心肌黃酶是類普遍存在的黃素結(jié)合酶，其催化從還原形式的二和三磷酸吡啶核苷酸即NADH、NADPH中充當(dāng)氫受體的各種染料的還原。種被純化的酶是來(lái)自心肌的酶（Straub 1939）。近二十年后，心臟心肌黃酶被證明與硫辛酰脫氫酶相同（Massey 1958, 1963）。其他心肌黃酶已被描述并從各種細(xì)菌、植物和哺乳動(dòng)物器官中純化。部分純化的克氏梭菌提取物的心肌黃酶活性細(xì)胞，初被描述為 NADH 和 NADPH 氧化酶的來(lái)源（Ciotti 和 Kaplan 1957），在該實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行了觀察，并將其用于脫氫酶和乙醇的耦合比色測(cè)定。（泰勒 1958 年）。這些基于 2,6-二氯苯酚吲哚酚脫色的方法通過(guò)使用還原后顯色的四唑鎓染料進(jìn)行了改進(jìn)。（Brower 和 Woodbridge 1970；Nachlas 等人 1960）。

來(lái)自Cl 的酶。kluyveri 已被 Kaplan、Setlow 和 Kaplan (1969) 純化和表征，他們使用與目的 Worthington 產(chǎn)品等效的起始材料。

艾美捷Worthington克氏梭菌心肌黃酶的特性：

克氏梭菌心肌黃酶的特性：

除非另有說(shuō)明，以下數(shù)據(jù)來(lái)自 Kaplan等人。（1969 年）。

分子量：24,000

蛋白質(zhì)登錄號(hào)：Q97E86（丙酮丁醇梭菌）

組成：該酶每分子含有分子黃素單核苷酸。氨基酸組成已確定。

佳 pH 值：8.5。在 pH 7.4 和 9.4 時(shí)，活性降低了 50%。NADH 和 NADPH 都共享這個(gè)優(yōu)值。

常數(shù)：據(jù)報(bào)道，NADH 的 Km 為 9 X 10 -5，而 NADPH 則低得多。

抑制劑：N-乙基馬來(lái)酰亞胺在濃度低于 5 mM 時(shí)使心肌黃酶失活。

活化劑：我們發(fā)現(xiàn)過(guò)量的黃素單核苷酸 (FMN) 似乎會(huì)輕微刺激與二氯苯酚-吲哚酚的反應(yīng)。

特異性：NADH 或 NADPH 均可用作還原劑。然而，輔酶之間沒(méi)有催化氫交換。氧和細(xì)胞色素 C 都不會(huì)被Cl 還原。克魯維心肌黃酶。

穩(wěn)定劑：NADH、NADPH 和 FMN 保護(hù)酶免受尿素和胍的變性。

穩(wěn)定性：雖然具有合理的穩(wěn)定性，但如果長(zhǎng)時(shí)間保存，干酶應(yīng)儲(chǔ)存在冰箱中。尤其是溶液，應(yīng)始終遠(yuǎn)離強(qiáng)光。

艾美捷Worthington 克氏梭菌心肌黃酶相關(guān)文獻(xiàn)：

1.Ballou, D. 和 Williams, C.：Vincent Massey， 傳記回憶錄，美國(guó)國(guó)家科學(xué)院，2013 年

2.Blaedel, W. 和 Hicks, G.： 反應(yīng)速率連續(xù)測(cè)量的分析應(yīng)用：血清中 的乳酸 ， Anal Biochem 4，476，1962

3.Boethling, R., Weaver, T.： 基于噻唑藍(lán)還原的試劑配方中心肌黃酶活性的新測(cè)定 ， Clin Chem 25，2040，1979

4.Brower, M. 和 Woodbridge, J.：血液中乙醇的快速比色法測(cè)定， AACC Natl Mtg，AACC，1970

Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學(xué)研究，診斷，生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶，蛋白質(zhì)，核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

來(lái)源：https://www.amyjet.com/brand/Worthington.shtml

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彈性蛋白酶丨Worthington 核心酶詳細(xì)參考資料

彈性蛋白酶是種絲氨酸蛋白酶，也可水解酰胺和酯。它在胰腺中作為無(wú)活性的酶原產(chǎn)生，并在十二指腸中被胰蛋白酶激活。以下信息適用于豬彈性蛋白酶。

彈性蛋白酶背景：

Eijkman 被認(rèn)為是個(gè)將彈性蛋白酶作為細(xì)菌產(chǎn)物進(jìn)行研究的人（Eijkman 1904）。然而，直到 1949 年 Baló 和 Banga 發(fā)表之，它并沒(méi)有顯示出與胰腺的其他蛋白水解成分（例如胰蛋白酶和糜蛋白酶）不同。

1968年，Shotton和Hartley率先獲得結(jié)晶豬彈性蛋白酶。在 1960 年代后期和 1970 年代初期，研究了彈性蛋白酶在肺氣腫、動(dòng)脈粥樣硬化和急性出血性胰腺炎中的作用（Janoff 和 Sherer 1968、Janoff 和 Basch 1971、 Talamo等人1971、Kaplan等人1973 和 Bieth等人. 1974)。1974 年，Ardelt 發(fā)現(xiàn)了第二種彈性蛋白酶，將其命名為胰腺“彈性蛋白酶 II”和初的“彈性蛋白酶 I”。

在 1980 年代，研究了彈性蛋白酶的催化特性 (Ascenzi et al . 1983)，并鑒定了抑制劑 (Largman et al . 1980, Lestienne et al . 1981, Kettner ａnd Shenvi 1984, Poncz et al . 1984, ａnd Imperiali and阿貝爾斯 1986 年）。彈性蛋白酶 I 和 II 的遺傳信息被研究到 1990 年代（Ornitz等人1985、Stevenson等人1986、Swift等人1984、Tani等人1987 和 Gestin等人1997）。

彈性蛋白酶近被用于研究細(xì)胞外基質(zhì)分解中的機(jī)械力和酶活性（Jesudason et al . 2010）。還研究了它在人工器官發(fā)育中的用途（Tedder等人2010），并將其用作研究絲氨酸蛋白酶催化活性的模型（Tamada等人2009）。

艾美捷Worthington彈性蛋白酶分子特征：

豬胰彈性蛋白酶由 240 個(gè)氨基酸的單肽鏈組成，并含有 4 個(gè)二硫鍵 (Sawyer et al . 1973)。它與來(lái)自其他物種的胰腺?gòu)椥缘鞍酌妇哂懈叨鹊男蛄型�，例如與其共享 86% 同性的大鼠（MacDonald等人，1982）。彈性蛋白酶 I 和 II 基因具有序列相似性，特別是在 5＇ 近端側(cè)翼區(qū)域，包括 TATA 盒和假定的組織特異性增強(qiáng)子序列（Ornitz等人1985、Stevenson等人1986、Swift等人1984， Tani等人1987 和 Gestin等人1997）。

艾美捷Worthington 彈性蛋白酶化學(xué)性質(zhì)：

蛋白質(zhì)登錄號(hào)：  P00772

分子量：26.0 kDa (比思 2004)

佳pH值：8.5

等電點(diǎn)：9.5（比思 2004）

消光系數(shù)：

54,870 cm-1 M-1（理論值）

E1%, 280 = 21.18 (理論)

活性位點(diǎn)殘基：

組氨酸 (H71)

天冬氨酸 (D119)

絲氨酸 (S214)

抑制劑：

被丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸的二肽衍生物競(jìng)爭(zhēng)性抑制

天然來(lái)源的抑制劑（例如絲氨酸蛋白酶抑制劑）（Tsunemi等人1996、Matern等人2003 和 Dementiev等人2006）

改性天然抑制劑（Ay等人2003 和 Hilpert等人2003）

硫酸鹽修飾的脂質(zhì) (Ito et al . 1998)

艾美捷Worthington 彈性蛋白酶相關(guān)文獻(xiàn)：

1.組織解離：因?yàn)閺椥缘鞍自诮Y(jié)締組織的彈性纖維中的濃度高，所以經(jīng)常使用彈性蛋白酶解離含有廣泛細(xì)胞間纖維網(wǎng)絡(luò)的組織。為此，它通常與其他酶起使用，例如膠原酶、胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶。

2.膜蛋白溶解

3.蛋白質(zhì)序列研究

Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學(xué)研究，診斷，生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶，蛋白質(zhì)，核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

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