（試管架、吸管、吸取器或吸管盒等）可以暫時放置，其它實(shí)驗(yàn)用品使用完畢后應(yīng)移出，有利于空氣流通。實(shí)驗(yàn)用品需70%ethanol擦拭后方可帶入無菌操作臺內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作過程應(yīng)在臺面的中央無菌區(qū)域內(nèi)完成，請勿在邊緣非無菌區(qū)域進(jìn)行操作。

3. 小心取用無菌實(shí)驗(yàn)物品，避免細(xì)菌污染。請勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處，也不要在打開的容器正上方進(jìn)行操作。容器打開后，請用手夾住瓶蓋并輕握瓶身，傾斜大約45°角取用，盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。

4. 工作人員應(yīng)當(dāng)首先注意自身安全，必須穿戴齊實(shí)驗(yàn)衣和實(shí)驗(yàn)手套后才能進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對于病毒感染或是來自人類的細(xì)胞株應(yīng)當(dāng)特別小心操作，并選擇適當(dāng)?shù)燃壍臒o菌操作臺進(jìn)行（至少是Class II）。操作過程中，應(yīng)避免引起aerosol的產(chǎn)生，小心有毒性藥品，例如DMSO和TPA等，并避免針頭的傷害等等。

5. 定期檢測下列項(xiàng)目：

5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力

5.2. CO2培養(yǎng)箱的CO2濃度、溫度、和水盤是否有污染（水盤的水需用無菌水，每周定時更換）。

5.3. 無菌操作臺內(nèi)的airflow壓力，定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜，預(yù)濾網(wǎng)（300小時/預(yù)濾網(wǎng)，3000小時/HEPA）。

6. 水槽內(nèi)可添加消毒劑（Zephrin 1:750），需定期更換水槽中的水。

【胎盤羊膜細(xì)胞】齊一生物友情提醒，本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床及診斷使用！

一細(xì)胞說明，具體詳細(xì)請見細(xì)胞附帶說明書

 二、客戶自備試劑

1、PBS  

2、 2、RPMI-1640 培養(yǎng)基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

3、0.25%  （W/V）胰蛋白酶（含 0.02% EDTA）

三、細(xì)胞背景

1、生長方式：貼壁

2、種屬：Homo sapiens  人

四、培養(yǎng)條件

1、培養(yǎng)基：RPMI-1640 培養(yǎng)基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

2、溫度：37.0°C

3、氣體:空氣  95%，CO2 5%

【胎盤羊膜細(xì)胞】五、培養(yǎng)方法

 收到細(xì)胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個細(xì)胞生長情況：

 如果細(xì)胞未長滿，用 75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，留10ml 培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞已長滿（達(dá) 80-90%）。即可進(jìn)行傳代，具六、體步驟如下：

1，棄去培養(yǎng)液，用PBS洗 1-2次。

2，向瓶內(nèi)加入 1.0-2.0ml 胰蛋白酶液，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，吸取胰蛋白酶，加含有 6ml  含 10%血清的培養(yǎng)液，輕輕吹打細(xì)胞。

3，加入等量的的培養(yǎng)液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)

4，傳代比例：1:2-1:3  

七、常見問題及解決方案

1、培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細(xì)胞極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。

2、細(xì)胞漂�。号囵B(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底，表明細(xì)胞活力正常，剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉，留 10ml 培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細(xì)胞生長至匯合度 80%，進(jìn)行消化傳代；如細(xì)胞還是不貼壁，將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo)，直到問題解決。

細(xì)胞培養(yǎng)代理品牌

細(xì)胞培養(yǎng)代理品牌

【胎盤羊膜細(xì)胞】齊一生物科技（上海）有限公司是一家專業(yè)生產(chǎn)和銷售各種生化試劑,細(xì)胞株、原代細(xì)胞、菌種、醫(yī)藥中間體,標(biāo)準(zhǔn)品和對照品的大型化學(xué)科技公司. 齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490；Web:www.qiyibio.com

67563     MagAttract HMW DNA Kit (48)           CNY                                  

63183     DyeEx 96 Kit (24)  24 DyeEx 96 Plates; 4 Collection Plates, 48-Well  CNY                                  

9012750  Syringe pump outlet tubing (5.7 m)             CNY                                  

9010347  Cable, flat, 342mm, Z1-PCB to Z2-PCB              CNY                                  

9010292  X-Abdeckung oben P3xx1 (9194)        CNY                                  

311812    BioMag Protein G (10 ml)     BioMag Protein G suspension (5 mg/ml)      CNY                                  

59844     EpiTect Fast FFPE Bisulfite Kit (50)            CNY                                  

9001810  HC2 Laser Printer, 220V              CNY                                  

206403    QIAGEN LongRange PCR Kit (250)     For 250 PCR rxns a 50 µl: Enzyme Mix (Taq ａnd Proofreading Enzyme, (5 u/µl), 10 x PCR Buffer for increased fidelity (contains dNTP´s),  25 mM MgCl2, 5 x Q-Solution CNY                            【胎盤羊膜細(xì)胞】      

9012732  Plate stacker (dark) 4 plates          CNY                                  

9012724  Syrinbe pump inlet tubing for Plato              CNY                                  

979004    PyroMark Q96 Cartridge (3)  For delivery of nucleotides ａnd reagents for use in PyroMark Q96 ID.      CNY                                  

979002    PyroMark Q96 Plate Low (100)    For sample analysis of DNA template on ID.       CNY                                  

9012711  Syringe pump outlet tubing Plato 3000         CNY                                  

133234    NeXtalStock Sodium citrate pH 3.5 (200)           CNY                                  

133228    NeXtalStock Sodium cacodyl. pH 6.2 (100)        CNY                                  

9002125  QIAxcel Advanced, PrioPLUS       "QIAxcel Advanced Instrument

Installation of QIAxcel Advanced & Introductory training

Warranty extension to 3 yrs

Repair Center service, response 7-10

Loaner available in 2 days*

Preventive Maintenances(1 onsite or RRC,  1 PM per year)

Priority service provision over non-contract customers

Documented installation & PM report

Unlimited number of repair service

All cost covered (travel, labor, parts)"   CNY                                  

9002122  Priority HybridCapture2, Core 240V, APAC         CNY                                  

9002041  Rotor-Gene Q MDx 6Plex no PC         CNY                                  

972052    PyroMark Q96 CpG Prader Willi (96)   For quantification of methylation level in  Prader-Willi ａnd Angelman Syndromes       CNY                                  

971530    therascreen® NRAS Pyro Kit (24) CE         CNY                                  

301109    PolyFect Transfection Reagent (10x100ml)         CNY                                  

301007    Attractene Transfection Reagent (4x1 ml)           CNY                                  

52906     QIAamp Viral RNA Mini Kit (250) For 250 RNA preps: 250 QIAamp Mini Spin Columns, Carrier RNA, Collection Tubes (2 ml), RNase-free Buffers CNY                                  

9012683  Pump, Peri4., inlc. Front (A04897)+Cable           CNY                            【胎盤羊膜細(xì)胞】      

9012664  Tubing, syringe to probe, 90/120   v1.00          CNY                                  

9002009  Rotor-Gene Q MDx 2plex, PrioPLUS   "Rotor-Gene Instrument

Installation of Rotor-Gene & Introductory training

Warranty extension to 3 yrs

Regional Repair Center service, 7-10 day turn around time

Loaner available in 2 days*

Annual Inspections (1 PM per year)

Priority service provision over non-contract customers

Documented installation & PM report

Unlimited number of repair service

All cost covered (travel, labor, parts)"   CNY                                  

133212    NeXtalStock MIB pH 10.0 (200)          CNY                                  

292145    mericon Horse Kit (96)         CNY                                  

292053    mericon Goat Kit (24)           CNY                                  

929522    QX Alignment Marker 15 bp/3 kb (1.5 ml)          CNY                                  

9012636  Vacuum manifold unit, with valve, BR3000   This is the base plate on the instrument for the vacuum manifold ａnd it includes the valves at the bottom CNY                                  

291075    mericon Mon 810 Corn (96)         CNY                                  

QTR-1170      豬繁殖與呼吸綜合征病毒美洲型熒光RT-PCR檢測試劑盒    48                               

QTR-1171      戊型肝炎病毒熒光RT-PCR檢測試劑盒    48                               

QTR-1172      鯉春病熒光RT-PCR檢測試劑盒 48                               

QTR-1173      狂犬病病毒熒光RT-PCR檢測試劑盒 48                               

QTR-1174      傳染性造血器官壞死病病毒RT-PCR檢測試劑盒    48                               

QTR-1175      H3N8馬流感病毒熒光RT-PCR檢測試劑盒      48                               

QTR-1176      禽流感病毒和新城疫病毒熒光RT-PCR檢測試劑盒 48                               

QTR-1177      禽滑液囊支原體抗體診斷試劑盒                                         

QTR-1178      禽滑液囊支原體抗體診斷試劑盒                                         

QTR-1179      雞新城疫病毒抗體檢測試劑盒                                      

QTR-1180      鼠肝炎病毒抗體檢測試劑盒                                         

QTR-1181      禽肺病毒（禽氣管炎）抗體檢測試劑盒                                       【胎盤羊膜細(xì)胞】

QTR-1182      羊邊界病毒抗體診斷試劑盒                                         

QTR-1183      沙門氏菌共價混合物酶聯(lián)法抗體診斷試劑盒                                      

QTR-1184      豬偽狂犬病毒gB抗體診斷試劑盒                                       

QTR-1185      豬偽狂犬病毒gE抗體診斷試劑盒（gE抗體）                                   

QTR-1186      口蹄疫病毒抗體診斷試劑盒(3ABC抗體)                                     

QTR-1187      牛布魯氏桿菌競爭酶聯(lián)法抗體診斷試劑盒                                         

QTR-1188      牛布魯氏桿菌間接酶聯(lián)法抗體診斷試劑盒                                         

QTR-1189      牛副流感3型抗體診斷試劑盒                                      

QTR-1190      牛呼吸道合胞體病毒抗體檢測試劑盒                                         

QTR-1191      牛冠狀病毒抗體診斷試劑盒                                         

QTR-1192      嗜肺軍團(tuán)菌血清組1檢測試劑盒                                         

QTR-1193      嗜肺軍團(tuán)菌血清組2-14檢測試劑盒                                     

QTR-1194      軍團(tuán)菌乳膠凝集試劑盒                                         

QTR-1195      嗜肺軍團(tuán)菌主要血清組1檢測試劑盒                                         

QTR-1196      炭疽桿菌抗原快速檢測試劑盒                                      

QTR-1197      鼠疫菌抗原快速檢測試劑                                       【胎盤羊膜細(xì)胞】

QTR-1198      土拉熱菌抗原快速檢測試劑                                         

QTR-1199      類鼻疽菌抗原快速檢測試劑                                         

QTR-1200      鼻疽菌抗原快速檢測試劑