Columbia Biosciences艾美捷SureLight Glow 螢火蟲熒光素酶細胞活力測定試劑盒組分：

1.螢火蟲螢光素酶（凍干）

2.D-熒光素（凍干）

3.裂解緩沖液（冷凍）

Columbia Biosciences艾美捷螢火蟲螢光素酶細胞活力檢測試劑制備：

1.解凍緩沖液；平衡至室溫

2.用緩沖液重構(gòu)凍干酶/底物

3.通過渦旋或輕輕顛倒混合

Columbia Biosciences艾美捷螢火蟲螢光素酶細胞活力檢測方案：

1.在培養(yǎng)基中制備含有哺乳動物細胞的不透明壁多孔板（例如，對于 96 孔板，每孔 100 µl）

2.制備含有無細胞培養(yǎng)基的對照孔

3.將測試化合物添加到實驗孔中并根據(jù)細胞培養(yǎng)方案進行孵育

4.在室溫下平衡板及其內(nèi)容物，大約 15-30 分鐘

5.在每個孔中添加與含有細胞的培養(yǎng)基體積相等的細胞活力試劑（例如，100ul 試劑加入 100ul 細胞培養(yǎng)基）

6.在軌道振蕩器上混合內(nèi)容物以誘導細胞裂解

7.讓板在室溫下孵育 5-15 分鐘以穩(wěn)定發(fā)光信號

8.在光度計上讀取結(jié)果

左：活細胞數(shù)量與發(fā)光信號的相關(guān)性。在 100 µl RPMI-1640/10% FBS 培養(yǎng)基中制備兩倍連續(xù)稀釋的 THP-1 細胞（每孔 50,000 至 49 個細胞）。向每個孔中加入 100 µl 試劑，反應在室溫下孵育 15 分鐘。在發(fā)光計上測量發(fā)光信號并以相對光單位 (RLU) 表示。

右：發(fā)光信號隨時間的穩(wěn)定性。將等量 (100 µl) 的細胞活力試劑添加到 100 µl RPMI1640/10% FBS 培養(yǎng)基（活細胞）中的 50,000 個 THP-1 細胞中或僅添加到培養(yǎng)基（對照；無細胞）中。在發(fā)光計上的指定時間段內(nèi)每 10 分鐘監(jiān)測次發(fā)光信號。

Columbia Biosciences相關(guān)研究：

SureLight® 銪胺反應性標記試劑盒  AD-EU-ITC-100

Cyclic AMP TR-FRET 試劑盒，1000 次測試  AD-cAMP-1K

Columbia Biosciences 致力于開發(fā)和生產(chǎn)熒光蛋白，標記抗體和新型蛋白質(zhì)純化配體。長在于培養(yǎng)藻類、提取和純化染料以及將這些和其他熒光團與抗體結(jié)合。艾美捷科技是Columbia Biosciences 的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務。

來源：https://www.amyjet.com/brand/Columbia-Biosciences.shtml