未觀察到血小板生成素 (TPO) 和類似物之間存在顯著的交叉反應(yīng)或干擾。

該試劑盒為檢測小體積樣品而設(shè)計(jì)。

艾美捷Abbexa低樣本量人血小板生成素ELISA試劑盒測定原理：

該試劑盒基于夾心酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù)。將抗體預(yù)涂在 96 孔板上。將標(biāo)準(zhǔn)品、測試樣品和生物素結(jié)合試劑添加到孔中并孵育。然后加入 HRP 偶聯(lián)試劑，并孵育整個(gè)板。在每個(gè)階段使用洗滌緩沖液去除未結(jié)合的結(jié)合物。TMB 底物用于量化 HRP 酶促反應(yīng)。加入 TMB 底物后，只有含有足夠 THPO 的孔才會產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物，然后在加入酸性終止溶液后變?yōu)辄S色。黃色的強(qiáng)度與板上結(jié)合的 THPO 量成正比。光密度 (OD) 在酶標(biāo)儀中以 450 nm 分光光度計(jì)測量，從中可以計(jì)算出 THPO 的濃度。

艾美捷Abbexa 低樣本量人血小板生成素ELISA試劑盒套件：

預(yù)涂層 96 孔微孔板

標(biāo)準(zhǔn)

標(biāo)準(zhǔn)稀釋緩沖液

洗滌緩沖液

檢測試劑A

檢測試劑B

稀釋劑 A

稀釋劑 B

TMB基板

封板機(jī)

艾美捷Abbexa該試劑檢測程序：

此過程僅供參考。應(yīng)按照隨附的說明書使用。

1) 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)、測試樣品和對照孔。

2) 將 25 µl 稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品分裝到標(biāo)準(zhǔn)孔中。

3) 將 25 µl 標(biāo)準(zhǔn)稀釋緩沖液分裝到對照（零）孔中。

4) 將 25 µl 稀釋樣品分裝到樣品孔中。在 37 °C 下孵育 1 小時(shí)。

5) 將 25 µl 檢測試劑 A 分裝到每個(gè)孔中。在 37 °C 下孵育 1 小時(shí)。

6) 洗滌 3 次。

7) 將 25 µl 檢測試劑 B 分裝到每個(gè)孔中。在 37°C 下孵育 30 分鐘。

8)洗滌5次。

9) 將 25 µl TMB Substrate 分裝到每個(gè)孔中。在 37°C 下孵育 10-20 分鐘。

10) 分裝 20 µl 終止液。

11) 在 450 nm 處測量 OD。

結(jié)果計(jì)算：

為了計(jì)算，平均每個(gè)參考標(biāo)準(zhǔn)和每個(gè)樣品的 OD450 重復(fù)讀數(shù)，并減去平均對照（零）OD450 讀數(shù)。標(biāo)準(zhǔn)曲線可以繪制為每個(gè)參考標(biāo)準(zhǔn)溶液的相對 OD450 [Y] 與每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的相應(yīng)濃度 (X)。樣品的 THPO 濃度可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線中插值。

分析精度：

測定內(nèi)精密度（測定內(nèi)精密度）：在塊板上分別測試了 3 個(gè)具有低、中、高水平的血小板生成素 (THPO) 的樣品 20 次。

測定間精密度（測定之間的精密度）：在 3 個(gè)不同的板上測試了 3 個(gè)具有低、中和高水平的血小板生成素 (THPO) 的樣品，每個(gè)板重復(fù) 8 次。

CV (%) = (標(biāo)準(zhǔn)偏差/平均值) × 100

測定內(nèi)：CV<10%

測定間：CV<12%

Abbexa研究工具包括抗、二抗、同型對照、蛋白質(zhì)、酶聯(lián)免疫 （ELISA）試劑盒和酶等生物試劑，與各地的實(shí)驗(yàn)室合作，致力于為生物醫(yī)學(xué)研究市場提供高質(zhì)量科研工具。艾美捷科技是Abbexa的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

來源：https://www.amyjet.com/brand/Abbexa.shtml