為了研究增加酶濃度對反應(yīng)速率的影響，底物必須過量存在；即，反應(yīng)必須與底物濃度無關(guān)。在特定時間段內(nèi)形成的產(chǎn)品量的任何變化將取決于存在的酶水平。從圖形上看，這可以表示為（圖1）：

這些反應(yīng)被稱為“零”，因為速率與底物濃度無關(guān)，并且等于某個常數(shù) k。產(chǎn)物的形成以與時間成線性的速率進行。添加更多的底物不會提高速率。在零動力學(xué)中，允許測定運行雙倍時間會導(dǎo)致產(chǎn)物量翻倍（圖2）。

反應(yīng)中存在的酶量是通過它催化的活性來衡量的。活性和濃度之間的關(guān)系受到許多因素的影響，例如溫度、pH 等。必須設(shè)計酶測定法，以便觀察到的活性與存在的酶量成比例，以便酶濃度是的限制因素。只有當(dāng)反應(yīng)為零時才滿足。

艾美捷worthington影響酶活性的因素說明：

在圖 3中，活動與區(qū)域 AB 中的濃度成正比，但在 BC 中不成正比。當(dāng)?shù)孜餄舛炔皇芟拗茣r，酶活性通常大。當(dāng)酶促反應(yīng)產(chǎn)物的濃度與時間作圖時，會得到類似的曲線，圖4。

在 A 和 B 之間，曲線代表零反應(yīng)；也就是說，速率隨時間恒定的種。隨著底物用完，酶的活性位點不再飽和，底物濃度變?yōu)橄匏�，反�?yīng)變?yōu)?nbsp;B 和 C 之間的反應(yīng)。

為了理想地測量酶活性，必須在反應(yīng)為零的曲線部分進行測量。個反應(yīng)初很可能是零的，因為此時底物濃度高。為了確定反應(yīng)是零的，必須對產(chǎn)物（或底物）濃度進行多次測量。

圖 5 說明了酶分析中可能遇到的三種類型的反應(yīng)，并顯示了如果只進行單次測量可能會遇到的問題。

B是代表零反應(yīng)的直線，它允許準(zhǔn)確測定部分或全部反應(yīng)時間的酶活性。A 代表圖 4 中所示的反應(yīng)類型。該反應(yīng)初是零，然后變慢，可能是由于底物耗盡或產(chǎn)物抑制。這種類型的反應(yīng)有時被稱為“引導(dǎo)”反應(yīng)。真正的“潛在”活動由虛線表示。曲線 C 表示具有初始“滯后”階段的反應(yīng)。虛線再次代表潛在可測量的活動。產(chǎn)品濃度的多次測定可以繪制每條曲線并確定真實活性。

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