Jackson公司選擇抗的注意事項(xiàng)：

市面上有多種不同形式、克隆性和特異性的抗，這些是選擇合適試劑時(shí)需要考慮的重要因素。

1.特異性——免疫原

用于產(chǎn)生抗體的免疫原類型顯著影響抗體對(duì)靶蛋白的特異性。選擇針對(duì)不合適或質(zhì)量差的免疫原產(chǎn)生的抗體將導(dǎo)致不可靠且可能無法重現(xiàn)的結(jié)果。應(yīng)注意選擇針對(duì)已充分表征的免疫原產(chǎn)生的抗體。

2.肽

合成肽免疫原很少折疊成天然蛋白質(zhì)的類似3結(jié)構(gòu)。此外，除非在合成過程中添加到肽中，否則它們不會(huì)表現(xiàn)出任何翻譯后修飾。因此，使用肽產(chǎn)生的抗體可用作蛋白質(zhì)印跡的有用試劑，因?yàn)橛捎跇悠诽幚磉^程中的變性和還原，靶蛋白具有線性化的表位。當(dāng)抗體需要區(qū)分具有高度保守氨基酸序列的兩種蛋白質(zhì)時(shí)，肽也可用作免疫原。在這些情況下，產(chǎn)生到差異區(qū)域的肽增加了制造差異抗體的可能性。

3.天然蛋白質(zhì)

如果將純化的蛋白質(zhì)用作免疫原，則針對(duì)它們產(chǎn)生的抗體可能無法識(shí)別蛋白質(zhì)印跡中變性蛋白質(zhì)的線性表位。些使用天然蛋白質(zhì)產(chǎn)生的抗體只能識(shí)別蛋白質(zhì)表面的天然氧化構(gòu)象表位。對(duì)于單克隆抗體尤其如此。

抗的宿主種類

理想情況下，抗應(yīng)在與待分析樣品不同的物種中產(chǎn)生。這是為了避免二抗檢測(cè)樣品中的免疫球蛋白（如果存在）。例如，來自小鼠的樣本可能含有小鼠免疫球蛋白。如果抗也在小鼠體內(nèi)制備，則抗小鼠二抗不僅可以檢測(cè)與目標(biāo)蛋白結(jié)合的抗，還可以檢測(cè)小鼠樣品中免疫球蛋白重鏈和輕鏈的結(jié)合。當(dāng)目標(biāo)蛋白質(zhì)的分子量與重鏈 (50 kDa) 或輕鏈 (25 kDa) 相似時(shí)，這可能會(huì)特別成問題，因?yàn)槟繕?biāo)蛋白質(zhì)和內(nèi)源性小鼠 IgG 之間的區(qū)分變得不可能.

Jackson公司單克隆和多克隆抗

單克隆抗體和多克隆抗體均可用于蛋白質(zhì)印跡。單克隆抗體由單個(gè) B 細(xì)胞克隆產(chǎn)生，并產(chǎn)生對(duì)個(gè)表位特異的抗體。而多克隆抗體是由不同的 B 細(xì)胞譜系產(chǎn)生的，因此包含識(shí)別抗原上不同表位的多個(gè)克隆。這兩種類型都有優(yōu)點(diǎn)和局限性（如下表所示）。

Jackson公司抗體驗(yàn)證的注意事項(xiàng)：

每個(gè)抗必須按預(yù)期執(zhí)行，在實(shí)驗(yàn)條件下檢測(cè)感興趣的蛋白質(zhì)。理想情況下，將為每個(gè)新的實(shí)驗(yàn)設(shè)置驗(yàn)證每個(gè)抗和蛋白質(zhì)對(duì)的實(shí)驗(yàn)適用性。在驗(yàn)證過程中應(yīng)解決抗性能的四個(gè)方面。這些是：

1.對(duì)感興趣的抗原/蛋白質(zhì)的特異性

2.在實(shí)驗(yàn)條件下對(duì)抗原的特異性（天然或變性）

3.對(duì)抗原的親和力

4.再現(xiàn)性

Jackson公司注于親和純化的二抗和純化免疫球蛋白研究，服務(wù)域覆蓋各大學(xué)科研所和醫(yī)院里的動(dòng)物研究以及生物醫(yī)學(xué)研究機(jī)構(gòu)的科學(xué)家。艾美捷科技是Jackson公司的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

來源：https://www.amyjet.com/brand/jackson-china-distributor.shtml