人α1-抗糜蛋白酶（CYT）ELISA是一種高度靈敏的雙位點酶聯(lián)免疫測定法（ELISA）用于定量測定人類生物樣品中的α1-抗糜蛋白酶。僅供研究使用。不用于診斷程序。

Kamiya艾美捷α1-抗糜蛋白酶（CYT）ELISA原理：

在該試驗中，樣品中存在的α1-抗胰凝乳蛋白酶與已吸附至聚苯乙烯微量滴定孔的表面。通過洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)后加入與辣根過氧化物酶（HRP）綴合的酶。這些酶標(biāo)記的抗體與先結(jié)合的CYT。在另一洗滌步驟之后，通過添加顯色底物3,3＇，5,5＇-TMB。結(jié)合酶的數(shù)量直接變化測試樣品中的CYT濃度；因此，在450nm處的吸光度是測試樣品中的CYT。測試樣品中的CYT量可根據(jù)構(gòu)建的校準(zhǔn)曲線進行插值并對樣品稀釋進行校正。

需要但未提供的材料：

•用于配制和分配稀釋液的精密移液管（2µL至200µL）

•試管

•噴壺或微孔板清洗機/吸氣器

•蒸餾或去離子水

•微孔板讀取器

•用于制備試劑和緩沖溶液的各種玻璃器皿

•計時器

•用于樣本采集的離心機

•血漿采集抗凝劑

組件：

1.濃縮稀釋劑

一瓶含有50mL 5X濃縮稀釋液流動緩沖液。

2.濃縮洗滌液

一瓶含有50mL 20X濃縮洗滌液。

3.酶抗體結(jié)合物濃縮物

一個含有150µL 100X濃縮親和純化的抗人α1-抗糜蛋白酶抗體的小瓶

在穩(wěn)定緩沖液中與HRP偶聯(lián)。

4.TMB基板溶液

一瓶含有12mL TMB和過氧化氫的檸檬酸緩沖液（pH 3.3）。

5.停止解決方案

一瓶含12 mL 0.3 M硫酸。

警告：避免接觸皮膚。

6.微量滴定板

12個可拆卸的8個井條，位于井支架框架內(nèi)�？子糜H和純化的抗人CYT包被。

7.人α1-抗糜蛋白酶校準(zhǔn)器

一個裝有凍干人α1-抗胰蛋白酶校準(zhǔn)品的小瓶。

標(biāo)本采集和處理：

應(yīng)通過靜脈穿刺收集血液，并在凝塊形成后通過離心將血清與細胞分離。對于血漿樣本，應(yīng)將血液收集到裝有抗凝劑的容器中，然后離心。應(yīng)注意為了盡量減少溶血，過量的溶血會影響您的結(jié)果。立即測定或等分并儲存-20°C下的樣品。避免反復(fù)冷凍/解凍。對于任何可能含有病原體的樣本，必須小心防止與開放性傷口接觸。

Kamiya艾美捷人α1-抗糜蛋白酶（CYT）ELISA樣品的稀釋：

樣品中CYT的定量測定要求在使用對每個測試樣品進行稀釋。1:5000稀釋適用于大多數(shù)血清/血漿樣品。對于產(chǎn)生超出范圍結(jié)果的樣本的絕丨對定量對于校準(zhǔn)曲線，可能需要更小或更大的稀釋度。如果不確定樣品水平，使用強烈建議在運行整個板之使用一個或兩個代表性樣品。

為制備1:5000稀釋的樣品，將5µL樣品轉(zhuǎn)移至495µL 1X稀釋劑中。這樣可以得到1:100的稀釋度。接下來，通過將10µL 1X稀釋劑轉(zhuǎn)移至490µL稀釋1:100樣品。你現(xiàn)在有1:5000的稀釋度樣品在每個階段充分混合。

Kamiya基于免疫比濁技術(shù)的臨床診斷和研究免疫分析工具，用于脂質(zhì)評估、凝血、炎癥、糖尿病、營養(yǎng)評估和血清蛋白測量。艾美捷科技是Kamiya的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

來源：https://www.amyjet.com/brand/Kamiya.shtml