喜樹堿是一種有效的細(xì)胞毒性五環(huán)生物堿，以其強(qiáng)大的細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)特性而聞名。喜樹堿及其類似物已被證明能抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶I（o I），導(dǎo)致S期細(xì)胞凋亡。喜樹堿結(jié)合并穩(wěn)定拓?fù)?span style="font-family: Calibri;">I-DNA骨架復(fù)合物（共價二元復(fù)合物）。這種穩(wěn)定的復(fù)合物降低了斷裂鏈中o I的釋放速率，從而減緩了再聚合和隨后的DNA合成過程。在凋亡檢測實(shí)驗中使用喜樹堿創(chuàng)建陽性對照。

ImmunoChemistry艾美捷喜樹堿化學(xué)性質(zhì)：

試劑名稱喜樹堿

靶DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I

樣品類型細(xì)胞培養(yǎng)

儲存-20°C

ImmunoChemistry艾美捷喜樹堿協(xié)議：

1.將喜樹堿粉末溶解在組織培養(yǎng)DMSO中，以獲得2mg/mL喜樹堿儲備濃度。

2.制備50–100µL的DMSO增溶喜樹堿等分試樣，并將其冷凍保存在<-20°C。一瓶冷凍的喜樹堿可在丟棄再解凍2次。應(yīng)標(biāo)記已解凍1X的小瓶，以表明這一點(diǎn)，以便它們在丟棄只經(jīng)過一次解凍。

3.喜樹堿濃度范圍為2–4µg/mL的刺突細(xì)胞培養(yǎng)物，產(chǎn)生6–12µM的細(xì)胞培養(yǎng)物喜樹堿濃度。該喜樹堿濃度范圍適用于誘導(dǎo)Jurkat或HL 60細(xì)胞懸浮液，其濃度范圍通常為1 x 105–1 x 106細(xì)胞/mL。在此濃度范圍內(nèi)，培養(yǎng)4小時（37°C）后成功誘導(dǎo)凋亡。

4.對您的特定細(xì)胞系進(jìn)行時間歷程研究，以確定佳喜樹堿濃度和暴露時間，從而為您的實(shí)驗實(shí)現(xiàn)良好的凋亡誘導(dǎo)水平。

5.繼續(xù)您的實(shí)驗性凋亡誘導(dǎo)模型系統(tǒng)。

ImmunoChemistry Technologies簡稱"ICT",提供各種細(xì)胞蛋白酶、細(xì)胞凋亡與細(xì)胞毒性檢測試劑盒等研究工具，同時包含高質(zhì)量高靈敏度的 ELISA開發(fā)試劑。艾美捷科技是ImmunoChemistry的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

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