從凋亡到壞死的轉(zhuǎn)變是一個定義松散的連續(xù)過程，需要認(rèn)識到過程的各個階段。磷脂酰絲氨酸（PS）在質(zhì)膜細(xì)胞外表面的顯示仍然是早期凋亡的統(tǒng)一標(biāo)志。磷脂結(jié)合蛋白如膜聯(lián)蛋白V在Ca2+存在下以高親和力結(jié)合PS。鑒于膜聯(lián)蛋白V不能滲透細(xì)胞，外化PS的結(jié)合對早期凋亡細(xì)胞具有選擇性。類似地，如膜不可滲透的DNA嵌入染料標(biāo)記細(xì)胞核的能力所證明的，質(zhì)膜完整性的喪失是證明晚期凋亡和壞死的直接方法。考慮到膜聯(lián)蛋白V通常與熒光（也稱為FITC）結(jié)合，在綠色熒光蛋白（GFP）表達(dá)細(xì)胞中的凋亡檢測可能是有問題的。這兩個熒光團(tuán)的發(fā)射曲線之間的光譜重疊使得信號之間的區(qū)分變得困難或不可能，從而損害了總體數(shù)據(jù)質(zhì)量。

雖然可用于分析不表達(dá)任何熒光蛋白的細(xì)胞的凋亡和壞死，但GFP-CERTIFIED細(xì)胞凋亡/壞死檢測系統(tǒng)門設(shè)計用于表達(dá)GFP的細(xì)胞系和表達(dá)藍(lán)色或青色熒光蛋白（BFP、CFP）的細(xì)胞。

此外，該試劑盒適用于活細(xì)胞或固定后細(xì)胞與探針（如標(biāo)記抗體）或顯示與熒光或香豆素類似光譜性質(zhì)的其他熒光綴合物結(jié)合使用。該試劑盒包括測定細(xì)胞凋亡早期和晚期以及壞死的所有必要試劑。膜聯(lián)蛋白V-EnzoGold（增強(qiáng)型菁-3）綴合物能夠檢測不同于熒光或GFP的細(xì)胞凋亡。壞死檢測試劑（紅色）類似于紅色發(fā)光染料7-AAD，有助于晚期凋亡和壞死檢測。該試劑盒還包括用作陽性對照的凋亡誘導(dǎo)劑（Staurosporin）。檢測試劑可以單獨使用或組合使用，分別用于單個或多個應(yīng)用。該試劑盒還通過流式細(xì)胞術(shù)和熒光/共聚焦顯微鏡提供快速準(zhǔn)確的結(jié)果。

艾美捷GFP-CERTIFIED細(xì)胞凋亡/壞死檢測試劑盒：多重分析，區(qū)分健康、早期凋亡、晚期凋亡和壞死細(xì)胞，與GFP和其他綠色熒光探針兼容。

艾美捷GFP-CERTIFIED細(xì)胞凋亡/壞死檢測試劑盒特點：

1、與GFP和其他綠色熒光探針的真正多路復(fù)用能力

2、易于區(qū)分健康、早期凋亡、晚期凋亡和壞死細(xì)胞

3、針對熒光顯微鏡和流式細(xì)胞術(shù)應(yīng)用進(jìn)行了優(yōu)化

4、適用于死亡途徑分析和藥物/毒素研究

圖1：GFP、膜聯(lián)蛋白V-菁3綴合物和壞死檢測試劑（紅色）的激發(fā)（陰影）和發(fā)射（固體）光譜。所有三種染料都準(zhǔn)備好用488nm激光源激發(fā)。所有熒光團(tuán)的發(fā)射大值彼此很好地分離。 

艾美捷GFP-CERTIFIED細(xì)胞凋亡/壞死檢測試劑盒相關(guān)文獻(xiàn)：

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ALL blasts drive primary mesenchymal stromal cells to increase asparagine availability during asparaginase treatment: M. Chiu, et al.; Blood Adv. 5, 5164 (2021), Abstract;

Evofosfamide Is Effective against Pediatric Aggressive Glioma Cell Lines in Hypoxic Conditions ａnd Potentiates the Effect of Cytotoxic Chemotherapy ａnd Ionizing Radiations: Q. Bailleul, et al.; Cancer 13, 1804 (2021), Abstract; Full Text

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