Ras 超家族的小 G 蛋白通常具有內(nèi)在的 GTPase 活性，這意味著在它們被 GEF 激活（GTP 結(jié)合）后，它們終會“自行關(guān)閉”。然而，內(nèi)在的 GTPase 速率通常非常緩慢，因此“自動”關(guān)閉過程可能需要長達數(shù)小時。

由于大多數(shù) Ras 超家族 GTP 酶的內(nèi)在 GTP 酶活性較慢，因此它們的 GAP 是重要的信號分子，其功能是終止其信號傳導(dǎo)。GAP 通過與其靶 G 蛋白的活性、GTP 結(jié)合形式結(jié)合并J大地刺激 G 蛋白的內(nèi)在 GTP 酶活性而發(fā)揮作用，從而迅速關(guān)閉 G 蛋白。

Cytoskeleton 艾美捷 GAP 檢測試劑盒可測量因 GTP 依賴 G 蛋白水解為 GDP + P i而產(chǎn)生的無機磷酸鹽 (P i ) 的量。該試劑盒包含檢測所需的所有試劑，包括 GTP 酶、陽性對照 RhoGAP、精心優(yōu)化的緩沖液和磷酸鹽檢測試劑。該測定可以在 96 孔板或 384 孔板中進行。96 孔格式有足夠的試劑用于 80 次測定（每種提供的 GTPase 20 次）和 384 孔格式的 160 次測定（每種提供的 GTPase 40 次）

Cytoskeleton 艾美捷該試劑盒包含 Cdc42、Rac1、RhoA 和 Ras 蛋白，但它也可用于任何其他 Ras 超家族 GTPase。

Cytoskeleton 艾美捷RhoGAP 檢測試劑盒用途包括：

1.確定未表征的 GAP 的活性和 GTPase 特異性。

2.小 GTP 酶及其相關(guān) GAP 的生化表征。

3.檢查不同輔因子或蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域?qū)?nbsp;GAP 活性的調(diào)節(jié)。

4.篩選 GAP 或 GTPase 的突變蛋白的活性和底物特異性。

5.以 HTS（高通量篩選）形式鑒定 GAP 抑制劑。

Cytoskeleton 艾美捷該示例結(jié)果：

測試了添加和不添加 p50RhoGAP 催化結(jié)構(gòu)域的 RhoA 的 GTPase 活性（如下圖）。

圖： RhoA 蛋白對 GTP 水解測量的 RhoGAP 活性。每個反應(yīng)包含反應(yīng)緩沖液 + GTP，并添加單獨的 RhoA (RhoA)、單獨的 RhoGAP (GAP) 或 RhoA + RhoGAP (RhoA + GAP)。反應(yīng)在 37°C 下孵育 20 分鐘。通過添加 CytoPhos™ 試劑并讀取 650 nm 處的吸光度來測量 GTP 水解產(chǎn)生的磷酸鹽。

Cytoskeleton相關(guān)研究工具：

RhoGEF 交換試驗 (BK100)

Rho 抑制劑 I（CT04）

羅丹明鬼筆環(huán)肽（PHDR1）

Rho 激活劑 I（CN01）

Cytoskeleton 覆蓋肌動蛋白，微管蛋白，馬達蛋白，小G蛋白，細胞外基質(zhì)，活細胞成像等相關(guān)域，提供對應(yīng)的蛋白質(zhì)，抗體，檢測與分析試劑盒。艾美捷科技是Cytoskeleton的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。