谷-胱-甘肽，γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸甘氨酸或GSH，是細胞中豐富的非蛋白質(zhì)硫醇。GSH參與細胞內(nèi)許多重要生化過程的調(diào)節(jié)。GSH初被認為是對抗自由基副產(chǎn)物的毒性積累的關(guān)鍵細胞內(nèi)還原力來源，它還參與解毒和清除外源/內(nèi)源性毒素和烷化劑。GSH作為一種細胞信號劑，參與DNA合成和細胞增殖調(diào)節(jié)。由于細胞死亡的遺傳保守分子過程，細胞內(nèi)GSH水平可通過細胞凋亡（細胞內(nèi)足夠的GSH儲存）或壞死或自噬（細胞內(nèi)耗盡的GSH存儲）促進細胞死亡途徑。檢測到實驗細胞群體中細胞內(nèi)GSH濃度相對于陰性（健康細胞）對照的下降通常表明細胞凋亡誘導(dǎo)事件。由于細胞內(nèi)GSH耗竭與細胞凋亡過程的發(fā)生之間存在著強烈的相關(guān)性，ImmunoChemistry（ICT）的細胞內(nèi)GSH-Assay為評估細胞凋亡抑制劑和激活劑的效力提供了良好的篩選選擇。該試劑盒提供了所有必要的試劑和易于遵循的方案，以使用流式細胞術(shù)分析方法評估細胞內(nèi)GSH水平的變化。關(guān)鍵分析試劑是有的硫醇敏感染料ThioBright™ 綠色，它能快速穿透細胞膜結(jié)構(gòu)，主要聚集在活細胞的胞漿中。在含有游離硫醇的分子如GSH的存在下™ 綠色染料分子與GSH靶分子共價結(jié)合，并轉(zhuǎn)化為熒光形式的染料。在與細胞死亡過程相關(guān)的氧化應(yīng)激或GSH耗竭期間，綠色熒光染料形式的胞漿濃度顯著降低。細胞內(nèi)GSH濃度的降低直接轉(zhuǎn)化為死亡或氧化應(yīng)激細胞群中綠色熒光輸出的容易監(jiān)測的降低。

ImmunoChemistry艾美捷細胞內(nèi)GSH測定試劑盒化學(xué)性質(zhì)：

目標谷胱甘肽（GSH）

分析方法流式細胞術(shù)

樣品類型細胞培養(yǎng)

儲存-20°C

協(xié)議：

準備樣品和對照品。

重組ThioBright™ 用500µL二甲基亞砜（DMSO）制成綠色，產(chǎn)生200X濃縮原液。

以1:200的比例向每個樣品中添加ThioBright Green。例如，向995µL培養(yǎng)細胞中添加5µL。

培養(yǎng)15-30分鐘。

可選：旋轉(zhuǎn)和沉淀細胞，去除上清液，并輕輕重懸于測定緩沖液或其他等滲緩沖液中。

如果需要，用其他污漬標記，如Hoechst、碘化丙啶、7-AAD或抗體。

用流式細胞儀分析。硫亮綠在490 nm激發(fā)，在525 nm發(fā)射。

ImmunoChemistry艾美捷細胞內(nèi)GSH測定試劑盒組分：

ThioBright™ Green, 1 vial, #6636

Assay Buffer, 100 mL, #6637

DMSO, 500 µL, #6638

Kit Manual

ImmunoChemistry Technologies簡稱"ICT",提供各種細胞蛋白酶、細胞凋亡與細胞毒性檢測試劑盒等研究工具，同時包含高質(zhì)量高靈敏度的 ELISA開發(fā)試劑。艾美捷科技是ImmunoChemistry的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

來源：https://www.amyjet.com/brand/Immunochemistry.shtml