親和力純化的二抗體有三種不同的形式，好的選擇取決于預期的應用。從整體IgG、F（ab＇）2片段或Fab片段抗體中選擇。整個IgG形式的抗體適用于大多數(shù)免疫檢測程序。

Jackson艾美捷F（ab’）2和Fab抗體可用于具有特定檢測要求的實驗。抗血清尚未進行親和純化。

圖：IgG的消化（大約MW=160 kDa）產生了許多不同的片段。木瓜蛋白酶消化產生兩個單價Fab片段和一個Fc片段，每個片段約50 kDa。胃蛋白酶消化降解Fc結構域，留下分子量約為110 kDa的二價F（ab’）2片段。

整個IgG抗體

通過免疫親和層析從抗血清中分離出整個IgG抗體。它們有一個Fc區(qū)和兩個由二硫鍵連接在一起的抗原結合Fab區(qū)（上圖），因此它們是二價的。據報道，平均分子量約為160kDa。整個IgG形式的抗體適用于大多數(shù)免疫檢測程序，并且J具成本效益。

F（ab＇）2片段抗體

F（ab’）2片段抗體是通過胃蛋白酶消化整個IgG抗體生成的，以去除大部分Fc區(qū)，同時保留部分完整的鉸鏈區(qū)。F（ab’）2片段有兩個通過二硫鍵連接在一起的抗原結合Fab區(qū)域，因此它們是二價的。平均分子量約為110kDa。它們用于特定的應用，例如避免活細胞的次抗體與Fc受體或蛋白質A或蛋白質G結合。

如果一抗體是完整的IgG抗體，則也可能發(fā)生與Fc受體的結合，無論二抗體的形式如何，都會產生背景。為了阻止整個IgG一和二抗體與Fc受體結合，在含有5%標記二抗體宿主正常血清的緩沖液中培養(yǎng)細胞。

為了防止活細胞上Fc受體的覆蓋、內吞和再生，在4°C下，在含有5%正常血清的緩沖液中培養(yǎng)，并添加疊氮化鈉以抑制代謝。關于避免背景的更多信息。

Jackson艾美捷Fab片段二抗體

Fab片段抗體是通過木瓜蛋白酶消化整個IgG抗體產生的，以去除整個Fc部分，包括鉸鏈區(qū)域（上圖）。這些抗體是單價的，只含有一個抗原結合位點。Fab片段的分子量約為50kDa。它們可用于阻斷細胞、組織或其他表面上的內源性免疫球蛋白，并在使用來自同一物種的初抗體的多重標記實驗中阻斷暴露的免疫球蛋白。

Jackson艾美捷FabuLight抗體

FabuLight 抗體是特異于IgG或IgM一抗體Fc區(qū)的Fab片段二抗體。它們能夠在與細胞或組織孵育之標記一抗體，而不會損害一抗體的活性部位。它們也可用于標記細胞表面免疫球蛋白，而無需交聯(lián)和激活B細胞。

抗血清

抗血清通常用于免疫沉淀分析，如免疫擴散和免疫電泳，但不適用于包衣ELISA板或其他需要親和純化抗體的應用。建議使用抗全IgG分子的抗血清（抗IgG（H+L））將PAP橋接至一抗體。

Jackson ImmunoResearch注于親和純化的二抗和純化免疫球蛋白研究，服務于大學科研所和醫(yī)院里的動物研究以及生物醫(yī)學研究機構的科學家。艾美捷科技是Jackson的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質的產品與服務。

來源：https://www.amyjet.com/brand/jackson-china-distributor.shtml