中文名稱細(xì)胞永生化試劑

供應(yīng)商GeneCopoeia

產(chǎn)品貨號LPP-Mm01438-Lv153-100-C

產(chǎn)品報價￥1200/100 ul （25 ul x 4管）

 

背景資料：

原代細(xì)胞經(jīng)過一定數(shù)量的增殖，和一定次數(shù)的分裂后達(dá)到復(fù)制衰老的狀態(tài)，從而限制了衰老或受損細(xì)胞的增殖。GeneCopoeia提供細(xì)胞永生化試劑，利用重組慢病毒攜帶基因，如simian virus 40 (SV40)大T抗原和人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶蛋白(hTERT)誘導(dǎo)永生化，可顯著延長原代細(xì)胞的壽命。

 

產(chǎn)品描述：

GeneCopoeia Lentifect™ 純化慢病毒生產(chǎn)經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)流程，使用高質(zhì)量質(zhì)粒DNA提取試劑盒、EndoFectin™ 轉(zhuǎn)染試劑及TiterBoost™ 慢病毒滴度增強(qiáng)試劑。使用第三代自失活包裝系統(tǒng)，符合2級生物安全等級的要求。

永生化慢病毒由CMV/EF1α啟動永生化誘導(dǎo)基因的有效表達(dá)，并帶有篩選抗性。

提供25 μl*4管約108 TU/ml的慢病毒。慢病毒進(jìn)行干冰寄送，請收到后立即放到-80℃保存。避免反復(fù)凍融影響病毒滴度。

慢病毒表達(dá)結(jié)構(gòu)經(jīng)過全長測序、酶切、用基因特異性引物和載體特異性引物進(jìn)行PCR大小驗(yàn)證。慢病毒產(chǎn)品無細(xì)菌、真菌及常見支原體污染。

 

細(xì)胞永生化實(shí)驗(yàn)操作：

原代細(xì)胞鋪板，6孔板，0.5-2 x105/孔

將凍存在-80℃的慢病毒取出，冰浴融化

使用GFP慢病毒感染原代細(xì)胞，明確細(xì)胞MOI，以及明確細(xì)胞藥物篩選*小致死濃度后，使用永生化慢病毒感染細(xì)胞。

感染第二天，更換新鮮細(xì)胞培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。

感染72小時后，更換帶有篩選抗性的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。

得到篩選抗性陽性細(xì)胞克隆后，即可進(jìn)行永生化測試。

 

艾美捷科技與國內(nèi)外優(yōu)秀的生物試劑供應(yīng)商優(yōu)保持著密切的合作關(guān)系，目前已成為眾多知名品牌的中國總代理或一級代理，主要包括：AmyJet、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、CytoNiChe、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、LigaTrap、ProSpec、Norgen Biotek、Mabtech、Matreya、iRegene、StressMarq、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Solis BioDyne等，可以在短時間內(nèi)為用戶提供專業(yè)的前沿資訊、完備的產(chǎn)品及物流服務(wù)。

 

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