產(chǎn)品展示
高質(zhì)量EZRecombinase BP混合物
點(diǎn)擊次數(shù):0發(fā)布時間:2020/7/30 15:44:55

更新日期:2020/7/30 15:44:55
所 在 地:中國大陸
產(chǎn)品型號:RCBM-1002-100
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細(xì)內(nèi)容
在過去數(shù)十年,用限制性內(nèi)切酶產(chǎn)生黏性末端,在DNA連接酶的作用下,連接兩個甚至更多片段的克隆方法,是載體構(gòu)建的經(jīng)典方案。但是現(xiàn)如今我們再提到克隆的時候,遠(yuǎn)遠(yuǎn)不再只有傳統(tǒng)的限制酶克隆一種選擇。其中Gateway克隆技術(shù)作為一種可以快速、高效將DNA序列轉(zhuǎn)移到載體上的克隆方法已經(jīng)流行開來。不要覺得Gateway克隆技術(shù)高深莫測,其實(shí)了解一下你就能懂。
Gateway克隆方法是λ噬菌體感染細(xì)菌時發(fā)生的整合和切割重組反應(yīng)的體外形式。在體內(nèi),噬菌體(attP)和細(xì)菌(attB)的附著位點(diǎn)發(fā)生重組反應(yīng),噬菌體整合到細(xì)菌基因組中,兩側(cè)為兩個新的重組位點(diǎn)(attL-left-和attR-right-)。在某些條件下,attL和attR位點(diǎn)可以重組,導(dǎo)致噬菌體從細(xì)菌染色體上切除并重新生成attP和attB位點(diǎn)。
即Gateway技術(shù)依賴于下面描述的兩個反應(yīng):BP反應(yīng)和LR反應(yīng),通過BP反應(yīng)獲得入門克隆(有時候我們也說中間克隆),再通過LR反應(yīng)將目的DNA以正確的方向連接到各種目的載體上,形成不同的表達(dá)載體。GeneCopoeia提供的 EZShuttle™重組克隆體系應(yīng)用E.coli和λ噬菌體特異位點(diǎn)的重組酶促體系使 DNA丨片段在載體間相互轉(zhuǎn)換,其原理與 Gateway克隆技術(shù)相同。
BP反應(yīng)-構(gòu)建入門載體:
通過PCR將attB位點(diǎn)添加到目的DAN序列兩側(cè),形成attB-PCR產(chǎn)物。用attB-PCR產(chǎn)物或者含attB位點(diǎn)的供體質(zhì)粒和含attP位點(diǎn)的質(zhì)粒發(fā)生重組生成入門克隆。
貨號 | 名稱 | 說明 |
EZRecombinase™ BP Cloning Kit (20 rxn) | Catalyzes attB x attP cloning(催化BP反應(yīng)) | |
EZRecombinase™ BP Cloning Kit (100 rxn) | Catalyzes attB x attP cloning(催化BP反應(yīng)) |
LR反應(yīng)-構(gòu)建表達(dá)載體:
制作表達(dá)載體時,選擇適合的目標(biāo)載體非常重要。這種選擇取決于許多因素,如宿主類型,所需的表達(dá)水平和實(shí)驗?zāi)康摹_x定的attR表達(dá)載體與attL-入門載體重組以產(chǎn)生表達(dá)載體。
貨號 | 名稱 | 說明 |
EZRecombinase™ LR Cloning Kit (20 rxn) | Catalyzes attL x attR cloning(催化LR反應(yīng)) | |
EZRecombinase™ LR Cloning Kit (100 rxn) | Catalyzes attL x attR cloning(催化LR反應(yīng)) |
除了可以提供載體構(gòu)建的BP Mix和LR Mix,GeneCopoeia還可提供40,000多種人和小鼠不同載體的即用型ORF表達(dá)克隆(可直接用于體內(nèi)或體外不同宿主或表達(dá)系統(tǒng)的蛋白表達(dá),省卻克隆構(gòu)建步驟),以及20,000種人和15,000小鼠Gateway PLUS入門克。ㄟ需要進(jìn)行亞克隆,將ORF序列轉(zhuǎn)移到表達(dá)克隆中)。你的基因我承包,不管你是需要構(gòu)建好的表達(dá)克隆,還是入門克隆,不要猶豫,請聯(lián)系艾美捷科技,全方位科研需求的表達(dá)系統(tǒng)以及眾多的融合標(biāo)簽可以滿足您的花樣需求
全方位科研需求的表達(dá)系統(tǒng)
大腸桿菌表達(dá)克隆 | 15種 |
哺乳動物細(xì)胞表達(dá)克隆 | 48種 |
慢病毒表達(dá)克隆 | 82種 |
昆蟲細(xì)胞表達(dá)克隆 | 1種 |
酵母表達(dá)克隆 | 3種 |
麥胚無細(xì)胞表達(dá)克隆 | 8種 |
眾多的融合標(biāo)簽
熒光蛋白標(biāo)簽 | eGFP、eYFP、eCFP、mCherry |
多功能標(biāo)簽 | HaloTag®、AviTag™、SNAP- Tag™ |
促溶解度標(biāo)簽 | His、Trx、SUMO、GST、MBP |
抗體免疫共沉淀標(biāo)簽 | HA、Flag、cMyc |
艾美捷科技與國內(nèi)外優(yōu)秀的生物試劑供應(yīng)商優(yōu)保持著密切的合作關(guān)系,目前已成為眾多知名品牌的中國總代理或一級代理,主要包括:AmyJet、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、CytoNiChe、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、LigaTrap、ProSpec、Norgen Biotek、Mabtech、Matreya、iRegene、StressMarq、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Solis BioDyne等,可以在短時間內(nèi)為用戶提供專業(yè)的前沿資訊、完備的產(chǎn)品及物流服務(wù)。
http://www.amyjet.com/featured/gateway.shtml