【膠質(zhì)瘤組織源性原代細(xì)胞】下面是細(xì)胞株培養(yǎng)的具體無菌技術(shù)要點(diǎn)：

1. 實(shí)驗(yàn)開始前，無菌室和無菌操作臺(tái)需要紫外光照射30到60分鐘完全滅菌，用70%ethanol擦拭無菌操作臺(tái)面，并且打開無菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)行10分鐘之后，才可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只能處理一株細(xì)胞株，即使培養(yǎng)基完全相同也不可共用培養(yǎng)基，以避免細(xì)胞間污染或失誤混淆。實(shí)驗(yàn)完成后，請將實(shí)驗(yàn)物品拿出工作臺(tái)，用70%ethanol再次擦拭無菌操作臺(tái)面。操作間隔應(yīng)該讓無菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘到15分鐘后，才能進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株的操作。

2. 無菌操作工作的區(qū)域應(yīng)保持清潔和寬敞，必要物品（試管架、吸管、吸取器或吸管盒等）可以暫時(shí)放置，其它實(shí)驗(yàn)用品使用完畢后應(yīng)移出，有利于空氣流通。實(shí)驗(yàn)用品需70%ethanol擦拭后方可帶入無菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作過程應(yīng)在臺(tái)面的中央無菌區(qū)域內(nèi)完成，請勿在邊緣非無菌區(qū)域進(jìn)行操作。

3. 小心取用無菌實(shí)驗(yàn)物品，避免細(xì)菌污染。請勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處，也不要在打開的容器正上方進(jìn)行操作。容器打開后，請用手夾住瓶蓋并輕握瓶身，傾斜大約45°角取用，盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。

4. 工作人員應(yīng)當(dāng)首先注意自身安全，必須穿戴齊實(shí)驗(yàn)衣和實(shí)驗(yàn)手套后才能進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對于病毒感染或是來自人類的細(xì)胞株應(yīng)當(dāng)特別小心操作，并選擇適當(dāng)?shù)燃壍臒o菌操作臺(tái)進(jìn)行（至少是Class II）。操作過程中，應(yīng)避免引起aerosol的產(chǎn)生，小心有毒性藥品，例如DMSO和TPA等，并避免針頭的傷害等等。

5. 定期檢測下列項(xiàng)目：

5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力

5.2. CO2培養(yǎng)箱的CO2濃度、溫度、和水盤是否有污染（水盤的水需用無菌水，每周定時(shí)更換）。

5.3. 無菌操作臺(tái)內(nèi)的airflow壓力，定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜，預(yù)濾網(wǎng)（300小時(shí)/預(yù)濾網(wǎng)，3000小時(shí)/HEPA）。

6. 水槽內(nèi)可添加消毒劑（Zephrin 1:750），需定期更換水槽中的水。

【膠質(zhì)瘤組織源性原代細(xì)胞】齊一生物友情提醒，本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床及診斷使用！

一細(xì)胞說明，具體詳細(xì)請見細(xì)胞附帶說明書

 二、客戶自備試劑

1、PBS  

2、 2、RPMI-1640 培養(yǎng)基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

3、0.25%  （W/V）胰蛋白酶（含 0.02% EDTA）

三、細(xì)胞背景

1、生長方式：貼壁

2、種屬：Homo sapiens  人

四、培養(yǎng)條件

1、培養(yǎng)基：RPMI-1640 培養(yǎng)基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

2、溫度：37.0°C

3、氣體:空氣  95%，CO2 5%

【膠質(zhì)瘤組織源性原代細(xì)胞】五、培養(yǎng)方法

 收到細(xì)胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個(gè)細(xì)胞生長情況：

 如果細(xì)胞未長滿，用 75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，留10ml 培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞已長滿（達(dá) 80-90%）。即可進(jìn)行傳代，具六、體步驟如下：

1，棄去培養(yǎng)液，用PBS洗 1-2次。

2，向瓶內(nèi)加入 1.0-2.0ml 胰蛋白酶液，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺(tái)，吸取胰蛋白酶，加含有 6ml  含 10%血清的培養(yǎng)液，輕輕吹打細(xì)胞。

3，加入等量的的培養(yǎng)液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)

4，傳代比例：1:2-1:3  

七、常見問題及解決方案

1、培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細(xì)胞極大可能會(huì)污染，所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決。

2、細(xì)胞漂�。号囵B(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底，表明細(xì)胞活力正常，剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉，留 10ml 培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細(xì)胞生長至匯合度 80%，進(jìn)行消化傳代；如細(xì)胞還是不貼壁，將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo)，直到問題解決。

細(xì)胞培養(yǎng)代理品牌

細(xì)胞培養(yǎng)代理品牌

【膠質(zhì)瘤組織源性原代細(xì)胞】齊一生物科技（上海）有限公司是一家專業(yè)生產(chǎn)和銷售各種生化試劑,細(xì)胞株、原代細(xì)胞、菌種、醫(yī)藥中間體,標(biāo)準(zhǔn)品和對照品的大型化學(xué)科技公司. 齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490；Web:www.qiyibio.com

239125    GelPilot Wide Range Ladder (100) Ready-to-use DNA marker, 600µl (100lanes), 7 fragments: 200 – 4500 bp CNY                                  

133012    NeXtalStock Ammonium bromide (200)              CNY                                  

133010    NeXtalStock ADA untit. (200)              CNY                                  

133005    NeXtalStock MES untit. (200)             CNY                                  

9011957  SamTrak Rack for twelve 16mm tubes        CNY                                  

9011950  Modul, Plate stacker (dark), 10 plates          CNY                                  

971510    therascreen® GIST RapidScreen Pyro Kit           CNY                                  

36915     96-Well Magnet      Magnet for separating magnetic beads in wells of 96-well plates, 2 x 96-Well Microplates FB  CNY                                  

950097    X-tractor Gene Consumables The Xtractor Gene Consumables provides fully automated viral nucleic acid purification on the QIAxtractor when used with the Reagent Pack VX (#950207), ａnd gDNA purification when used with the Reagent Pack DX (#950107). The combination of reagents ａnd plasticware enables purification of viral nucleic acids from liquid samples, with a throughput of 8-96 samples per run.     CNY                            【膠質(zhì)瘤組織源性原代細(xì)胞】   

800405    Library, Small Insert, add＇tl 96 clones          CNY                                  

800385    Sequence Comparison           CNY                                  

9016529  Transportation box, BioRobot M48              CNY                                  

9016525  Transportation box , BR8000/MDx              CNY                                  

9016523  Round Carrier Set (4), 10 x 15 ml Falcon            CNY                                  

9016517  Plate Holder Set (2)              CNY                                  

9016300  Board, X-Main, Immucor, P3141 SI            CNY                                  

9016203  Fitting, PCV Tubing, M6x1, 4.75mm (10)           CNY                                  

9016148  #App. Package, M48, Genomic Research            CNY                                  

9016117  Tip-Tray Holder, 10 µl tips    Holder for accommodating a tip tray containing 96 disposable tips of 10 µl capacity CNY                                  

9011914  Manual, user, BR9604, basic, US         CNY                                  

9011874  Calibration pyramide, BR9600              CNY                                  

9019146  Cable kit - Power, PyroQ96MD           CNY                                  

9019139  Cable kit - Power, PyroQ96ID             CNY                                  

9019132  Gasket - Cartridge, PyroQ96ID            CNY                                  

9019022  Worktable cover, EZ1xl         CNY                            【膠質(zhì)瘤組織源性原代細(xì)胞】   

9018999  Cover, front, bottom, EZ1xl          CNY                                  

9018958  Master Mix Block, 1x5ml, 4x1.5ml Tubes           CNY                                  

9018939  Adapter, LightCycler 96 Capillary Rack        CNY                                  

9022709  Plate, Lumicheck Actuator, DML3000         CNY                                  

9015786  Teaching Tool Samtrack        CNY                                  

9015538  Worktable, complete             CNY                                  

9015532  Cover, back, type B              CNY                                  

9015526  Board, motor driver              CNY                                  

QYD709  孔雀石綠ELISA定量檢測試劑盒       用于檢測飼料、水產(chǎn)品等，適用于大型水產(chǎn)公司，農(nóng)產(chǎn)品檢測中心等                                  

QYD710  金霉素ELISA定量檢測試劑盒   用于檢測飼料、蜂蜜、牛奶、水產(chǎn)品、各種動(dòng)物肉組織，包括雞鴨鵝等，適用于屠宰場，動(dòng)物防疫站/監(jiān)督所，農(nóng)產(chǎn)品檢測中心，大型肉食品加工企業(yè)等                              

QYD711  泰樂菌素、替米考星ELISA定量檢測試劑盒   動(dòng)物（豬雞）組織（肌肉、肝臟）                               

QYD712  沙門、志賀氏菌核酸檢測試劑盒       食品安全PCR檢測                                 

QYD713  四環(huán)素類藥物（四合一）ELISA定量檢測試劑盒    動(dòng)物組織、飼料、尿液、雞蛋、牛奶、蜂蜜                               

QYD714  萊克多巴胺（RAC）快速檢測卡       用于檢測飼料、蜂蜜、牛奶、水產(chǎn)品、各種動(dòng)物肉組織，包括雞鴨鵝等，適用于屠宰場，動(dòng)物防疫站/監(jiān)督所，農(nóng)產(chǎn)品檢測中心，大型肉食品加工企業(yè)等                              

QYD715  克倫特羅（CL）快速檢測卡      用于檢測飼料、蜂蜜、牛奶、水產(chǎn)品、各種動(dòng)物肉組織，包括雞鴨鵝等，適用于屠宰場，動(dòng)物防疫站/監(jiān)督所，農(nóng)產(chǎn)品檢測中心，大型肉食品加工企業(yè)等                              

QYD716  沙丁胺醇快速檢測卡    用于檢測飼料、蜂蜜、牛奶、水產(chǎn)品、各種動(dòng)物肉組織，包括雞鴨鵝等，適用于屠宰場，動(dòng)物防疫站/監(jiān)督所，農(nóng)產(chǎn)品檢測中心，大型肉食品加工企業(yè)等                              

QYD717  氯霉素（CAP）快速檢測卡 用于檢測飼料、蜂蜜、牛奶、水產(chǎn)品、各種動(dòng)物肉組織，包括雞鴨鵝等，適用于屠宰場，動(dòng)物防疫站/監(jiān)督所，農(nóng)產(chǎn)品檢測中心，大型肉食品加工企業(yè)等                              

QYD718  喹諾酮類（QNS）快速檢測卡    用于檢測飼料、蜂蜜、牛奶、水產(chǎn)品、各種動(dòng)物肉組織，包括雞鴨鵝等，適用于屠宰場，動(dòng)物防疫站/監(jiān)督所，農(nóng)產(chǎn)品檢測中心，大型肉食品加工企業(yè)等                              

QYD719  農(nóng)藥殘留快速檢測卡    用于檢蔬菜、水果等，適用于大型農(nóng)貿(mào)市場、農(nóng)業(yè)局、農(nóng)產(chǎn)品檢測中心等                                  

QYD720  青霉素殘留快速檢測卡       牛奶、蜂蜜等                                   【膠質(zhì)瘤組織源性原代細(xì)胞】

QYD721  四環(huán)素殘留快速檢測卡       牛奶、蜂蜜等                                  

QYD722  鏈霉素殘留快速檢測卡       牛奶、蜂蜜等                                  

QYD723  慶大霉素殘留快速檢測卡    牛奶、蜂蜜等                                  

QYD724  新霉素快速檢測卡       牛奶、蜂蜜等                                  

QYD725  紅霉素快速檢測卡       牛奶、蜂蜜等                                  

QYD726  泰樂菌素快速檢測卡    牛奶、蜂蜜等                                  

QYD727  頭孢菌素快速檢測卡    牛奶、蜂蜜等                                  

QYD728  孔雀石綠快速檢測卡    用于檢測飼料、水產(chǎn)品等，適用于大型水產(chǎn)公司，農(nóng)產(chǎn)品檢測中心等                                  

QYD729  β-內(nèi)酰胺類快速檢測卡      牛奶、蜂蜜等                                  

QYD730  黃曲霉B1檢測卡 飼料、豆類、麥類、谷類；醬油                                  

QP1011   豬瘟抗體金標(biāo)快速檢測卡  CSFV Antibody Rapid test kit 全血、血清    50T/盒                        

QP1012   豬口蹄疫抗體金標(biāo)快速檢測卡 FMDV Antibody Rapid test kit 全血、血清    50T/盒                        

QP1013   豬偽狂犬病抗體金標(biāo)快速檢測卡 PRV Antibody Rapid test kit 全血、血清    50T/盒                        

QP1014   豬藍(lán)耳病抗體金標(biāo)檢快速測卡 PRRSV Antibody Rapid test kit       全血、血清    50T/盒                        

QP1015   豬園環(huán)病毒病抗體金標(biāo)快速檢測卡 PCV-2 Antibody Rapid test kit  全血、血清    50T/盒                        

QP1016   豬瘟病毒抗原金標(biāo)檢快速測卡 CSFV Antigen Rapid test kit    全血、血清    50T/盒                         【膠質(zhì)瘤組織源性原代細(xì)胞】

QP1017   犬瘟熱抗原金標(biāo)檢測快速卡 CDV Antigen Rapid test kit  分泌物、血清       50T/盒                        

QP1018   犬細(xì)小病毒抗原金標(biāo)快速檢測卡 CPV Antigen Rapid test kit   糞便       50T/盒                        

QP1019   禽流感病毒抗原金標(biāo)快速檢測卡AIV Antigen Rapid test kit     眼、氣管、肛門分泌物       50T/盒                        

QYD707  呋喃妥因殘留標(biāo)示物ELISA定量檢測試劑盒 用于檢測飼料、水產(chǎn)品等，適用于大型水產(chǎn)公司，農(nóng)產(chǎn)品檢測中心等                 

QYD708  呋喃它酮?dú)埩魳?biāo)示物ELISA定量檢測試劑盒 用于檢測飼料、水產(chǎn)品等，適用于大型水產(chǎn)公司，農(nóng)產(chǎn)品檢測中心等                 

QYD672  二聯(lián)快速檢測試紙條    20份/盒  13.5元/份  30元/份                         【宮頸癌組織源性原代細(xì)胞】

QYD673  牛結(jié)核病抗體檢測試劑盒    Elisa 2*96孔                       

QYD674  荷蘭賽迪口蹄疫0型2板試劑盒 Elisa 2*96孔                       

QYD675  口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體檢測試劑盒    Elisa 5*96孔                       

QYD676  豬瘟抗原2板檢測試劑盒    Elisa 2*96孔                       

QYD677  偽狂犬病毒gE2.0抗體診斷試劑盒    Elisa 5*96孔                       

QYD201  雞傳染性喉氣管炎抗體檢測試劑盒    96孔/盒