【心室肌細胞】下面是細胞株培養(yǎng)的具體無菌技術要點：

1. 實驗開始前，無菌室和無菌操作臺需要紫外光照射30到60分鐘完全滅菌，用70%ethanol擦拭無菌操作臺面，并且打開無菌操作臺風扇運行10分鐘之后，才可以進行實驗操作。每次操作只能處理一株細胞株，即使培養(yǎng)基完全相同也不可共用培養(yǎng)基，以避免細胞間污染或失誤混淆。實驗完成后，請將實驗物品拿出工作臺，用70%ethanol再次擦拭無菌操作臺面。操作間隔應該讓無菌操作臺運轉10分鐘到15分鐘后，才能進行下一個細胞株的操作。

2. 無菌操作工作的區(qū)域應保持清潔和寬敞，必要物品（試管架、吸管、吸取器或吸管盒等）可以暫時放置，其它實驗用品使用完畢后應移出，有利于空氣流通。實驗用品需70%ethanol擦拭后方可帶入無菌操作臺內。實驗操作過程應在臺面的中央無菌區(qū)域內完成，請勿在邊緣非無菌區(qū)域進行操作。

3. 小心取用無菌實驗物品，避免細菌污染。請勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處，也不要在打開的容器正上方進行操作。容器打開后，請用手夾住瓶蓋并輕握瓶身，傾斜大約45°角取用，盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。

4. 工作人員應當首先注意自身安全，必須穿戴齊實驗衣和實驗手套后才能進行實驗。對于病毒感染或是來自人類的細胞株應當特別小心操作，并選擇適當等級的無菌操作臺進行（至少是Class II）。操作過程中，應避免引起aerosol的產生，小心有毒性藥品，例如DMSO和TPA等，并避免針頭的傷害等等。

5. 定期檢測下列項目：

5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力

5.2. CO2培養(yǎng)箱的CO2濃度、溫度、和水盤是否有污染（水盤的水需用無菌水，每周定時更換）。

5.3. 無菌操作臺內的airflow壓力，定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜，預濾網（300小時/預濾網，3000小時/HEPA）。

6. 水槽內可添加消毒劑（Zephrin 1:750），需定期更換水槽中的水。

【心室肌細胞】齊一生物友情提醒，本產品僅供科研使用，不得用于臨床及診斷使用！

一細胞說明，具體詳細請見細胞附帶說明書

 二、客戶自備試劑

1、PBS  

2、 2、RPMI-1640 培養(yǎng)基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

3、0.25%  （W/V）胰蛋白酶（含 0.02% EDTA）

三、細胞背景

1、生長方式：貼壁

2、種屬：Homo sapiens  人

四、培養(yǎng)條件

1、培養(yǎng)基：RPMI-1640 培養(yǎng)基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

2、溫度：37.0°C

3、氣體:空氣  95%，CO2 5%

【心室肌細胞】五、培養(yǎng)方法

 收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況：

 如果細胞未長滿，用 75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，留10ml 培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞已長滿（達 80-90%）。即可進行傳代，具六、體步驟如下：

1，棄去培養(yǎng)液，用PBS洗 1-2次。

2，向瓶內加入 1.0-2.0ml 胰蛋白酶液，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，吸取胰蛋白酶，加含有 6ml  含 10%血清的培養(yǎng)液，輕輕吹打細胞。

3，加入等量的的培養(yǎng)液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)

4，傳代比例：1:2-1:3  

七、常見問題及解決方案

1、培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細胞極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。

2、細胞漂�。号囵B(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉，留 10ml 培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細胞生長至匯合度 80%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。

細胞培養(yǎng)代理品牌

細胞培養(yǎng)代理品牌

【心室肌細胞】齊一生物科技（上海）有限公司是一家專業(yè)生產和銷售各種生化試劑,細胞株、原代細胞、菌種、醫(yī)藥中間體,標準品和對照品的大型化學科技公司. 齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490；Web:www.qiyibio.com

207045    QuantiTect Whole Transcriptome Kit (100)         CNY                                  

9012744  Peristaltic Pump outlet tubing 1.25 m           CNY                                  

59930     #EpiTect MethyLight Assay Hs-PITX2 (100)       "10-fold primer TaqMan probe mix, for real-time MethyLight PCR

For TaqMan probe-based real-time quantification of methylated or unmethylated CpG sites"    CNY                                  

59655     EpiTect Control DNA, methylated (100)              CNY                                  

9012729  Syringe pump outlet tubing for Plato            CNY                                  

9012727  Syringe pump inlet tubing 3002            CNY                                  

978801    PyroMark OneStep RT-PCR Kit (50)           CNY                                  

978703    PyroMark PCR Kit (200)              CNY                                  

9012715  Troughs, 80ml (100 troughs + lids)             CNY                                  

133241    NeXtalStock Sodium malate pH 7.0 (200)           CNY                                  

133232    NeXtalStock Sodium cacodyl. pH 7.0 (100)        CNY                                  

57414     QIAamp MinElute Media Kit (50)         CNY                                  

973043    PyroMark Q96 CpG LINE-1 (192)       For quantification of global methylation level in transposable elements       CNY                                  

972812    PyroMark Gold Q96 SQA Reagents (1 x 96)       "For performing pyrosequencing reaction on the Q96 ID (1x96) 

SQA= Sequencing Analysis"  CNY                                  

972432    PyroMark Q96 SNP MTHFR (96) For detection of variants in MTHFR gene     CNY                                  

133223    NeXtalStock Sodium ac. pH 4.2 (200)         CNY                            【心室肌細胞】   

133216    NeXtalStock MOPS pH 6.5 (200)        CNY                                  

9002032  Rotor-Gene Q MDx 5plex HRM Platform            CNY                                  

9002028  Rotor-Gene Q MDx 5plex, Priority       Rotor-Gene Q 6plex (w/o PC) Priority includes the Rotor-Gene Q system, installation ａnd extended warranty. Installation covers hardware ａnd software installation of system ａnd provides user with on site introductory training. Priority package extends warranty period of the system to 2 years with shipment to Repair Center Service has response turnaround time (repair) 7-10 days. One preventive maintenance visit is included for each year of the warranty; 2 preventive maintenance visits in total. Replacement system (Loaner) provision included (provision time 2-3 days) with transportation cost coverage. The service package includes all parts, labor ａnd travel costs with installation performance ａnd service visits documented on a GMP/GLP-compliant Field Service documents. CNY                                  

9002023  Rotor-Gene Q MDx 5plex System        CNY                                  

9002021  Rotor-Gene Q MDx 5Plex no PC         CNY                                  

970042    PyroMark Q24 CpG LINE-1 (4 x 24)   For quantification of global methylation level in transposable elements       CNY                                  

133206    NeXtalStock Potassium formate (200)         CNY                                  

929523    QX Alignment Marker 15 bp/10 kb (1.5 ml)        CNY                                  

929500    QX Intensity Calibration Marker (1.0 ml)            CNY                                  

9012623  Pippeting Station, 3 microtitre plates            CNY                                  

291073    mericon Mon 810 Corn (24)         CNY                                  

9001917  PyroMark Q96 MD, Priority  PyroMark Q96 MD, Priority includes the PyroMark Q96 MD instrument, installation ａnd extended warranty. Installation covers hardware ａnd software installation of system ａnd provides user with introductory training. Priority package extends warranty period of the system to 2 years. One preventive maintenance visit is included for each year of the warranty; 2 preventive maintenance visits in total. Service package includes all parts, labor ａnd travel costs with a service response time of 48 hours (2 working days). Performance of the installation ａnd service visits are documented on a GMP/GLP-compliant Field Service documents.       CNY                                  

133113    NeXtalStock Sodium Iodide (200)        CNY                                  

967152    RNeasy 96 BioRobot 8000 Kit (12)       For 12 x 96 total ａnd cytoplasmic RNA preps on the BioRobot 8000: 12 RNeasy 96 Plates, Elution Microtubes CL (1.2 ml), Caps, Square-Well Blocks, RNase-free Reagents ａnd Buffers     CNY                                  

9018464  Printer, EZ1a          CNY                                  

9018543  Anti-corrosion oil (rotor), QIAC           CNY                            【心室肌細胞】   

9018466  Transport Box, EZ1 Advanced             CNY                                  

QYD745  己烯雌酚快速檢測試劑盒    96T/盒    0.02 30min-30min-15min      尿樣/組織/飼料           

QYD746  地塞米松快速檢測試劑盒    96T/盒    0.1ppb    30min-30min-15min      禽類組織、飼料          

QYD747  三聚氰胺快速檢測試劑盒    96T/盒    1ppb       30min-15min  乳制品、動物組織、飼料、水產             

QYD748  呋喃西林快速檢測卡    50T/盒    1ppb       5-8min    組織、水產、蜂蜜             

QYD749  呋喃妥因快速檢測卡    50T/盒    1ppb       5-8min    組織、水產、蜂蜜              【心室肌細胞】

QYD750  呋喃唑酮快速檢測卡    50T/盒    0.5ppb    5-8min    組織、水產、蜂蜜             

QYD751  呋喃它酮快速檢測卡    50T/盒    0.5ppb    5-8min    組織、水產、蜂蜜             

QYD752  氯霉素快速檢測試劑盒       96T/盒    0.05ppb   30min-30min-15min      組織、水產、蜂蜜       飼料獸藥監(jiān)察所（畜牧產品安全檢測中心）、農產品質量安全檢測中心、水產研究所檢測中心、水產市場質量安全檢測中心、出入境檢驗檢疫局等   

QYD753  恩諾沙星快速檢測試劑盒    96T/盒    0.1ppb    45min-15min  動物、水產組織、蜂蜜             

QYD754  環(huán)丙沙星快速檢測試劑盒    96T/盒    0.1ppb    45min-15min  動物、水產組織、蜂蜜             

QYD755  喹諾酮類（QNS）快速檢測試劑盒    96T/盒    0.1ppb    45min-15min  動物、水產組織、蜂蜜             

QYD756  磺胺多殘留快速檢測試劑盒       96T/盒    0.5ppb    45min-15min  動物、水產組織、蜂蜜             

QYD757  磺胺十五合一快速檢測試劑盒    96T/盒    0.5ppb    45min-15min  動物、水產組織、蜂蜜             

QYD758  磺胺七合一快速檢測試劑盒       96T/盒    0.5ppb    45min-15min  動物、水產組織、蜂蜜             

QYD759  磺胺三合一檢測試劑盒       96T/盒    0.2ppb    45min-15min  動物、水產組織、蜂蜜             

QYD760  四環(huán)素快速檢測試劑盒       96T/盒    0.05ppb   30min-30min-15min      禽類、水產組織、牛奶             

QYD761  鏈霉素快速檢測試劑盒       96T/盒    0.1ppb    30min-30min-15min      肌肉組織、蜂蜜          

QYD762  喹諾酮快速檢測卡       50T/盒    2ppb       5-8min    組織、水產、蜂蜜             

QYD763  磺胺類快速檢測卡       50T/盒    20ppb     5-8min    組織、蜂蜜、牛奶、尿液、血清             

QYD764  氯霉素檢測卡       50T/盒    0.1ppb    5-8min    蜂蜜、水產、組織             

QYD765  黃曲霉B1快速檢測試劑盒  96T/盒    0.02ppb/0.01ppb    30min-15min  谷物、飼料、牛奶       飼料獸藥監(jiān)察所（畜牧產品安全檢測中心）、農產品質量安全檢測中心 【心室肌細胞】

QYD766  玉米赤霉烯酮快速檢測試劑盒    96T/盒    0.3ppb    30min-15min  谷物、飼料、牛奶             

QYD767  黃曲霉M1快速檢測試劑盒 96T/盒    0.5ppb    30min-15min  谷物、飼料、牛奶             

QYD768  黃曲霉總量快速檢測試劑盒       96T/盒    0.1ppb/0.02ppb      30min-15min  谷物、飼料          

QYD769  伏馬毒素快速檢測試劑盒    96T/盒    0.5ppb    30min-15min  谷物、飼料          

QYD770  赭曲霉毒素A檢測試劑盒   96T/盒    0.1   30min-15min  糧食作物（玉米、大米、豆類、花生、麥類等）、、飼料等        

QYD771  伏馬菌素B1檢測試劑盒     96T/盒    10    30min-15min  糧食作物（玉米、大米、豆類、花生、麥類等）、飼料等         

QYD772  伏馬菌素B1檢測試劑盒     96T/盒    100  30min-15min  牛奶、奶粉、煉乳等          

QYD773  嘔吐毒素快速檢測試劑盒    96T/盒    3ppb       30min-30min-15min      谷物、飼料          

QYD774  黃曲霉B1快速檢測卡  50T/盒    1ppb/2ppb/3ppb     5-8min    谷物、飼料、牛奶             

QYD775  玉米赤霉烯酮快速檢測卡    50T/盒    10ppb/30ppb   5-8min    谷物、飼料、牛奶