艾美捷重組蛋白酶K屬于一種廣譜的絲氨酸蛋白酶，可被某些絲氨酸蛋白酶的抑制劑如PMSF、AEBSF等所抑制。蛋白酶K無明顯的切割特異性，能在脂肪族、芳香族或疏水性氨基酸的羧基側(cè)裂解肽鍵，可被蛋白酶K水解的小的肽是四肽。蛋白酶K對天然蛋白質(zhì)的酶切降解非常有效，因此常用于在核酸分離過程中快速滅活內(nèi)源RNA酶、DNA酶等核酸酶，并消化核酸結(jié)合蛋白等。本重組蛋白酶K的基因序列來源于林伯氏白色念球菌(Tritirachium album Limber)的蛋白酶K基因。

艾美捷重組蛋白酶K，無動物源/AF特異性：

除了肽鍵的裂解，它還能夠催化肽酰胺水解。蛋白酶K被氟磷酸二異丙酯（DFP）或（PMSF）滅活。螯合劑如檸檬酸鹽和EDTA對酶活性沒有影響。

應(yīng)用：

蛋白酶K在分離高度天然、未受損的DNA或RNA中非常有用，因為大多數(shù)微生物或哺乳動物的DNA和RNA都被酶快速滅活，特別是在0.5-1%SDS存在下。

化驗方法：

蛋白酶K水解用尿素變性的血紅蛋白，并釋放Folin陽性氨基酸和肽，這些氨基酸和肽被確定為酪氨酸當量。1個單位在37°C、pH 7.5下釋放1μmol Folin陽性氨基酸，使用變性血紅蛋白作為底物。

試劑

0.05 N HCl-稀釋0.82 ml濃度。用試劑水將HCl稀釋至200ml。

0.5 M NaOH-將4.0 gm NaOH溶解在200 ml試劑水中。

緩沖底物-將2.0克血紅蛋白溶解在35毫升試劑水中，加入36.0克尿素和16毫升0.5 M NaOH。室溫下攪拌30-60分鐘。加入0.618克硼-酸并攪拌。用5 N HCl將pH調(diào)至7.5，并將qs.調(diào)至100 ml。

酪氨酸標準（2.5 nmol/L）-將45.3 mg酪氨酸溶于100 ml 0.05 N HCl中。

Folin試劑-將10 ml Folin Ciocalteus苯-酚試劑添加到20 ml試劑水中。

相關(guān)文獻：

Ebeling, W. , Hennrich, N. , Klockow, M. , Metz, H. , Orth, H. ａnd Lang, F.

Proteinase K from Tritirachium album Limber , Eur J Biochem 47 , 91 , 1974

Fourcroy, P.

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來源：https://www.amyjet.com/products/WBC-LS004248.shtml