細(xì)胞凋亡屬于程序化細(xì)胞死亡，可見(jiàn)于各種器官和細(xì)胞，在正常發(fā)育、生理、病理過(guò)程中對(duì)細(xì)胞和器官的穩(wěn)態(tài)具有十分重要的調(diào)節(jié)作用。Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是參與細(xì)胞凋亡過(guò)程的蛋白酶家族，包含10多個(gè)成員。其中Caspase-1是可剪切IL-1b和IL-18體產(chǎn)生活性細(xì)胞因子的caspase。Caspase-11剪切45kD的caspase-1體蛋白產(chǎn)生20kD和10kD片斷，這兩個(gè)片斷可以形成異源二聚體，并進(jìn)一步形成四聚體。此四聚體具有蛋白酶活性。Caspase-1通過(guò)剪切Bcl-XL調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡，并通過(guò)對(duì)細(xì)胞因子體的剪切來(lái)調(diào)控相關(guān)細(xì)胞因子介導(dǎo)的免疫炎性反應(yīng)。試劑盒測(cè)定原理基于Caspase-1特異水解其多肽底物N-acetyl-Tyr-Val-Ala-Asp-pNA (Ac-YVAD-pNA)，釋放出游離的硝基苯胺pNA，后者呈黃色在405 nm具有大吸收峰，用可見(jiàn)光分光光度比色方法測(cè)定。其吸光度值對(duì)應(yīng)于Caspase-1的水解活性。反應(yīng)體系100微升，試劑盒提供的試劑，除標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)外可進(jìn)行50或100次樣品測(cè)定。

艾美捷天冬氨酸蛋白酶（Caspase）活性檢測(cè)試劑盒適用：測(cè)定哺乳動(dòng)物組織、細(xì)胞caspase-1活性。

原理：

艾美捷天冬氨酸蛋白酶（Caspase）活性檢測(cè)試劑盒是無(wú)細(xì)胞毒性的，細(xì)胞膜滲透抑制劑。進(jìn)入每個(gè)細(xì)胞，并不可逆地與活化的caspase-1結(jié)合。任何未結(jié)合的FAM-YVAD-FMK-FLICA試劑擴(kuò)散出細(xì)胞并被沖走。因此留在細(xì)胞內(nèi)的綠色熒光直接體現(xiàn)了活性caspase-1酶活性的。熒光結(jié)果可通過(guò)熒光酶標(biāo)儀、熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析。

組分：

25T：

l FLICA Caspase-1 Reagent (FAM-YVAD-FMK), 1 vial, #653 l 10X Apoptosis Wash Buffer, 15 mL, #635 l Fixative, 6 mL, #636 l Propidium Iodide, 1 mL, #638 l Hoechst 33342, 1 mL, #639 l Kit Manual

100T：

l FLICA Caspase-1 Reagent (FAM-YVAD-FMK), 4 vials, #653 l 10X Apoptosis Wash Buffer, 60 mL, #634 l Fixative, 6 mL, #636 l Propidium Iodide, 1 mL, #638 l Hoechst 33342, 1 mL, #639 l Kit Manual

保存條件：2-8°C 避光保存。

艾美捷FAM-FLICA 天冬氨酸蛋白酶（Caspase）活性檢測(cè)試劑盒Nature文章鑒賞：

IF=30.9, 《Escherichia coli Rho GTPase-activating toxin CNF1 mediates NLRP3 inflammasome activation via p21-activated kinases-1/2 during bacteraemia in mice》,Nature Microbiology

來(lái)源：https://www.amyjet.com/products/ICT-97.shtml