產(chǎn)品展示
Worthington溶菌酶技術(shù)說明及文獻參考
點擊次數(shù):0發(fā)布時間:2022/7/22 16:29:44
更新日期:2022/7/22 16:29:44
所 在 地:中國大陸
產(chǎn)品型號:
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細內(nèi)容
穩(wěn)定性/儲存: 在 2-8°C 下穩(wěn)定 3-5 年。pH 值 4-5 的溶液在冷藏下可穩(wěn)定數(shù)周,在環(huán)境溫度下可穩(wěn)定數(shù)天。儲存在 2-8°C。
艾美捷 Worthington溶菌酶技術(shù)說明:
由于測定差異,Worthington 測定的 8,000u/mg 相當于其他方聲稱的 50,000u/mg。
單位定義:個單位等于在 pH 7.0 和 25°C 下,在 450 nm 下,濁度每分鐘降低 0.001,使用 0.3mg/ml溶血微球菌細胞懸液(WBC 產(chǎn)品代碼 ML)作為底物。
艾美捷 Worthington溶菌酶測定:
Method : Micrococcus lysodeikticus的裂解率按照 Shugar (1952) 的建議進行測定。個單位等于在指定條件下,在 pH 7.0 和 25°C 下,在 450 nm 處濁度每分鐘降低 0.001。據(jù)報道,在這些條件下,純?nèi)芫钢苿┑幕钚苑秶軓V。8,000 u/mg dw 的 Worthington 比活度相當于其他供應(yīng)商聲稱的 50,000 u/mg dw。
試劑:
0.1 M 磷酸鉀,pH 7.0
Micrococcus lysodeikticus細胞:通過將 9 mg 干燥的Micrococcus lysodeikticus(Worthington 代碼:ML)細胞懸浮在 25 ml 0.1 M 磷酸鉀緩沖液(pH 7.0)中進行制備。用相同的緩沖液稀釋至終體積為 30 ml。
酶:
將酶以 1 mg/ml 的濃度溶解在冷試劑水中。保持涼爽直到化驗。在測定立即用試劑水稀釋至 150-500 單位/ml 的濃度。(速率應(yīng)在 0.015-0.040 ΔA 450 /分鐘之間)。
程序:
將分光光度計調(diào)整到 450 nm 和 25°C。
吸取 2.9 ml溶血微球菌細胞懸液到比色皿中,孵育 4-5 分鐘以達到溫度平衡并確定空白率(如果有)。向比色皿中加入 0.1 ml 適當稀釋的酶,并記錄曲線初始線性部分的A 450每分鐘變化。
計算:
艾美捷 Worthington溶菌酶相關(guān)參考文獻:
1.溶菌酶,E。Osserman、R. Canfield 和 S. Beychak,紐約學術(shù)出版社,1974 年
2.Acharya, A. 和 Taniuchi, H.: 溶菌酶二硫化物中間體的結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性對復性機制的影響 , Mol Cell Biochem 44 , 129, 1982
3.Acharya, A. 和 Taniuchi, H.: 溶液條件對硫醇依賴性復性過程中連續(xù)非天然二硫鍵的雞蛋溶菌酶中間體形成的 影響 , J Biol Chem 255、1905、1980
Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學研究,診斷,生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶,蛋白質(zhì),核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。