【氣管上皮細(xì)胞】下面是細(xì)胞株培養(yǎng)的具體無(wú)菌技術(shù)要點(diǎn)：

1. 實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，無(wú)菌室和無(wú)菌操作臺(tái)需要紫外光照射30到60分鐘完全滅菌，用70%ethanol擦拭無(wú)菌操作臺(tái)面，并且打開(kāi)無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)行10分鐘之后，才可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只能處理一株細(xì)胞株，即使培養(yǎng)基完全相同也不可共用培養(yǎng)基，以避免細(xì)胞間污染或失誤混淆。實(shí)驗(yàn)完成后，請(qǐng)將實(shí)驗(yàn)物品拿出工作臺(tái)，用70%ethanol再次擦拭無(wú)菌操作臺(tái)面。操作間隔應(yīng)該讓無(wú)菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘到15分鐘后，才能進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株的操作。

2. 無(wú)菌操作工作的區(qū)域應(yīng)保持清潔和寬敞，必要物品（試管架、吸管、吸取器或吸管盒等）可以暫時(shí)放置，其它實(shí)驗(yàn)用品使用完畢后應(yīng)移出，有利于空氣流通。實(shí)驗(yàn)用品需70%ethanol擦拭后方可帶入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程應(yīng)在臺(tái)面的中央無(wú)菌區(qū)域內(nèi)完成，請(qǐng)勿在邊緣非無(wú)菌區(qū)域進(jìn)行操作。

3. 小心取用無(wú)菌實(shí)驗(yàn)物品，避免細(xì)菌污染。請(qǐng)勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處，也不要在打開(kāi)的容器正上方進(jìn)行操作。容器打開(kāi)后，請(qǐng)用手夾住瓶蓋并輕握瓶身，傾斜大約45°角取用，盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。

4. 工作人員應(yīng)當(dāng)首先注意自身安全，必須穿戴齊實(shí)驗(yàn)衣和實(shí)驗(yàn)手套后才能進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對(duì)于病毒感染或是來(lái)自人類(lèi)的細(xì)胞株應(yīng)當(dāng)特別小心操作，并選擇適當(dāng)?shù)燃?jí)的無(wú)菌操作臺(tái)進(jìn)行（至少是Class II）。操作過(guò)程中，應(yīng)避免引起aerosol的產(chǎn)生，小心有毒性藥品，例如DMSO和TPA等，并避免針頭的傷害等等。

5. 定期檢測(cè)下列項(xiàng)目：

5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力

5.2. CO2培養(yǎng)箱的CO2濃度、溫度、和水盤(pán)是否有污染（水盤(pán)的水需用無(wú)菌水，每周定時(shí)更換）。

5.3. 無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)的airflow壓力，定期更換紫外線燈管和HEPA過(guò)濾膜，預(yù)濾網(wǎng)（300小時(shí)/預(yù)濾網(wǎng)，3000小時(shí)/HEPA）。

6. 水槽內(nèi)可添加消毒劑（Zephrin 1:750），需定期更換水槽中的水。

【氣管上皮細(xì)胞】齊一生物友情提醒，本產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床及診斷使用！

一細(xì)胞說(shuō)明，具體詳細(xì)請(qǐng)見(jiàn)細(xì)胞附帶說(shuō)明書(shū)

 二、客戶自備試劑

1、PBS  

2、 2、RPMI-1640 培養(yǎng)基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

3、0.25%  （W/V）胰蛋白酶（含 0.02% EDTA）

三、細(xì)胞背景

1、生長(zhǎng)方式：貼壁

2、種屬：Homo sapiens  人

四、培養(yǎng)條件

1、培養(yǎng)基：RPMI-1640 培養(yǎng)基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

2、溫度：37.0°C

3、氣體:空氣  95%，CO2 5%

【氣管上皮細(xì)胞】五、培養(yǎng)方法

 收到細(xì)胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況：

 如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿，用 75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，留10ml 培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿（達(dá) 80-90%）。即可進(jìn)行傳代，具六、體步驟如下：

1，棄去培養(yǎng)液，用PBS洗 1-2次。

2，向瓶?jī)?nèi)加入 1.0-2.0ml 胰蛋白酶液，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺(tái)，吸取胰蛋白酶，加含有 6ml  含 10%血清的培養(yǎng)液，輕輕吹打細(xì)胞。

3，加入等量的的培養(yǎng)液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)

4，傳代比例：1:2-1:3  

七、常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案

1、培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細(xì)胞極大可能會(huì)污染，所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決。

2、細(xì)胞漂浮：培養(yǎng)瓶不開(kāi)封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底，表明細(xì)胞活力正常，剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉，留 10ml 培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合度 80%，進(jìn)行消化傳代；如細(xì)胞還是不貼壁，將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo)，直到問(wèn)題解決。

細(xì)胞培養(yǎng)代理品牌

細(xì)胞培養(yǎng)代理品牌

【氣管上皮細(xì)胞】齊一生物科技（上海）有限公司是一家專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)和銷(xiāo)售各種生化試劑,細(xì)胞株、原代細(xì)胞、菌種、醫(yī)藥中間體,標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品的大型化學(xué)科技公司. 齊一生物銷(xiāo)售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490；Web:www.qiyibio.com

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9240372  QIASymphony SP, Installation      The Installation, QIAsymphony SP facilitates the quick implementation of the QIAsymphony into the lab routine by minimizing the instrument start-up phase. It covers the hardware ａnd software installation of the QIAsymphony instrument ａnd provides the user with an introductory training. The installation includes or labor ａnd travel costs. The performance of the installation process is documented on a GMP/GLP-compliant Field Service document.    CNY                                  

9239960  Upgrade App., BR MDx DSP Tube-Ring PCR             CNY                                  

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QY-x1380       小鼠白血病克隆細(xì)胞系L6565                                      

QY-x1381       小鼠白血病細(xì)胞G-CSF依賴性NFS-60                                       

QY-x1382       小鼠肥大細(xì)胞癌細(xì)胞P815                                     

QY-x1383       小鼠肺癌細(xì)胞Lewis                                       

QY-x1384       小鼠肺癌細(xì)胞LLC                                         

QY-x1385       小鼠胃癌細(xì)胞MFC                                        

QY-x1386       小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞EAC                                     

QY-x1387       小鼠腹水瘤細(xì)胞SAC-II B2                                    

QY-x1388       小鼠腹水瘤細(xì)胞SAC-II C3                                    

QY-x1389       小鼠乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞MA-891                                    

QY-x1390       小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞C127                                        

QY-x1391       大鼠乳腺癌細(xì)胞SHZ-88                                        

QY-x1392       小鼠骨髓瘤細(xì)胞SP2/0                                   

QY-x1393       鼠骨髓瘤細(xì)胞SP2/0-Ag14                                     

QY-x1394       小鼠骨髓瘤細(xì)胞P3-X63-Ag8.653                                          【氣管上皮細(xì)胞】

QY-x1395       小鼠骨髓瘤細(xì)胞P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]                                       

QY-x1396       小鼠骨髓瘤細(xì)胞FO                                       

QY-x1397       小鼠淋巴瘤細(xì)胞Yac-1                                    

QY-x1398       小鼠淋巴瘤細(xì)胞EL4                                      

QY-x1399       小鼠淋巴瘤細(xì)胞EL4.IL-2                                      

QY-x1400       小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16F1                                      

QY-x1401       鼠黑色素瘤細(xì)胞系B16-Fo                                     

QY-x1402       小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞B16F10                                        

QY-x1403       小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16BL6                                    

QY-x1404       小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16                                   

QY-x1405       小鼠SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細(xì)胞SRSV/3T3                                       

QY-x1406       小鼠胚胎成纖維細(xì)胞BALB/3T3 clone A31                                   

QY-x1407       小鼠肝癌細(xì)胞H22                                   

QY-x1408       小鼠肝癌細(xì)胞Hepa 1-6                                   

QY-x1409       大鼠肝癌細(xì)胞CBRH-7919                                     

QY-x1410       大鼠肝癌細(xì)胞RH-35                                       【氣管上皮細(xì)胞】