血清或細(xì)胞外基質(zhì)中組織蛋白酶活性升高可表示多種病理狀況。艾美捷ICT魔力紅組織蛋白酶B活性分析試劑盒被研究人員用來定量和監(jiān)測培養(yǎng)細(xì)胞和組織中的組織蛋白酶活性。

該試劑盒檢測組織蛋白酶B活性。要使用魔力紅，將基質(zhì)直接添加到細(xì)胞培養(yǎng)基中，孵育并分析。因?yàn)樗羌?xì)胞滲透性的，它很容易穿透細(xì)胞膜和內(nèi)部細(xì)胞器的膜——不需要裂解或滲透步驟。如果組織蛋白酶是活性的，魔紅底物被裂解，甲酰紫熒光團(tuán)將在激發(fā)時(shí)變?yōu)闊晒�。隨著酶活性的進(jìn)展和更多魔紅底物的裂解，信號將增強(qiáng)，使研究人員能夠觀察顏色隨時(shí)間的變化。樣品可通過熒光顯微鏡或熒光板讀取器進(jìn)行分析。試劑盒中包括Hoechst 33342和吖啶橙，分別用于檢測核形態(tài)和溶酶體細(xì)胞器結(jié)構(gòu)。

艾美捷ICT魔力紅組織蛋白酶B活性分析試劑盒：

試劑名稱MR-RR2

靶向組織蛋白酶B

激發(fā)/發(fā)射592 nm/628 nm

熒光板讀數(shù)器、熒光顯微鏡的分析方法

樣品類型細(xì)胞培養(yǎng)

儲(chǔ)存2-8°C

艾美捷ICT魔力紅組織蛋白酶B活性分析試劑盒注意事項(xiàng)：

準(zhǔn)備樣品和對照品

通過加入DMSO重新配制魔力紅。

通過加入diH2O稀釋魔力紅1:10。

向每個(gè)樣品中加入20µL魔紅（約500µL培養(yǎng)細(xì)胞等分試樣）。

避光培養(yǎng)。

觀察顏色在15分鐘內(nèi)開始顯現(xiàn)。

如果需要，用其他污漬標(biāo)記，如Hoechst、DAPI或抗體。

如果需要，修復(fù)單元格。

用熒光顯微鏡或熒光板讀取器進(jìn)行分析。魔力紅的佳激發(fā)波長為592nm，發(fā)射波長為628nm。

如果使用貼壁細(xì)胞，請參閱手冊了解其他方案。

來源：https://www.amyjet.com/products/ICT-937.shtml