Lumiprobe

Lumiprobe 業(yè)提供分子生物學(xué)研究用的活性熒光染料。覆蓋域有：活性染料（ReactiveDye）和SYBRGreen I染料，定制合成熒光雙標(biāo)記引物。主要應(yīng)用：點(diǎn)擊化學(xué)（CLickChemistry）、蛋白質(zhì)組學(xué)研究中的雙向熒光差異凝膠電泳（2DDIGE）和實(shí)時熒光定量PCR（ReaLtimePCR）。

接下來給大家介紹下Lumiprobe /艾美捷 抗體標(biāo)記試劑盒的相關(guān)內(nèi)容：

1.抗體制備

標(biāo)記反應(yīng)的佳條件如下：濃度為1 mg/mL的抗體溶解在0.1 M碳酸氫鈉溶液中。疊氮化鈉與標(biāo)簽相容。如果抗體濃度低于1 mg/mL，則應(yīng)進(jìn)行濃縮�？贵w制備應(yīng)不含氨基酸、蛋白質(zhì)（如BSA）和緩沖成分，這些成分會使pH值處于不利（2-7.5或9-12）范圍。

2.建立反應(yīng)

2.1. 向熒光團(tuán)、旋渦中添加碳酸氫鈉抗體溶液（100微克/100微升*），并在室溫下培養(yǎng)30分鐘。

*如果要標(biāo)記少量抗體，將凍干染料溶解在10微升無水二甲基亞砜中，每10微克抗體取1微升溶液。應(yīng)立即消耗DMSO中的染料溶液。

3.標(biāo)記抗體的純化

3.1. 準(zhǔn)備欄。使用，色譜柱應(yīng)在室溫下。應(yīng)使用漩渦重新懸浮凝膠。將色譜柱放入廢物容器（無蓋），并在1000 g下離心2分鐘（必須小心控制速度-對于標(biāo)準(zhǔn)6 cm轉(zhuǎn)子，1000 g=3800 rpm）。立柱的小凸起應(yīng)朝外。

3.2. 應(yīng)用400微升1x PBS緩沖液，以1000 g離心2分鐘。

3.3. 從廢物容器上拆下柱。將其放入收集管（帶蓋）。將100微升反應(yīng)混合物施加到柱上，培養(yǎng)1分鐘，并通過離心以1000 g的速度洗脫抗體2分鐘。添加1/100體積的100倍疊氮化鈉�？贵w可以等分以提高其保存期。當(dāng)?shù)确衷嚇涌蓛Υ嬖?span style="font-family: Calibri;">+4°С的溫度下，其余等分試樣可儲存在+4°С的溫度下−20 °С.

4.染料與抗體比率的測量

為了計算染料與抗體的比率，測量共軛物的吸收光譜，或在280 nm（AAB）和染料吸收大值（ADye）處的吸收。染料標(biāo)記抗體的典型吸收光譜如下所示。根據(jù)染料的不同，大波長可能會有所不同。

Lumiprobe 部分研究工具：

cat# 名稱 規(guī)格

11030 Cy3 azide 100ul

12030 Cy3.5 azide 100ul

13030 Cy5 azide 100ul

14030 Cy5.5 azide 100ul

14130 FAM azide,5-isomer, 100ul

11130 JOE azide,5-isomer 100ul

14230 R110 azide,5-isomer 100ul

12230 ROX azide,6-isomer 100ul

17130 TAMRA azide, 5-isomer 100ul

33720 Azidobutyric acid NHS ester 100ul

艾美捷科技是Lumiprobe 的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。