已從胰腺、蛇和蜜蜂毒液中分離出磷脂酶 A2。福斯特等人。(1986)，陳等人。(1982), Coulard等人。（1987 年）和 Horigome等人。（1987 年）關(guān)于血小板磷脂酶 A2 的報告。Verheij等人已經(jīng)報道了人類胰腺 PLA2 的結(jié)構(gòu)。（1983 年）。

磷脂酶參與脂質(zhì)代謝，是生物膜結(jié)構(gòu)-功能關(guān)系的重要探針。道森 1973 年）。

艾美捷Worthington 磷脂酶 A2化學(xué)性質(zhì)：

組成：

兩種表現(xiàn)出磷脂酶 A 活性的蛋白質(zhì)（A 2- α、A 2- β）已從Crotalus adamanteus中分離出來（Saito 和 Hanahan 1962，以及 Wells 和 Hanahan 1969）。每種蛋白質(zhì)都由二聚體亞基組成（Wells 1971）。這兩種蛋白質(zhì)具有相似的活性，但在色譜和電泳上是不同的。海因里克森等人。(1977) 報道了這兩種酶的獨(dú)特結(jié)構(gòu)特征和磷脂酶 A2-α 的完整氨基酸序列。這兩個亞基在個氨基酸上不同； A 2- α 在殘基 117 處含有谷氨酰胺，而酸性更強(qiáng) 的 A 2- β 在該殘基處含有谷氨酸。

蛋白質(zhì)登錄號：P00623 

分子量：30,000 (Wells 1969)

消光系數(shù)：  消光系數(shù)= 22.7 (Wells 1969)

等電點(diǎn)：A-α 和 A-β 分別為 4.55 和 4.40 (Saito 1962)

活化劑：鈣離子 (Dennis 1973)

抑制劑：鋅、鋇和錳離子（Golec等人1992 和 Uthe 1971）

特異性：該酶特異性催化 L- α 磷酸甘油酯的β-脂肪酯鍵的水解 (Van Deenen 1963)。

艾美捷Worthington 磷脂酶 A2 檢測：

Method : 源自滴定測定程序的磷脂酶 A2 制劑的活性值可能完全取決于卵磷脂的來源和類型、其作為底物乳液的制備、反應(yīng)混合物的其他組分以及使用的方法學(xué)/儀器。文獻(xiàn)中報道的高純度毒液磷脂酶 A2 的值范圍為 200 至 3000 單位/mg。分析系統(tǒng)之間的比較是困難的。已發(fā)現(xiàn)以下測定在我們的實驗室中是可重復(fù)的。在特定條件下，個單元在 pH 8.9 和 25°C 下每分鐘從卵磷脂乳液中釋放 1 個微摩爾可滴定脂肪酸。

試劑：

0.1 M 氯化鈣

1.0 M 氯化鈉

卵磷脂乳液：在 250 ml 燒杯中稱取 4.0 克試劑大豆卵磷脂，加入 30 ml 1.0 M 氯化鈉、10 ml 0.1 M 氯化鈣和 100 ml 試劑水。在 4°C 下攪拌 30 分鐘后，在 Branson 超聲波儀或同等設(shè)備上以大功率對混合物進(jìn)行 10 分鐘的超聲波處理。用試劑水稀釋至終體積為 200 ml。

0.01-0.02 N NaOH - 標(biāo)準(zhǔn)化

酶：

將酶以 1.0 mg/ml 的濃度溶解在試劑水中。在運(yùn)行測定時將此儲備溶液保持在冰上。使用立即在試劑水中進(jìn)行進(jìn)步稀釋。

程序：

可以使用自動滴定儀或?qū)嶒炇?/span> pH 計進(jìn)行滴定。反應(yīng)容器應(yīng)保持在 25°C。

空白率測定：將 15 ml 卵磷脂乳液移入 25°C 的反應(yīng)容器中。將 pH 值調(diào)節(jié)至 8.9，并在獲得恒定速率后記錄將 pH 值保持在 8.9 3-5 分鐘所需的滴定劑體積。將“空白速率”確定為從曲線的后線性部分每分鐘添加的滴定劑體積。

樣品測定：在上述乳液中加入適當(dāng)稀釋的酶。記錄將 pH 值保持在 8.9 4-5 分鐘所需的滴定劑量。從曲線的線性部分確定“采樣率”為每分鐘添加的滴定劑體積。

Worthington核心酶：包括：膠原蛋白酶，脫氧核糖核酸酶I，彈性蛋白酶，木瓜蛋白酶，核糖核酸酶，胰蛋白酶等。

Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學(xué)研究，診斷，生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶，蛋白質(zhì)，核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。