綠色活/死染色是一種用于區(qū)分活細胞和死細胞的不透膜熒光活性染色劑。這種綠色活/死染色劑是一種重要的染料，具有完整的細胞膜排斥特性，類似于流行的紅色熒光活性染料碘化丙啶（PI）、7-氨基放線菌素D（7-AAD）和DRAQ7™. 與紅色熒光DNA染料一樣，綠色活/死染色因其性而被排除在完整的健康細胞之外。在存在表現(xiàn)出受損膜完整性的細胞時，綠色活/死染色穿透細胞和核膜屏障，并以類似于PI和7-AAD的方式緊密插入DNA。當(dāng)與DNA結(jié)合時，它在綠色發(fā)射范圍內(nèi)獲得大增強的熒光電勢（>2000X）。這些重要的重要染料特性使綠色活/死染色能夠用于基于流式細胞術(shù)的方案和顯微鏡分析技術(shù)，以評估樣本細胞群中晚期凋亡、壞死和膜受損細胞的百分比。綠色熒光發(fā)射允許新的染料組合用于理解細胞死亡和凋亡，例如與紅色SR-FLICA®檢測、遠紅色FLICA 660半胱天冬酶檢測和其他可見范圍熒光標(biāo)記配體一起使用。綠色活/死染色只染色死細胞和滲透細胞的細胞核。綠色活/死染色不會進入完整的活細胞。細胞可以固定或滲透，以使用綠色活/死染色作為核復(fù)染劑。綠色活/死染色的毒性可忽略不計，可用于長期生存能力測定，以評估細胞毒性和細胞凋亡。對于顯微鏡應(yīng)用，綠色活/死染色將作為IF、IHC、高含量篩選和基于細胞的分析中固定細胞和組織樣本的DNA復(fù)染劑。

ImmunoChemistry艾美捷綠色活/死染色試劑化學(xué)性質(zhì)：

目標(biāo)死亡細胞，壞死

當(dāng)與核酸結(jié)合時，激發(fā)/發(fā)射495 nm/>512 nm

分析方法流式細胞術(shù)、熒光顯微鏡

樣品類型細胞培養(yǎng)

儲存-20°C

以500µM提供

ImmunoChemistry艾美捷綠色活/死染色試劑流式細胞術(shù)：

每個50µL小瓶足以進行1000次流式細胞儀測試。

在微型離心機中短暫旋轉(zhuǎn)解凍的小瓶，以去除可能被困在瓶蓋中的任何試劑。

在PBS中稀釋1:100的綠色活/死染色濃縮儲備溶液（500µM），以制備5000 nM的工作溶液。例如，向990µL PBS中加入10µL儲備濃縮液。只準(zhǔn)備實驗所需的東西。應(yīng)立即使用工作溶液，并丟棄任何剩余的稀釋溶液。

用1:100稀釋的5000 nM工作溶液加標(biāo)樣品。例如，用5µL工作溶液加標(biāo)0.495 mL樣品。

在室溫下避光培養(yǎng)樣品約10分鐘。

使用488nm藍色激光和530/30（FL1）發(fā)射濾光片設(shè)置或類似設(shè)置的流式細胞儀進行分析。

熒光顯微鏡

每個50µL小瓶足以容納100個微量滴定板孔。

在微型離心機中短暫旋轉(zhuǎn)解凍的小瓶，以去除可能被困在瓶蓋中的任何試劑。

在PBS中稀釋1:100的綠色活/死染色濃縮儲備溶液（500µM），以制備5000 nM的工作溶液。例如，向990µL PBS中加入10µL儲備濃縮液。只準(zhǔn)備實驗所需的東西。應(yīng)立即使用工作溶液，并丟棄任何剩余的稀釋溶液。

用1:10稀釋的5000 nM工作溶液加標(biāo)樣品。例如，用50µL工作溶液加標(biāo)0.45 mL樣品。

在室溫下避光培養(yǎng)樣品約10分鐘。

當(dāng)與DNA結(jié)合時，綠色活/死染色的峰值吸收為495nm，大發(fā)射為512nm。使用接近這些設(shè)置的光學(xué)過濾器，用熒光顯微鏡進行可視化。

ImmunoChemistry Technologies簡稱"ICT",提供各種細胞蛋白酶、細胞凋亡與細胞毒性檢測試劑盒等研究工具，同時包含高質(zhì)量高靈敏度的 ELISA開發(fā)試劑。艾美捷科技是ImmunoChemistry的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

來源：https://www.amyjet.com/brand/Immunochemistry.shtml