艾美捷Abbexa 動物組織 PCR 試劑盒套件內(nèi)容：

零件 100 rxns × 20 µl 系統(tǒng) 500 rxns × 20 µl 系統(tǒng)

AD1 緩沖器 4毫升 20 毫升

AD2 緩沖器 1 毫升 5毫升

AD3 緩沖器 4毫升 2 × 10 毫升

2X PCR SuperMix（含染料） 1 毫升 5×1毫升

無核酸酶水 5毫升 25 毫升

艾美捷Abbexa 動物組織 PCR 試劑盒使用說明：

1.基因組 DNA 提取：

①在即將進行檢測之，以 4:1 的比例制備 AD1/AD2 Buffer 混合溶液（例如 40 µl AD1 Buffer 和 10 µl AD2 Buffer）并徹底混合。50 µl AD1/AD2 緩沖混合溶液足以處理 1 個樣品/反應。該混合物可在室溫下儲存長達 2 小時。

②準備樣品如下：

哺乳動物細胞- 推薦檢測量：≤ 10 6 個細胞

通過離心沉淀細胞并去除上清液。向沉淀中加入 50 µl AD1/AD2 Buffer 混合溶液，并通過上下吹打徹底混合。

唾液或血液- 推薦的檢測量：≤ 10 µl

將唾液或血液加入 50 µl 的 AD1/AD2 緩沖混合溶液中，并通過上下移液器徹底混合。

動物組織- 推薦檢測量：≤ 10 mg（鼠尾：≤ 0.5 cm；鼠耳：≤ 0.5 cm 2）

使用無菌刀片或剪刀將組織切成小塊。加入 50 µl AD1/AD2 Buffer 混合溶液，上下吹打徹底混合。

3.在室溫下靜置 10 分鐘（對于毛發(fā)組織等難以裂解的樣品，可以將樣品混合物在 55 °C 下孵育 10 分鐘），然后在 95 °C 下孵育 3 分鐘。

4.加入 40 µl AD3 Buffer，然后徹底混合。裂解物可用作 PCR 模板，在 2-8 °C 下保存長達 3 個月，或在 -20 °C 下保存長達 6 個月。

2.反應成分：

零件 體積 終濃度

未純化的裂解物 可變（≤ 4 µl） 按要求

正向引物 (10 µM) 0.4微升 0.2 µM

反向引物 (10 µM) 0.4微升 0.2 µM

2X PCR SuperMix（含染料） 10微升 1X

無核酸酶水 多變的 不適用

總?cè)莘e 20微升 不適用

3.熱循環(huán)條件：

循環(huán)次數(shù) 溫度 每個周期的時間

1個周期 94℃ 5-10分鐘

30-35 個周期 94℃ 30

50-60°C 30

72℃ 1-2 kb/分鐘

1個周期 72℃ 5-10分鐘

艾美捷Abbexa 動物組織 PCR 試劑盒使用注意事項：

1.確保樣品和試劑在用于檢測已完全解凍并充分混合。

2.如果觀察到微弱的條帶，請增加 PCR 模板的使用量或增加 PCR 循環(huán)數(shù)（多 40 個循環(huán)）。

3.如果觀察到非特異性擴增條帶，請調(diào)整退火溫度或減少 PCR 模板的使用量。

Abbexa研究工具包括抗、二抗、同型對照、蛋白質(zhì)、酶聯(lián)免疫 （ELISA）試劑盒和酶等生物試劑，與各地的實驗室合作，致力于為生物醫(yī)學研究市場提供高質(zhì)量科研工具。艾美捷科技是Abbexa的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務。

來源：https://www.amyjet.com/brand/Abbexa.shtml