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Nanoprobes Ni-NTA-Nanogold-用于 His 標簽標記和檢測

點擊次數(shù):0發(fā)布時間:2022/8/2 16:20:33

Nanoprobes Ni-NTA-Nanogold-用于 His 標簽標記和檢測

更新日期:2022/8/2 16:20:33

所 在 地:中國大陸

產品型號:

簡單介紹:Nanoprobes注于免疫金標記和免疫測定試驗域,為廣大科研機構提供用于檢測生物分子的靈敏的試劑和技術。

相關標簽:Nanoprobes 

優(yōu)質供應

詳細內容

 艾美捷 Nanoprobes Ni-NTA-Nanogold 特點:

1.10 nm Ni-NTA-Nanogold®新的!直接 EM viualization 的佳尺寸 用于嵌入后標記

2.5 nm Ni-NTA-Nanogold®直接進入EM -無需銀/金增強!

3.1.8 nm Ni-NTA-Nanogold®非常適合冷凍電鏡:小的探頭:佳穿透力和高分辨率

 

Ni-NTA-Nanogold ®設計用于使用電子顯微鏡、光學顯微鏡或印跡檢測或定位多組氨酸 (his) 標記的融合蛋白。

 

Ni-NTA-Nanogold ®包含個 1.8 nm 或 5 nm Nanogold® 顆粒,其中多個鎳-次氮基三乙酸官能團結合到金顆粒表面的配體中。鎳-次氮基三乙酸官能團與標記蛋白中的組氨酸結合,并形成具有J低解離常數(shù)的穩(wěn)定復合物。

 

使用Nanoprobes Ni-NTA-Nanogold ®,可以在非變性或變性條件下標記源自多種表達載體中的任何種的帶his標簽的融合蛋白。當與金或銀增強試劑(例如GoldEnhance™或HQ Silver)起使用時,可以通過顯微鏡或印跡觀察標記的帶 hist 標簽的融合蛋白。

 

10 nm Ni-NTA-Nanogold®——無需銀或金增強,同時保留原始 1.8 nm 和 5 nm 探頭的高分辨率。

 

整個探針的大小與未標記的 IgG 分子相似,但較大的金顆?梢栽跊]有銀或金增強的標準 TEM 下清晰可見,即使在較寬的視圖中,例如厚切片和整個細胞。由于較大的金,印跡靈敏度將比較小的尺寸更高。

1.高可見度:10 nm 金顆粒高度單分散,在大多數(shù)沒有銀或金增強的樣品中,在 TEM 分辨率下清晰可見。

2.用于標記任何帶 His 標簽的融合蛋白的通用探針:這簡化了標記,因為它可用于標記許多不同的靶標,而無需生成不同的抗體。它還可以與不同尺寸的金顆;蜚y或金增強的 Nanogold ®起用于多種標記研究。

3.較精確的標記分辨率:次氮基三乙酸 - Ni(II) 螯合物與金表面之間的聯(lián)系比抗體或蛋白質小得多,因此結合的金更靠近其目標:我們估計與金顆粒表面的距離His 標簽的長度約為 2 nm。另外,這是個初探針:沒有二抗體來增加與目標的距離。使用 NTA-Ni(II)-Nanogold ®以分子分辨率定位蛋白質復合物或其他大分子組裝體中的位點。

4.高溶解性、生物相容性和穩(wěn)定性:10 nm Ni-NTA-Nanogold ®是使用穩(wěn)定、高度親水的表面功能化制備的。

5.強結合:Ni(II)-NTA 的結合常數(shù)非常高,這是由于多個組氨酸結合的螯合效應和多個 Ni(II)-NTA 功能的靶結合的結合。解離常數(shù)估計在10 -710 -13 M -1之間。對于許多應用,這提供了與抗體相當?shù)慕Y合強度。

6.高穿透性:10 nm Ni-NTA-Gold 的大小與未標記的抗體 IgG 分子相似,并且比 10 nm 膠體金-抗體偶聯(lián)物小得多。因此,它可以比 10 nm 免疫金探針更好地滲透到樣本中并進入空間受限的內部位點,而無需額外的未標記初質量,并提供更高的標記密度。在某些系統(tǒng)中,它可以用于更強的固定或更少的透化,從而使標記具有更好的超微結構保存。

7.超高靈敏度:當用于檢測印跡上帶有 His 標簽的目標時,較大的金顆粒提供高的靈敏度,幾乎沒有背景。

上圖:NTA-Ni(II)-5 / 10 nm Nanogold ®的結構,顯示了摻入的金屬螯合物與帶 His 標簽的蛋白質的結合。從金顆粒表面到 His 標簽的距離估計為 1.5 nm。上圖:5 nm NTA Nanogold的透射電子顯微照片:平均直徑 5.11±0.84nm。

 

艾美捷 Nanoprobes Ni-NTA-Nanogold ®探針的應用:

1.以納米精度闡明蛋白質結構的混合方法:

由 Wei-hau Chang 博士小組開發(fā)(Chang, 2013)

1)在 cryo-EM 中同時使用 1.8 nm 和 5 nm Ni-NTA-Nanogold® 以獲得更好的單粒子分析

2)結合 FRET 進步完善您的蛋白質圖譜并觀察相互作用過程中的構象/位置變化

2.用于 EM 的鎳染色 His-tags:對含有重組 His-tagged 蛋白質的蛋白質、蛋白質復合物或細胞器進行高分辨率標記,用于 TEM 或 STEM 定位。

3.組織切片中帶His標簽的蛋白質的“通用”預嵌入標記,用于電子顯微鏡觀察。

4.在 Ni-NTA 柱純化過程中識別餾分中的 His 標簽蛋白。

5.檢測印跡和凝膠中的重組 His 標簽蛋白。

6.用于圖像分析和結構求解的規(guī)則結構的重原子標記。

7.用于 EM 的蛋白質融合標簽的金標記

 

Nanoprobes注于免疫金標記和免疫測定試驗域,為廣大科研機構提供用于檢測生物分子的靈敏的試劑和技術。艾美捷科技是Nanoprobes的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質的產品與服務。

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