該試劑盒是一種夾心酶免疫分析法，用于體外定量測(cè)定小鼠bTC血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞裂解物和其他生物液體。僅供研究使用。

存儲(chǔ)：

所有試劑應(yīng)按照小瓶上的標(biāo)簽保存。校準(zhǔn)器、檢測(cè)試劑A、檢測(cè)試劑B和96孔帶板應(yīng)在收到后儲(chǔ)存在-20°C，而其他試劑溫度應(yīng)為4°C。未使用的板條應(yīng)保存在密封袋中，并提供干燥劑盡量減少接觸潮濕空氣。打開的測(cè)試試劑盒將在1個(gè)月內(nèi)保持穩(wěn)定，提是將其儲(chǔ)存為如上所述。

Kamiya艾美捷小鼠脫細(xì)胞素ELISA試驗(yàn)原理：

該試劑盒中提供的微孔板已預(yù)先涂有bTC特異性抗體。校準(zhǔn)器或然后將樣品加入到適當(dāng)?shù)奈⒖装蹇字�，加入生物素綴合的抗體bTC。接下來，將與辣根過氧化物酶（HRP）偶聯(lián)的阿維丁添加到每個(gè)微孔板孔中培養(yǎng)。加入TMB底物溶液后，僅含有bTC、生物素綴合物的孔抗體和酶結(jié)合的Avidin將呈現(xiàn)顏色變化。酶底物反應(yīng)是通過加入硫酸溶液終止，并測(cè)量顏色變化在450nm±10nm的波長(zhǎng)下進(jìn)行分光光度測(cè)定。樣品中bTC的濃度為然后通過將樣品的外徑與校準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較來確定。

Kamiya艾美捷小鼠脫細(xì)胞素ELISA試劑制備：

使用，將所有套件組件和樣品置于室溫（18-25°C）。如果不使用該套件一次性用完，請(qǐng)只取出本次實(shí)驗(yàn)的試紙和試劑，剩下的在所需條件下使用試紙條和試劑。

校準(zhǔn)器：

用1.0 mL校準(zhǔn)品稀釋劑重新配制校準(zhǔn)品，在室溫下保持10分鐘，輕輕搖動(dòng)（不要起泡）。儲(chǔ)備溶液中校準(zhǔn)品的濃度為20000 pg/mL。請(qǐng)先將儲(chǔ)備溶液稀釋至1000 pg/mL，稀釋后的校準(zhǔn)品為高值校準(zhǔn)器（1000 pg/mL）。然后準(zhǔn)備7支含有0.5 mL校準(zhǔn)稀釋劑的試管，并使用稀釋的校準(zhǔn)器，以根據(jù)下圖所示的圖片產(chǎn)生雙稀釋系列�；旌厦扛茏釉谙乱淮无D(zhuǎn)移之徹底清除。設(shè)置7個(gè)稀釋校準(zhǔn)器點(diǎn)，250 pg/mL、125 pg/mL、62.5 pg/mL，31.2 pg/mL和15.6 pg/mL，以及后一支帶校準(zhǔn)儀的EP管稀釋劑為空白，為0 pg/mL。

注：

1.測(cè)定15分鐘內(nèi)準(zhǔn)備校準(zhǔn)品。請(qǐng)不要在37°C下溶解試劑

2.不允許直接在井中進(jìn)行連續(xù)稀釋。

3.避免起泡并輕輕混合，直到晶體完全溶解。小化由于移液引起的不精確性，使用小容量，并確保移液器經(jīng)過校準(zhǔn)。它是建議吸移一次超過10µL。

4.重組校準(zhǔn)品、檢測(cè)試劑A和檢測(cè)試劑B只能使用一旦

5.如果洗滌液濃縮液（30X）中已形成晶體，則加熱至室溫并混合直到晶體完全溶解。

6.受污染的水或試劑制備容器會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。

樣品制備：

1.Kamiya只負(fù)責(zé)試劑盒本身，但不負(fù)責(zé)化驗(yàn)過程中消耗的樣品。這個(gè)用戶應(yīng)計(jì)算整個(gè)測(cè)試中可能使用的樣本量。請(qǐng)保留提提供足夠的樣品。

2.分析請(qǐng)預(yù)測(cè)濃度。如果這些值不在校準(zhǔn)曲線，用戶必須為其特定實(shí)驗(yàn)確定佳樣品稀釋度。

3.血清/血漿樣品需要約5倍稀釋。建議5倍稀釋為40µL樣品+160µL PBS。樣品應(yīng)用0.01 mol/L PBS（PH=7.0-7.2）稀釋。

4.如果手冊(cè)中未指明樣品，則進(jìn)行初步實(shí)驗(yàn)以確定套件是必要的。

5.通過化學(xué)裂解緩沖液制備的組織或細(xì)胞提取樣品可能導(dǎo)致意外的ELISA由于某些化學(xué)品的影響而產(chǎn)生的結(jié)果。

6.由于來自其他來源的抗原和我們?cè)噭┖兄惺褂玫目贵w之間可能不匹配（例如，抗體靶向構(gòu)象表位而非線性表位），一些天然或重組Kamiya的產(chǎn)品可能無法識(shí)別來自其他制造商的蛋白質(zhì)。

7.受細(xì)胞活力、細(xì)胞數(shù)量或采樣時(shí)間等因素的影響試劑盒可能檢測(cè)不到培養(yǎng)上清液。

8.建議在試驗(yàn)中使用未經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存的新鮮樣品。否則，蛋白質(zhì)這些樣品可能發(fā)生降解和變性，終導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

Kamiya基于免疫比濁技術(shù)的臨床診斷和研究免疫分析工具，用于脂質(zhì)評(píng)估、凝血、炎癥、糖尿病、營(yíng)養(yǎng)評(píng)估和血清蛋白測(cè)量。艾美捷科技是Kamiya的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

來源：https://www.amyjet.com/brand/Kamiya.shtml