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艾美捷Advanced Targeting Systems丨抗-6-His-SAP研究

點擊次數(shù):0發(fā)布時間:2022/12/29 16:30:28

艾美捷Advanced Targeting Systems丨抗-6-His-SAP研究

更新日期:2022/12/29 16:30:28

所 在 地:中國大陸

產品型號:

簡單介紹:Advanced Targeting Systems(ATSbio)主要研究域包含神經靶向毒素,神經生物學研究方面的抗體/蛋白,靶向劑內化水平檢測工具等。艾美捷科技是ATSbio的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質的產品與服務。

相關標簽:Advanced Targeting Systems/ATSbio 

優(yōu)質供應

詳細內容

 標簽靶向毒素是一種強大而特異的損傷劑,用于分子技術外科手術核糖體失活蛋白saporin(來自植物皂莢)是結合到靶向劑,該靶向劑識別表達6 His標記的蛋白質的YOUR細胞。一旦綴合物被內化,saporin脫離靶向劑,并使核糖體失活導致蛋白質抑制,終導致細胞死亡。沒有細胞表面標記的細胞影響多組氨酸標簽的使用已成為蛋白質純化的一種流行方法,常用于篩選過程作為您感興趣的蛋白質或肽的標簽。這種多組氨酸表位標簽通常是由位于N端、C端或內部的六個連續(xù)組氨酸氨基酸殘基組成。

 

6-His-Tag由于其與附著于瓊脂糖凝膠的鎳或鈷金屬離子結合的親和力而被廣泛使用,

其然后可用于純化天然或變性狀態(tài)的蛋白質。

 

多組氨酸標簽的使用已成為蛋白質純化的一種流行方法,通常在篩選過程中用作您感興趣的蛋白質或肽的標簽。這種多組氨酸表位標簽通常由位于N端、C端或內部的六個連續(xù)組氨酸氨基酸殘基組成。6-His-Tag由于其與附著在瓊脂糖凝膠上的鎳或鈷金屬離子結合的親和力而被廣泛使用,隨后可用于純化天然或變性狀態(tài)的蛋白質。

 

Advanced Targeting Systems艾美捷-6-His-SAP是小鼠抗6His單克隆抗體和核糖體失活蛋白saporin的化學偶聯(lián)物。它特別消除了細胞外表達6 His標記蛋白的細胞和識別YOUR 6 His標簽重組蛋白的細胞。

 

Advanced Targeting Systems艾美捷-6-His-SAP特異性和制備:

這種標記靶向毒素識別細胞中過度表達的YOUR 6 His標記重組蛋白或6 His標簽蛋白?-6-His-SAP是小鼠抗6His單克隆抗體的化學偶聯(lián)物核糖體失活蛋白,saporin。

 

Advanced Targeting Systems/ATSbio艾美捷-6-His-SAP使用和儲存:

6 His SAP特異性地消除具有6 His標記蛋白和細胞胞外表達的細胞識別YOUR 6 His標記的重組蛋白。材料可能有很多不同;工作稀釋度必須由終用戶確定。如果這是一個新的批次,您必須評估在開始完整的實驗方案之進行工作稀釋。使用輕輕旋轉材料;5-10的縮微膠片就足夠了。將材料儲存在未稀釋的等分試樣在-20°C下保存1-2個月。為了長期儲存,將材料儲存在–80°C。布料應等分至方便的體積和數(shù)量,以避免重復冷凍和解凍損害蛋白質含量。在這些條件下,該材料具有非常穩(wěn)定的保質期。解凍應該是在室溫或冰上進行。解凍的溶液在使用應保持在冰上。

 

請勿將還原劑(如二硫蘇糖醇、β-巰基乙醇或抗壞血酸)用于此材料。它將使毒素失活。這種物質是一種強的細胞毒素。應由經驗豐富的人員進行搬運。手套和處理本產品時需要佩戴安全眼鏡。處置時必須小心;高壓滅菌或暴露至0.2M氫氧化鈉將使材料失活。所有與此材料接觸的實驗室用品應同樣處理。

 

注:當用于細胞毒性試驗時,未結合的一抗體將與一抗體競爭與抗-6His-ZAP結合,并可通過競爭性抑制初抗體-次綴合物復合物來降低細胞毒性。

 

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圖:KNRK細胞以2500個細胞/90μl/孔接種在37°C下孵育過夜。第二天,SaporinrIB4-在細胞培養(yǎng)基中進行SAP稀釋,并加入10μl每個井。rIB4-6His在細胞培養(yǎng)基中稀釋終濃度為100 ng/10μl Anti-6 HisZAP,向每個孔中加入10μl。盤子在37°C下孵育72小時。為了發(fā)展,培養(yǎng)基是從平板上取下,用10%固定細胞TCA4°C下持續(xù)1小時。用自來水并風干。50μl 0.4%向每個孔中加入磺胺若丹明B/1%乙酸并在室溫下孵育板30分鐘。這個用1%乙酸洗滌板3次以風干。用100μl 10mM溶解染料每孔無緩沖tris基底,輕輕搖動5分鐘。在564nm下讀取板,并進行數(shù)據(jù)分析使用Prism軟件(GraphPad,圣地亞哥)


Advanced Targeting Systems ZAP試劑盒和二標記方案:

ZAP抗體內化試劑盒文獻

生物素-Z(鏈霉親和素ZAP)文獻

ZAP抗體內化試劑盒和生物素-ZStreptavidin ZAP)視頻教程

評估潛在靶向分子。(Kohls M,自然方法,2006

 

Advanced Targeting Systems(ATSbio)主要研究域包含神經靶向毒素,神經生物學研究方面的抗體/蛋白,靶向劑內化水平檢測工具等。艾美捷科技是ATSbio的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質的產品與服務。

 

來源:https://www.amyjet.com/brand/Advanced-Targeting-Systems.shtml

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