293/Cas9細胞系穩(wěn)定表達Cas9和嘌呤霉素抗性基因。利用逆轉(zhuǎn)錄病毒將Cas9和嘌呤霉素抗性基因?qū)胗H代293細胞。

Cell Biolabs

Cell Biolabs：細胞學試劑品牌，為生物技術和研究類客戶提供基于細胞功能研究以及疾病等方面的技術和服務。主要涵蓋細胞研究、細胞信號通路和蛋白質(zhì)生物學、代謝研究、病原體和毒素、干細胞研究等域。

Cell Biolabs / 艾美捷 293/Cas9細胞系表達Cas9蛋白。293個細胞或293/Cas9細胞用酶裂解RIPA緩沖液，并使用Cell Biolab的Cas9 ELISA試劑盒（Cat#PRB-5079）檢測Cas9蛋白水平（見下圖）。

Cell Biolabs 293/Cas9細胞，通過形態(tài)學測定，臺盼藍染料排除，活細胞計數(shù)。293/Cas9細胞已經(jīng)過測試，沒有微生物污染。

1.培養(yǎng)基：DMEM（高糖），10%胎牛血清（FBS），0.1 mM MEM非必需氨基酸（NEAA），2 mM L-谷氨酰胺，1%Pen-Strep，（可選）1-2µg/mL嘌呤霉素。

2.冷凍培養(yǎng)基：70%DMEM、20%FBS、10%DMSO。

從冷凍細胞建立293/Cas9培養(yǎng)基

1.將10毫升完整的DMEM生長培養(yǎng)基置于50毫升錐形管中。解凍冰凍的食物在37°C水浴中輕輕攪拌，在1-2分鐘內(nèi)將細胞冷凍。凈化空氣用70%（v/v）乙醇擦拭冷凍瓶表面。

2.將解凍的細胞懸浮液轉(zhuǎn)移到含有10mL生長培養(yǎng)基的錐形管中。

3.在室溫下，以1000 rpm的轉(zhuǎn)速離心5分鐘，收集細胞。移除通過抽吸生長培養(yǎng)基。

4.通過輕輕移液，將細胞重新懸浮在錐形管中的15ml新鮮生長培養(yǎng)基中然后下來。

5.將15 mL細胞懸浮液轉(zhuǎn)移至T-75組織培養(yǎng)瓶中。將電池置于37°C的溫度下培養(yǎng)箱中的二氧化碳濃度為5%。

6.每天監(jiān)測細胞密度。細胞應在培養(yǎng)物達到95%匯合時傳代。

Cell Biolabs 相關試劑盒研究方案：

1.CBA-100：細胞選擇™ 24孔細胞遷移試驗（8µm，比色法）

2.CBA-106：細胞選擇™ 96孔細胞遷移分析（8µm，熒光法）

3.CBA-120：細胞選擇™ 24孔傷口愈合試驗（顯微鏡）

4.CBA-125：半徑™ 24孔細胞遷移分析（顯微鏡）

5.CBA-126：半徑™ 96孔細胞遷移分析（顯微鏡）

艾美捷科技是Cell Biolabs的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務。