艾美捷肌動蛋白（牛心臟 muscle）采用Pardee和Spudich法從牛心肌中純化肌動蛋白。牛心臟肌動蛋白由84%的α心臟肌動蛋白和16%的α骨骼肌動蛋白亞型組成，分子量約為43 kDa。牛心臟肌動蛋白純度大于99%，以白色凍干粉末的形式提供。

艾美捷肌動蛋白（牛心臟 muscle）生物活性測定：

心臟肌動蛋白的生物活性可以通過其在體外有效聚合成細絲并在降速分析中與未聚合成分分離的能力來確定。嚴格的質(zhì)量控制確保在該試驗中，90%以上的肌肉肌動蛋白可以聚合。

艾美捷肌動蛋白（牛心臟 muscle）試劑：

1、牛心臟肌動蛋白（Cat.#AD99）

般肌動蛋白緩沖液（5 mM Tris-HCl pH 8.0，0.2 mM CaCl2；類別#BSA01）

3、聚合緩沖液（500 mM KCl，20 mM MgCl2，10 mM ATP；類別#BSA02）

4.ATP，100 mM溶液（類別#BSA04）

5.1 M DTT（二硫蘇糖醇）

6、精密紅色蛋白分析試劑（Cat.#ADV02）

艾美捷肌動蛋白（牛心臟 muscle）所需設備：

1、4°C下的微凝膠

2、Beckman Airbuge和Ultra Clear™ 離心管（Cat.#344718）、貝克曼超離心機和SW 55 Ti轉(zhuǎn)子，帶Ultra Clear™ 離心管（第344718類）和適配器（第356860類），或其他能夠在100000 x g下離心200µl的超離心機。

3、能夠在600 nm處測量吸光度的分光光度計。

方法：

1.在補充有0.2 mM ATP和0.5 mM DTT的普通肌動蛋白緩沖液中，將心臟肌動蛋白稀釋至0.4 mg/ml。

2、在冰上培養(yǎng)1小時，以解聚儲存期間形成的肌動蛋白低聚物。

3、將蛋白質(zhì)在4°C微凝膠中以14k rpm離心15分鐘。

4、將上清液轉(zhuǎn)移到新的微濾管中，并用精密紅色蛋白質(zhì)分析試劑測定總蛋白質(zhì)濃度。將等份200µl肌動蛋白溶液放入超離心管中。

6、向每個充氣管中添加20µl（體積的1/10）聚合緩沖液，并充分混合。

7、在室溫下培養(yǎng)1小時。

8、在100000 x g的條件下離心試管1小時，使聚合肌動蛋白顆�；�。

9、將每根試管頂部90%的上清液移到干凈的微濾管中。

10、用精密紅蛋白分析試劑測定上清液（未聚合單體肌動蛋白）中蛋白質(zhì)的濃度。該蛋白質(zhì)濃度用于確定離心期間肌動蛋白聚合和顆粒化的效率。

來源：https://www.amyjet.com/products/AD99-B.shtml