評估細(xì)胞活力是評估新藥物治療和潛在細(xì)胞毒性治療的關(guān)鍵步驟。ICT的Advanced Calcein AM Cell Viability Kit將Calcein AM與7-AAD相結(jié)合，可輕松同時標(biāo)記單個樣本中的活細(xì)胞、膜受損細(xì)胞和死細(xì)胞。鈣黃綠素AM是一種透膜的熒光試劑，因其在評估不同細(xì)胞群體的相對細(xì)胞生存狀態(tài)方面的效用而被廣泛認(rèn)可。鈣黃綠素AM的整體疏水性使其能夠以濃度梯度依賴的方式輕易穿過細(xì)胞膜的脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu)。一旦進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，疏水性和非熒光鈣黃素AM就會被活細(xì)胞中活躍的細(xì)胞內(nèi)酯酶迅速水解。這導(dǎo)致兩個非性乙酰氧基甲酯（AM）基團(tuán)的裂解和去除。一旦AM基團(tuán)被裂解，產(chǎn)生的性（親水性）且現(xiàn)在具有熒光能力的鈣黃綠素染料分子被有效地保留在細(xì)胞膜的范圍內(nèi)。由于細(xì)胞膜的疏水性脂質(zhì)雙層組成，性染料分子自然會被排除在被動擴(kuò)散回細(xì)胞之外。死亡細(xì)胞缺乏活性酯酶，不能裂解鈣黃嘌呤AM。細(xì)胞膜完整性的喪失，通常表明壞死或晚期細(xì)胞凋亡，可以使用活性染色染料7-AAD（一種紅色熒光活/死染色劑）來檢測。這種染料很容易穿透細(xì)胞膜受損的細(xì)胞，與富含GC的DNA區(qū)域緊密結(jié)合。將這兩種不同類型的熒光細(xì)胞狀態(tài)指示試劑組合在一次測試中，通過能夠識別綠色熒光鈣黃綠素陽性細(xì)胞群中7-AAD陽性細(xì)胞與7-AAD陰性細(xì)胞的百分比，可以更好地分辨活細(xì)胞群和死細(xì)胞群�？梢允褂昧魇郊�(xì)胞儀或熒光顯微鏡分析樣品。

ImmunoChemistry艾美捷高鈣素AM細(xì)胞活力試劑盒化學(xué)性質(zhì)：

試劑名稱Calcein AM，7-AAD

靶向細(xì)胞內(nèi)酯酶，富含GC的DNA

激發(fā)/發(fā)射494 nm/520 nm、546 nm/647 nm

分析方法流式細(xì)胞術(shù)、熒光顯微鏡、熒光平板讀取器

樣品類型細(xì)胞培養(yǎng)

存儲Calcein AM≤-20°C，2-8°C時的其他部件

ImmunoChemistry艾美捷高鈣素AM細(xì)胞活力試劑盒組分：

Calcein AM Reagent, 1 vial, #6696

7-Aminoactinomycin D (7-AAD) vital dye, 0.26 mg, 2 vials, #6163

Hoechst 33342, 1 vial, #639

10X Cellular Assay Buffer, 60 mL, 1 bottle, #6695

Kit Manual

ImmunoChemistry Technologies簡稱"ICT",提供各種細(xì)胞蛋白酶、細(xì)胞凋亡與細(xì)胞毒性檢測試劑盒等研究工具，同時包含高質(zhì)量高靈敏度的 ELISA開發(fā)試劑。艾美捷科技是ImmunoChemistry的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

來源：https://www.amyjet.com/brand/Immunochemistry.shtml