接下來咱們一起看看有關(guān)體外活性氧/活性氮檢測的相關(guān)研究吧！

艾美捷體外活性氧/活性氮檢測試劑盒是一種用于測量總自由基含量的檢測試劑盒一個樣本。該分析使用有的淬滅熒光探針，二氯二氫熒光素DiOxyQ（DCFH-DiOxyQ），是一種特定的ROS/RNS探針，基于與流行的2＇，7＇-二氯二氫熒光素二乙酸酯。DCFH DiOxyQ探頭先用

然后以高反應(yīng)性DCFH形式穩(wěn)定反應(yīng)狀態(tài)下，ROS和RNS物質(zhì)可以與DCFH反應(yīng)，DCFH被迅速氧化成熒光2＇，7＇-二氯二氫熒光素（DCF）。熒光強(qiáng)度成比例與樣品內(nèi)的總ROS/RNS水平相關(guān)。DCFH DiOxyQ探針可與氫氣反應(yīng)過氧化物（H2O2）、過氧自由基（ROO）、一氧化氮（NO）和過氧亞硝酸根陰離子（ONO-). 這些自由基分子是ROS和RNS的代表，因此允許測量樣本中的總自由基群體。

艾美捷體外活性氧/活性氮檢測試劑盒也可以用于評估抗氧化劑對自由基的影響。該試劑盒的檢測靈敏度限為10pMDCF和H2O2分別為40nM。每個試劑盒提供足夠的試劑，多可進(jìn)行96次分析，包括標(biāo)準(zhǔn)曲線和未知樣品。

艾美捷體外活性氧/活性氮檢測試劑盒組分：

1.底漆試劑（234701）：一管250µL溶液。

2.穩(wěn)定溶液（10X）（234702）：一管1.5 mL溶液。

3.催化劑（250X）（234703）：一管20µL溶液。

4.DCF DiOxyQ（234704）：一個50µL琥珀色甲醇溶液管。

5.DCF標(biāo)準(zhǔn)品（234202）：一個100µL琥珀色管，含有1mM DMSO溶液。

6.過氧化氫（234102）：一個100µL琥珀色管，裝有8.821M溶液。

檢測原理：

該試劑盒是一種用于測量游離ROS/RNS總量的體外測定試劑盒自由基活性。用催化劑將未知的ROS或RNS樣品或標(biāo)準(zhǔn)加入到井中這有助于加速氧化反應(yīng)。短暫孵育后，制備的DCFH探針添加到所有孔中，并允許氧化反應(yīng)進(jìn)行。測量樣品對過氧化氫或DCF標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行熒光測定。在96孔中進(jìn)行測定可以在標(biāo)準(zhǔn)熒光板讀取器上讀取的熒光板格式。自由基通過與預(yù)定的DCF或氫進(jìn)行比較來確定未知樣品中的含量過氧化物標(biāo)準(zhǔn)曲線。

相關(guān)研究：

1.STA-330：OxiSelect™ TBARS測定試劑盒（MDA定量）

2.STA-340：OxiSelect™ 超氧化物歧化酶活性測定

3.STA-341：OxiSelect™ 過氧化氫酶活性測定試劑盒

4.STA-342：OxiSelect™ 細(xì)胞內(nèi)ROS測定試劑盒（綠色熒光）

相關(guān)文獻(xiàn)：

1.Bass DA，Parce JW，Dechatelet LR，Szejda P，Seeds MC，Thomas M.流式細(xì)胞術(shù)研究

中性粒細(xì)胞氧化產(chǎn)物的形成：對膜刺激的分反應(yīng)。J免疫；

2.Brandt R，Keston AS。二乙酰二氯熒光素的合成；

3.Keston AS，Brandt R.超微量過氧化氫的熒光分析。