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SK-N-SH人神經母細胞瘤
點擊次數：9發(fā)布時間：2016/6/22 21:41:53
更新日期：2016/8/27 8:32:03
所 在 地：中國大陸
產品型號：
優(yōu)質供應
詳細內容
【SK-N-SH人神經母細胞瘤】下面是細胞株培養(yǎng)的具體無菌技術要點：
1. 實驗開始前，無菌室和無菌操作臺需要紫外光照射30到60分鐘完全滅菌，用70%ethanol擦拭無菌操作臺面，并且打開無菌操作臺風扇運行10分鐘之后，才可以進行實驗操作。每次操作只能處理一株細胞株，即使培養(yǎng)基完全相同也不可共用培養(yǎng)基，以避免細胞間污染或失誤混淆。實驗完成后，請將實驗物品拿出工作臺，用70%ethanol再次擦拭無菌操作臺面。操作間隔應該讓無菌操作臺運轉10分鐘到15分鐘后，才能進行下一個細胞株的操作。
2. 無菌操作工作的區(qū)域應保持清潔和寬敞，必要物品（試管架、吸管、吸取器或吸管盒等）可以暫時放置，其它實驗用品使用完畢后應移出，有利于空氣流通。實驗用品需70%ethanol擦拭后方可帶入無菌操作臺內。實驗操作過程應在臺面的中央無菌區(qū)域內完成，請勿在邊緣非無菌區(qū)域進行操作。
3. 小心取用無菌實驗物品，避免細菌污染。請勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處，也不要在打開的容器正上方進行操作。容器打開后，請用手夾住瓶蓋并輕握瓶身，傾斜大約45°角取用，盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。
4. 工作人員應當首先注意自身安全，必須穿戴齊實驗衣和實驗手套后才能進行實驗。對于病毒感染或是來自人類的細胞株應當特別小心操作，并選擇適當等級的無菌操作臺進行（至少是Class II）。操作過程中，應避免引起aerosol的產生，小心有毒性藥品，例如DMSO和TPA等，并避免針頭的傷害等等。
5. 定期檢測下列項目：
5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力
5.2. CO2培養(yǎng)箱的CO2濃度、溫度、和水盤是否有污染（水盤的水需用無菌水，每周定時更換）。
5.3. 無菌操作臺內的airflow壓力，定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜，預濾網（300小時/預濾網，3000小時/HEPA）。
6. 水槽內可添加消毒劑（Zephrin 1:750），需定期更換水槽中的水。
【SK-N-SH人神經母細胞瘤】齊一生物友情提醒，本產品僅供科研使用，不得用于臨床及診斷使用！
一細胞說明，具體詳細請見細胞附帶說明書
二、客戶自備試劑
1、PBS
2、 2、RPMI-1640 培養(yǎng)基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗
3、0.25% （W/V）胰蛋白酶（含 0.02% EDTA）
三、細胞背景
1、生長方式：貼壁
2、種屬：Homo sapiens 人
四、培養(yǎng)條件
1、培養(yǎng)基：RPMI-1640 培養(yǎng)基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗
2、溫度：37.0°C
3、氣體:空氣 95%，CO2 5%
【SK-N-SH人神經母細胞瘤】五、培養(yǎng)方法
收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況：
如果細胞未長滿，用 75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，留10ml 培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞已長滿（達 80-90%）。即可進行傳代，具六、體步驟如下：
1，棄去培養(yǎng)液，用PBS洗 1-2次。
2，向瓶內加入 1.0-2.0ml 胰蛋白酶液，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，吸取胰蛋白酶，加含有 6ml 含 10%血清的培養(yǎng)液，輕輕吹打細胞。
3，加入等量的的培養(yǎng)液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)
4，傳代比例：1:2-1:3
七、常見問題及解決方案
1、培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細胞極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。
2、細胞漂�。号囵B(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉，留 10ml 培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細胞生長至匯合度 80%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。
細胞培養(yǎng)代理品牌
| | BD 產品涉及分子生物學、細胞生物學、免疫學和蛋白質組學等諸多領域，旗下?lián)碛?span>Clontech 、Discovery labware 、Pharmingen 、Falcon 等質品牌，值得稱贊的是每一個品牌在其所在的領域都是其中的佼佼者。 |
細胞培養(yǎng)代理品牌
| | GIBCO 作為細胞培養(yǎng)的金字招牌，是在此領域的領導者，現在是Invitrogen的一部分。Gibco可以提供*為廣泛的品種以滿足用戶不同的需求，每一種產品都通過*為嚴格的品質管理。同時，Gibco也可按客戶的要求對培養(yǎng)基的配方進行改動，或完全按客戶的配方進行生產。 |
【SK-N-SH人神經母細胞瘤】齊一生物科技（上海）有限公司是一家專業(yè)生產和銷售各種生化試劑,細胞株、原代細胞、菌種、醫(yī)藥中間體,標準品和對照品的大型化學科技公司. 齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490；Web:www.qiyibio.com
9020906HEPA filter system, SMC, QGXCNY
9020704Lid frame with hinge C1xCNY
9020638Baseboard, side, Cabinet QsymCNY
9020634Panel, left, Cabinet QsymCNY
9020626Holder, BC scanner, Cabinet QsymCNY
9020333Fuse - Thermal (5), RGQIICNY
9017687AUTOPURE Pro K PumpCNY
9017602Pump, MultiFlow Disp, BR8 RDCNY
9017503Bearing, teflon, white (5), TRCNY
9017257BR 8000, Protein Purification PackageCNY
9020237Pulley, Z-idler assembly, Cx2CNY
9020227Belt, Y-axis assembly, Cx2CNY
9020203PCB, lrge breakout, 8 core to rev8, Cx2CNY
9020195Clamp, worktable (marked "II"), CX1CNY
9020190Tubing Weight, RCSCNY
9020183PCB, LED, Upgrade, RGQCNY
9020163Vacuum Pump (220-240 V), PyroQ24VWCNY
9020144Felt shim, Receiver, QXCNY
9020089Fuse Insert, 15 A, TLyser 2CNY
9239522O Ring, #010, Nitrile, 70D (Set of 10)CNY
9239516Fuse&Holder,1Amp,Fblo,PicoSmd(10)CNY
9239508EX CBA, MC DSP, w/USBCNY
9239505Fitting,Adap1/8Ba-Mal1/4-28Flat(10)CNY
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