HQ銀是一種獨(dú)特的銀增強(qiáng)試劑。它含有一種增稠劑，是一種天然的聚合膠：它被用來(lái)調(diào)節(jié)混合物與金納米粒子的反應(yīng)速度。這使該試劑具有一些優(yōu)勢(shì)，與其他銀增強(qiáng)劑相比，性能得到了提高，如下圖所示。

圖：使用Nanogold®和HQ Silver預(yù)包埋免疫電子顯微鏡。Nanogold Fab山羊抗兔IgG二抗體標(biāo)記大鼠腦中K+通道Kv2.1亞單位，隨后HQ銀增強(qiáng)。注意免疫染色的高密度和特異性，甚至可以闡明細(xì)胞膜細(xì)胞質(zhì)側(cè)和高爾基體外堆的亞單位定位；軸突和終末明顯為陰性。J.Du，J.-H.的工作。Tao Cheng，P.Zerfas和C.J.McBain，NIH。見(jiàn)《神經(jīng)科學(xué)》，8437-48（1998）。棒=1微米

這些特點(diǎn)使HQ銀成為電子顯微鏡的理想選擇，但由于天然增稠劑的存在，其成分比其他一些銀增強(qiáng)試劑更容易受到微生物的污染，而且其粘稠的性質(zhì)意味著你在使用這種試劑時(shí)可能需要更小心。在使用HQ銀時(shí)，使用這些提示和技巧，將獲得J佳效果。

HQ銀必須儲(chǔ)存在不允許微生物污染和生長(zhǎng)的條件下。如果你打算幾天內(nèi)不使用該試劑，應(yīng)將組分冷凍保存，好是在-20℃。

反復(fù)的凍融循環(huán)會(huì)使增稠劑的性能下降。因此，第1次使用HQ Silver時(shí)，如果將每種成分分成若干等份，每份足以滿足典型實(shí)驗(yàn)運(yùn)行，然后將未使用的等份單獨(dú)冷凍，將在試劑的使用壽命內(nèi)獲得J佳結(jié)果。然后，每次進(jìn)行需要HQ Silver的實(shí)驗(yàn)或一系列的實(shí)驗(yàn)時(shí)，解凍并混合一組等分樣品。

因?yàn)檫@些成分包括不同數(shù)量的增稠劑，它們具有不同的粘度，如果它們被快速分配，分配出相等的數(shù)量可能是一個(gè)挑戰(zhàn)。使用可調(diào)節(jié)的移液器來(lái)吸取和分配所需的量，每種成分使用不同的吸頭，可以獲得J佳效果；慢慢地吸取將有助于避免氣泡的產(chǎn)生。正排量移液器是J好的。緩慢的手動(dòng)吸液實(shí)際上比自動(dòng)吸液更好，因?yàn)樗苁拐吵淼娜芤旱玫礁鼫?zhǔn)確的分裝。B組份（"調(diào)節(jié)劑"）實(shí)際上不包含銀沉積所需的任何成分：因此，如果先分配B組份，然后再分配A和C組份，將確�；旌虾吞砑拥皆嚇又械难舆t時(shí)間J短。

Nanoprobes艾美捷所用的溶劑和緩沖液在使用都經(jīng)過(guò)脫氣處理，以消除溶解氧和形成氣泡的風(fēng)險(xiǎn)。如果有必要攪拌溶液，請(qǐng)使用設(shè)置較低的渦旋器，而不是用手?jǐn)嚢�；如果長(zhǎng)時(shí)間輕輕攪拌（如用印跡或玻片），請(qǐng)使用設(shè)置較低的旋轉(zhuǎn)搖床 - 這些將比手動(dòng)攪拌引入更少的氣泡。

對(duì)于光鏡和印跡的應(yīng)用，如果超微結(jié)構(gòu)的保存和均勻的顆粒大小不是問(wèn)題，應(yīng)該考慮使用LI銀代替。這種試劑的顯影速度更慢，而且由于它是無(wú)色和非粘性的，可以通過(guò)光鏡或其他光學(xué)檢測(cè)方法更容易監(jiān)測(cè)顯影。另外，在某些應(yīng)用中，金增強(qiáng)可能會(huì)有更好的結(jié)果。

Nanoprobes 艾美捷：控制化學(xué)計(jì)量。納戈?duì)柕?span style="font-family: Calibri;">®與生物分子的比例

Nanoprobes Monomaleimido Nanogold、Mono-Sulfo-NHS-Nanogold和Monoamino Nanogold試劑都被配制成每個(gè)金粒子含有接近一個(gè)反應(yīng)性功能；這是通過(guò)Monoamino Nanogold（其他兩種試劑的起始材料）在陰離子離子交換柱上的分離而實(shí)現(xiàn)的，它可以分離出具有不同數(shù)量氨基的金粒子，在我們的標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中，這些試劑以單功能的方式表現(xiàn)。因此，每個(gè)納諾金顆粒將只與一種生物分子反應(yīng)。

當(dāng)用納戈?duì)柕聵?biāo)記時(shí)，你通常應(yīng)該選擇標(biāo)記一個(gè)特色的官能團(tuán)的反應(yīng)，即在生物大分子中只出現(xiàn)一次的官能團(tuán)，如半胱氨酸，而不是在幾個(gè)不同部位出現(xiàn)的官能團(tuán)。

尺寸對(duì)分離很重要。納米金的分子量接近15,000，但它的行為可能類似于較小的蛋白質(zhì)，因?yàn)樗拇蟛糠仲|(zhì)量來(lái)自重金原子。當(dāng)你標(biāo)記一個(gè)較大的生物分子（如抗體或蛋白質(zhì)）時(shí)，我們建議使用少量過(guò)量的納戈?duì)柕�，因�(yàn)閺纳V上看，從共軛產(chǎn)物中分離過(guò)量的小金子通常比分離未標(biāo)記的蛋白質(zhì)要容易。然而，由于每個(gè)生物分子通常只使用1.5到3個(gè)納諾金，而且反應(yīng)產(chǎn)率通常低于100%，這對(duì)每個(gè)蛋白質(zhì)的納諾金標(biāo)簽數(shù)量提出了一個(gè)相對(duì)較低的上限。

當(dāng)標(biāo)記與納戈?duì)柕麓笮∠嗨苹蚋〉姆肿訒r(shí)，你將使用接近1 : 1的納戈?duì)柕拢荷锓肿拥谋壤�，或者�?duì)于較小的分子，使用過(guò)量的小分子。由于納戈?duì)柕率菃喂δ艿�，這就限制了大多數(shù)的標(biāo)記，即使生物分子有多個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，每個(gè)生物分子只有一個(gè)納戈?duì)柕隆?/span>

納米金標(biāo)簽相當(dāng)大：包括其配位配體，它的整體分子直徑約為2.6納米。一旦附著，它就會(huì)阻礙其他納戈?duì)柕略噭┙咏浇奈恢谩＿@也有利于納諾金與共軛生物分子接近1 : 1的比例。

納米金不帶電，但它是可溶的－－它以提供可溶性的方式被功能化，因此它被溶解，而不是僅僅被懸浮。因此，盡管納米金顆粒之間在溶液中沒(méi)有正式的排斥力（與膠體金不同），但納米金顆粒表面對(duì)水溶液的親和力確保它們保持溶解和分離。

這一規(guī)則的一個(gè)例外是NTA-Ni(II)-Nanogold，它具有多個(gè)硝酸三乙酸-鎳（II）功能，以便通過(guò)多個(gè)NTA-Ni(II)獲得的螯合效應(yīng)增加與多組氨酸標(biāo)簽的結(jié)合。他的結(jié)合。在這種情況下，對(duì)化學(xué)計(jì)量的控制通常是通過(guò)使用比His標(biāo)簽的生物分子過(guò)量的納戈?duì)柕聛?lái)實(shí)現(xiàn)的：對(duì)于帶有獨(dú)特His標(biāo)簽的生物分子，過(guò)量的納戈?duì)柕掠欣谛纬?span style="font-family: Calibri;">1：1的共軛物，這是因?yàn)?span style="font-family: Calibri;">His標(biāo)簽的生物分子遇到未結(jié)合的納戈?duì)柕碌母怕矢撸惨驗(yàn)榻Y(jié)合的納戈?duì)柕卤唤Y(jié)合的分子立體地阻礙了。如果你想使用帶正電的納戈?duì)柕禄驇ж?fù)電的納戈?duì)柕逻M(jìn)行標(biāo)記或共軛，也有類似的考慮。

Nanoprobes特色熒光納米金探針在一個(gè)探針中結(jié)合了納米金（Nanogold）和熒光素，用于熒光和電鏡兩種技術(shù)共同進(jìn)行樣品成像。艾美捷科技是Nanoprobes的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

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