- 1X 洗滌緩沖液。用去離子水將10倍的洗滌緩沖液稀釋到1倍。攪拌至均勻。

- 生物素化的抗Cas9抗體和鏈霉菌素-酶結合物。在使用立即將生物素化的抗Cas9抗體和鏈霉蛋白-酶結合物用1:1000的稀釋液稀釋。檢測稀釋液。不要儲存稀釋后的溶液。

艾美捷 Cas9 ELISA檢測試劑盒標準曲線的制備：

在0到100納克/毫升的濃度范圍內(nèi)準備Cas9標準品的稀釋系列（圖1）。

圖1：Pyogenes Cas9標準的制備 

圖2：檢測轉(zhuǎn)染的293細胞中的Cas9。用Cas9的哺乳動物表達載體瞬時轉(zhuǎn)染細胞或模擬轉(zhuǎn)染細胞。哺乳動物表達載體或模擬轉(zhuǎn)染。48小時后，用RIPA緩沖液裂解細胞。并測定蛋白濃度。Cas9 ELISA試劑盒在沒有細胞裂解液的情況下進行。

在沒有細胞裂解液（陰性）、有50納克/毫升Cas9核酸酶（陽性）（NEB目錄號M0386）、有10微克蛋白裂解液（陽性）的情況下進行Cas9酶聯(lián)免疫吸附試驗。存在10µg模擬轉(zhuǎn)染（Mock）或Cas9轉(zhuǎn)染（Cas9）的蛋白裂解液。

艾美捷 Cas9 ELISA檢測試劑盒相關文獻：

1. Heler, R; Samai, P; Modell, J. W.; Weiner, C; Goldberg, G. W.; Bikard, D; Marraffini, L. A.

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2. Jinek, M.; Chylinski, K.; Fonfara, I.; Hauer, M.; Doudna, J. A.; Charpentier, E. (2012). Science.

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3. Mali, Prashant; Esvelt, Kevin M; Church, George M (2013). Nature Meth. 10: 957-963.

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Sriram; Yang, Luhan; Church, George M (2013). Nature Biotech. 31: 833-838.

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Sandra E.; Stern-Ginossar, Noam; Brandman, Onn; Whitehead, Evan H.; Doudna, Jennifer A.;

Lim, Wendell A.; Weissman, Jonathan S.; Qi, Lei S. (2013). Cell. 154: 442-451.

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來源：https://www.amyjet.com/products/PRB-5079.shtml