【結(jié)腸平滑肌細(xì)胞】下面是細(xì)胞株培養(yǎng)的具體無菌技術(shù)要點(diǎn)：

1. 實(shí)驗(yàn)開始前，無菌室和無菌操作臺需要紫外光照射30到60分鐘完全滅菌，用70%ethanol擦拭無菌操作臺面，并且打開無菌操作臺風(fēng)扇運(yùn)行10分鐘之后，才可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只能處理一株細(xì)胞株，即使培養(yǎng)基完全相同也不可共用培養(yǎng)基，以避免細(xì)胞間污染或失誤混淆。實(shí)驗(yàn)完成后，請將實(shí)驗(yàn)物品拿出工作臺，用70%ethanol再次擦拭無菌操作臺面。操作間隔應(yīng)該讓無菌操作臺運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘到15分鐘后，才能進(jìn)行下一個細(xì)胞株的操作。

2. 無菌操作工作的區(qū)域應(yīng)保持清潔和寬敞，必要物品（試管架、吸管、吸取器或吸管盒等）可以暫時放置，其它實(shí)驗(yàn)用品使用完畢后應(yīng)移出，有利于空氣流通。實(shí)驗(yàn)用品需70%ethanol擦拭后方可帶入無菌操作臺內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作過程應(yīng)在臺面的中央無菌區(qū)域內(nèi)完成，請勿在邊緣非無菌區(qū)域進(jìn)行操作。

3. 小心取用無菌實(shí)驗(yàn)物品，避免細(xì)菌污染。請勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處，也不要在打開的容器正上方進(jìn)行操作。容器打開后，請用手夾住瓶蓋并輕握瓶身，傾斜大約45°角取用，盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。

4. 工作人員應(yīng)當(dāng)首先注意自身安全，必須穿戴齊實(shí)驗(yàn)衣和實(shí)驗(yàn)手套后才能進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對于病毒感染或是來自人類的細(xì)胞株應(yīng)當(dāng)特別小心操作，并選擇適當(dāng)?shù)燃壍臒o菌操作臺進(jìn)行（至少是Class II）。操作過程中，應(yīng)避免引起aerosol的產(chǎn)生，小心有毒性藥品，例如DMSO和TPA等，并避免針頭的傷害等等。

5. 定期檢測下列項(xiàng)目：

5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力

5.2. CO2培養(yǎng)箱的CO2濃度、溫度、和水盤是否有污染（水盤的水需用無菌水，每周定時更換）。

5.3. 無菌操作臺內(nèi)的airflow壓力，定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜，預(yù)濾網(wǎng)（300小時/預(yù)濾網(wǎng)，3000小時/HEPA）。

6. 水槽內(nèi)可添加消毒劑（Zephrin 1:750），需定期更換水槽中的水。

【結(jié)腸平滑肌細(xì)胞】齊一生物友情提醒，本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床及診斷使用！

一細(xì)胞說明，具體詳細(xì)請見細(xì)胞附帶說明書

 二、客戶自備試劑

1、PBS  

2、 2、RPMI-1640 培養(yǎng)基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

3、0.25%  （W/V）胰蛋白酶（含 0.02% EDTA）

三、細(xì)胞背景

1、生長方式：貼壁

2、種屬：Homo sapiens  人

四、培養(yǎng)條件

1、培養(yǎng)基：RPMI-1640 培養(yǎng)基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

2、溫度：37.0°C

3、氣體:空氣  95%，CO2 5%

【結(jié)腸平滑肌細(xì)胞】五、培養(yǎng)方法

 收到細(xì)胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個細(xì)胞生長情況：

 如果細(xì)胞未長滿，用 75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，留10ml 培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞已長滿（達(dá) 80-90%）。即可進(jìn)行傳代，具六、體步驟如下：

1，棄去培養(yǎng)液，用PBS洗 1-2次。

2，向瓶內(nèi)加入 1.0-2.0ml 胰蛋白酶液，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，吸取胰蛋白酶，加含有 6ml  含 10%血清的培養(yǎng)液，輕輕吹打細(xì)胞。

3，加入等量的的培養(yǎng)液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)

4，傳代比例：1:2-1:3  

七、常見問題及解決方案

1、培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細(xì)胞極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。

2、細(xì)胞漂�。号囵B(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底，表明細(xì)胞活力正常，剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉，留 10ml 培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細(xì)胞生長至匯合度 80%，進(jìn)行消化傳代；如細(xì)胞還是不貼壁，將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo)，直到問題解決。

細(xì)胞培養(yǎng)代理品牌

細(xì)胞培養(yǎng)代理品牌

【結(jié)腸平滑肌細(xì)胞】齊一生物科技（上海）有限公司是一家專業(yè)生產(chǎn)和銷售各種生化試劑,細(xì)胞株、原代細(xì)胞、菌種、醫(yī)藥中間體,標(biāo)準(zhǔn)品和對照品的大型化學(xué)科技公司. 齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490；Web:www.qiyibio.com

9240532  Cable, Shaker Encoder, AP98        CNY                                  

9240509  Hard Drive, Programmed, Win XP, AP196/98             CNY                                  

9239962  Upgrade App., BR MDx DSP CTM 48 PCR         CNY                                  

9239562  Assy, Fan Mounting, 60 CFM (Coherent)            CNY                                  

9019981  Vacuum test plate          CNY                            【結(jié)腸平滑肌細(xì)胞】   

9019484  Gasket, Carriage upper, CX1        CNY                                  

9241210  RCS, Premium Cover Platform-only,2PM,1yr      "This service agreement supplements the service coverage for the manual digene Hybrid Capture system) after the upgrade to a Rapid Capture System.

The Premium Cover RCS platform-only, 2 PM provides full service coverage for the Rapid Capture System. Costs for service visits are fully covered including travel, labor, ａnd parts. The agreement also includes two annual preventive maintenance visits, with costs for labor ａnd parts covered. With a Premium Agreement, there is a priority response time of 24 hours (1 working day)."    CNY                                  

9241207  QIAsymphony SP, Full Agreement The Full Agreement QIAsymphony provides full service coverage for the QIAsymphony System. Costs for service visits are fully covered including travel, labor, ａnd parts. The agreement also includes one annual preventive maintenance visit, with costs for labor ａnd parts covered. With a Full Agreement, there is a priority response time of 48 hours (2 working days).       CNY                                  

9241189  User Manual, QIAxcel 01/08 (WW)             CNY                                  

9237330  Upgrade, BR & 4 ext. devices w. sched.      Upgrade BioRobot with four approved integration devices using scheduling software  CNY                                  

9237169  Bottle Waste           CNY                                  

9233214  Tubing, waste, PVC, 8/12, (per m)             CNY                                  

9237125  Upgrade App., DNeasy 96     "Take advantage of our instrumentation ａnd molecular biology expertise to install

DNeasy 96 on your BioRobot System.  The onsite protocol development visit includes

all travel ａnd labor for the visit to install the standard QIAGEN DNeasy protocol, Plus a

DNeasy  96 Tissue Kit (4-plate) SAP# 69581"    CNY                                  

9237107  Protocol Dev./Opt., on-site (3-days)     The QIAGEN BioRobot Systems Protocol Development/Optimization On-Site Visit includes all travel ａnd labor charges for a site visit up to 3 days by a QIAGEN Instrumentation Service Specialist to write and/or opimize protocols for the BioRobot System. Parts, consumable chemistries, ａnd accessories not included. Custom protocols are the sole responsibility of the customer ａnd neither warrantied nor guaranteed. CNY                                  

9232993  PCB, YZ-Connection, BR8            CNY                                  

9232971  Syringe pump Board             CNY                                  

9236410  Stacker, deepwell, TWI         CNY                                  

9236362  Fuse 2A, 250VAC, Fast Acting             CNY                                  

9236356  Sample Needle, long             CNY                                  

9236352  Tubing, Valve to Pump          CNY                                  

9236335  Sensor Distribution Board             CNY                            【結(jié)腸平滑肌細(xì)胞】   

9236157  User manual, RapidPlate        CNY                                  

9236150  Locator Plate, 96 well&Reservoir,BR RP             CNY                                  

9236148  Locator Plate, 384 well, BR Rapid Plate              CNY                                  

9230679  Rack for reagents, Trough IBG            CNY                                  

9021123  Valve Manifold, Upper, DCU         CNY                                  

9021102  Skin Panel, Lower Left Side, DCU              CNY                                  

9021049  Set, transparent panel, Qsym        CNY                                  

9021026  Set, cables, transfer module, Qsym             CNY                                  

9021012  Controller, Z Axis, VR, DCU         CNY                                  

9020993  Pipettor Assembly, DCU        CNY                                  

9020907  Cover, HEPA filter sys, SMC, QGX             CNY                                  

9020905  UV light assembly, SMC, QGX            CNY                                  

QYBS6312     人狂犬病病毒IgG抗體測定試劑盒    48T                            

QYBS6313     動物狂犬病病毒IgG抗體測定試劑盒       48T 供研究用                           

QYBS6314     破傷風(fēng)IgG抗體測定試劑盒       48T 供研究用                           

QYBS6315     出血熱IgG抗體測定試劑盒       48T 供研究用                           

QYBS6316     風(fēng)疹病毒IgG抗體測定試劑盒    48T 供研究用                           

QYBS6317     麻疹病毒IgG抗體測定試劑盒    48T 供研究用                           

QYBS6318     脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG抗體測定試劑盒       48T 供研究用                           

QYBS6319     腮腺炎病毒IgG抗體測定試劑盒       48T 供研究用                           

QYBS6320     乙型腦炎病毒IgG抗體測定試劑盒    48T 供研究用                           

QYBS6321     甲型肝炎病毒IgG抗體測定試劑盒    48T 供研究用                           

QYBS6322     百日咳IgG抗體測定試劑盒       48T 供研究用                           

QYBS6323     白喉IgG抗體測定試劑盒    48T 供研究用                           

QYBS6324     A群腦膜炎IgG抗體測定試劑盒 48T 供研究用                           

QYBS6325     C群腦膜炎IgG抗體測定試劑盒 48T 供研究用                           

QYBS6326     流感病毒IgG抗體測定試劑盒    48T 供研究用                           

QYBS6350     梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)診斷試劑    96T                             【結(jié)腸平滑肌細(xì)胞】

QYBS6351     弓形蟲IgM抗體測定試劑盒       48T 供研究用                           

QYBS6352     弓形蟲IgG抗體測定試劑盒       48T 供研究用                           

QYBS6353     風(fēng)疹病毒IgM抗體測定試劑盒   48T 供研究用                           

QYBS6354     麻疹病毒IgM抗體測定試劑盒   48T 供研究用                           

QYBS6355     巨細(xì)胞病毒IgM抗體測定試劑盒       48T 供研究用                           

QYBS6356     巨細(xì)胞病毒IgG抗體測定試劑盒       48T 供研究用                           

QYBS6357     單純皰疹病毒I+II型IgM抗體測定試劑盒      48T 供研究用                           

QYBS6358     狂犬冱疫苗效力測定試劑盒       48T 供研究用                           

QYBS6359     乙型腦炎疫苗效力測定試劑盒    48T 供研究用                           

QYBS5001     腸桿菌科細(xì)菌生化編碼鑒定管    11種X15支   用于腸桿菌科細(xì)菌鑒定用                        

QYBS5002     腸桿菌科細(xì)菌生化編碼鑒定管GYZ-15e    15種X10支 用于腸桿菌科細(xì)菌鑒定用                        

QYBS5003     腸科生化編碼管GYZ-15E   15種X10支 用于腸桿菌科細(xì)菌鑒定用                        

QYBS5004     腸桿菌科細(xì)菌生化編碼鑒定管GYZ-11e    11種X15支   用于腸桿菌科細(xì)菌鑒定用                        

QYBS5005     腸桿菌科細(xì)菌生化常規(guī)鑒定管    11種X15支   用于腸桿菌科細(xì)菌鑒定用                        

QYBS5006     阪崎腸桿菌生化鑒定試劑盒       9種×10支    按GB/T4789.40-2008配制