工作原理：

（1）DNA轉(zhuǎn)染機制：

用于脂質(zhì)轉(zhuǎn)染的脂基試劑通常由合成的陽離子脂質(zhì)組成，其通常與輔助脂質(zhì)如DOPE（L-α-二油酰磷脂酰乙醇胺）或膽固醇混合。這些脂質(zhì)混合物在生理pH值下以整體帶正電荷的脂質(zhì)體或膠束形式組裝，并能夠通過靜電相互作用與帶負電荷的核酸形成復合物（脂質(zhì)復合物）。脂基轉(zhuǎn)染試劑與核酸的結合使核酸受到緊密壓縮和保護，這些陽離子復合物主要通過內(nèi)吞作用內(nèi)化。一旦進入細胞，有兩種導致核酸釋放到細胞質(zhì)中的機制。一種依賴于多陽離子殘基的核內(nèi)體緩沖能力（稱為“質(zhì)子海綿效應”）。另一種是細胞帶負電荷的脂質(zhì)中和轉(zhuǎn)染試劑的陽離子殘基導致內(nèi)體膜不穩(wěn)定的能力。后，導致核攝取DNA（siRNA不需要）隨后基因表達的細胞和分子事件仍然是高度推測性的。然而，細胞分裂對轉(zhuǎn)染效率的重要性有利于有絲分裂過程中核膜破壞促進DNA核攝取的假設。盡管如此，通過脂質(zhì)轉(zhuǎn)染也可以實現(xiàn)原代細胞（非分裂）和體內(nèi)的轉(zhuǎn)染，這表明DNA可以進入發(fā)生基因表達的細胞核。

（2）Tee-技術（Tee-Technology）：

陽離子脂質(zhì)體（脂質(zhì)復合物）和聚合物（多聚體）是常用的非病毒基因遞送系統(tǒng)。 Tee-Technology（觸發(fā)內(nèi)體逃逸）結合并利用這兩種實體的特性來實現(xiàn)其高效的核酸傳遞到細胞中。實際上，這種新一代的脂多胺含有親脂性部分，如脂質(zhì)，和帶電荷的多胺部分，如陽離子聚合物。這些部分協(xié)同作用以確保核酸的緊密壓縮和保護，以及核內(nèi)體膜的非常有效的不穩(wěn)定，這允許大量核酸在細胞質(zhì)中釋放和DNA的核攝取。特別關注完全可生物降解實體的合成。通過這種方式，轉(zhuǎn)染試劑不會干擾細胞機制，在每次實驗中都能保持高細胞活力，并避免任何潛在的副作用。

Tee-技術的主要優(yōu)勢在于：

納米顆粒中DNA的壓縮被細胞有效地內(nèi)化；

核酸對核酸酶降解的保護作用；

有效的膜不穩(wěn)定性和DNA遞送；

即使在核酸含量較低的情況下也具有高效性；

生物降解性。

艾美捷脂質(zhì)轉(zhuǎn)染試劑#DG80500、#DF40500、#LL70500等的應用：

轉(zhuǎn)染效率與高基因表達水平或高基因沉默和小化細胞毒性相結合取決于多個關鍵參數(shù)。這些因素包括細胞類型、質(zhì)粒DNA特征（大小、啟動子、報告基因）和純度、siRNA序列和純度、細胞培養(yǎng)條件（含或不含血清的培養(yǎng)基、細胞數(shù)量、無污染......）、核酸和試劑的量、轉(zhuǎn)基因檢測等等。 因此，轉(zhuǎn)染試劑需要根據(jù)待遞送的核酸（DNA、siRNA、mRNA、ODN、shRNA等）和使用的細胞類型進行門設計，以達到佳效率。在此背景下，OZ Biosciences開發(fā)了幾種出色的轉(zhuǎn)染試劑：

DreamFect Gold：適用于所有核酸，獲得卓越的轉(zhuǎn)基因表達水平

DreamFect：適用于所有核酸，適用于所有細胞，包括懸浮細胞系

Lullaby：用于siRNA應用

VeroFect：用于Vero細胞轉(zhuǎn)染

FlyFectin：用于昆蟲細胞轉(zhuǎn)染

EcoTransfect：用于流行的細胞系和低成本的常規(guī)轉(zhuǎn)染  

如何使用脂質(zhì)轉(zhuǎn)染試劑？

該protocol是一個非常簡單明了的程序，大體流程如下：

制備DNA和轉(zhuǎn)染試劑溶液。

將它們混合在一起并孵育20分鐘。

添加到您的細胞中。

脂質(zhì)轉(zhuǎn)染試劑相關引用文章鑒賞：

Ferrari, R., Martin, G., Tagit, O. et al. MT1-MMP directs force-producing proteolytic contacts that drive tumor cell invasion. Nature Communications10, 4886 (2019).. （使用OZ Biosciences的Lullaby脂質(zhì)轉(zhuǎn)染）

Karousis, E.D., Gurzeler, LA., Annibaldis, G. et al. Human NMD ensues independently of stable ribosome stalling. Nature Communications11, 4134 (2020). （使用OZ Biosciences的Lullaby脂質(zhì)轉(zhuǎn)染）

Ramsay, E.P., Abascal-Palacios, G., Dai?, J.L. et al. Structure of human RNA polymerase III. Nature Communications11, 6409 (2020).  （使用OZ Biosciences的Lullaby脂質(zhì)轉(zhuǎn)染）

來源：https://www.amyjet.com/brand/lipofection.shtml