ELISA酶聯(lián)法試劑盒操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗一般均用板式點。本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用，兩者均有詳細(xì)的使用說明，嚴(yán)格遵照規(guī)定操作，必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果。齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

首先齊一生物優(yōu)質(zhì)的試劑盒，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠必要條件。所以ELISA試劑盒的購買，試劑質(zhì)量的保證以及實驗前實驗儀器的檢察都是很有重要性的。保證實驗材料的質(zhì)量之后要嚴(yán)格按照實驗步驟進(jìn)行。齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

【人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒】齊一生物ELISA試劑盒

1.精心挑選的進(jìn)口抗體、標(biāo)準(zhǔn)品、顯色劑和酶標(biāo)板全部為進(jìn)口產(chǎn)品實現(xiàn)*佳性能；

2.原材料批量進(jìn)口加上自配的特殊配方稀釋劑保證高品質(zhì)產(chǎn)品性能的同時兼顧成本；

3.采用技術(shù)，嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)方案組裝生產(chǎn)；

4.預(yù)包被微孔板的批內(nèi)和批間變異系數(shù)均小于10 ％；

5.經(jīng)過嚴(yán)格交叉反應(yīng)和干擾測試及穩(wěn)定性試驗；

6.明確的敏感度；

7.針對所有樣品類型達(dá)到*佳的性能；

8.廣泛的檢測范圍可以滿足大多數(shù)檢測要求；

9.完善的售后服務(wù)和免費(fèi)的技術(shù)支持免去您的后顧之憂；

10.強(qiáng)大的生產(chǎn)能力和充足的儲備、操作熟練的技術(shù)人員及高效的生產(chǎn)流程，隨時可以組裝出您定制的產(chǎn)品。

【人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒】齊一生物僅供實驗人、大鼠、小鼠、兔等動物實驗標(biāo)本檢測使用！得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細(xì)閱讀購買說明！齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

ELISA試劑盒問題描述

標(biāo)準(zhǔn)曲線梯度差：

吸液或加液不準(zhǔn)請檢查移液器及吸頭

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋不正確溶解標(biāo)準(zhǔn)品稍微旋轉(zhuǎn)瓶身，輕輕混勻使粉末完全溶解

洗滌不完全保證洗滌時間和洗滌次數(shù)及每孔的加液量

顯色很弱或無色：

孵育時間太短保證充足的孵育時間

實驗溫度不正確使用推薦的實驗溫度

試劑體積不夠或漏加、稀釋不正確檢查吸液及加液過程，保證所有試劑按順序足量添加

讀數(shù)數(shù)值低：

酶標(biāo)儀設(shè)置不正確 在酶標(biāo)儀上檢查波長及濾光片設(shè)置

提前打開酶標(biāo)儀預(yù)熱：變異系數(shù)大加液不正確檢查加液情況

【人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒】背景值高：

檢測抗體的工作濃度使用推薦的稀釋倍數(shù)

酶標(biāo)板洗滌不完全重新閱讀操作手冊，保證清洗完全；如果用自動洗板機(jī)，請檢查所有的出口是否有堵塞

洗液有污染配制新鮮的洗液

靈敏度低：

ELISA試劑盒保存按說明書要求保存相關(guān)試劑

讀數(shù)前未終止OD讀數(shù)前應(yīng)在每孔中加入終止液

齊一生物客戶寄標(biāo)本時需注明以下情況：

1、標(biāo)本編號；2、所測項目；3、是否做復(fù)孔；3、聯(lián)系方式；4、實驗后標(biāo)本是否寄回。

客戶必知：

客戶應(yīng)對所提供的材料及信息負(fù)責(zé)，如因客戶提供的材料及信息不準(zhǔn)確而引起的實驗延誤或經(jīng)濟(jì)損失由客戶承擔(dān)。

試劑盒樣本要求

在收集標(biāo)本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測，對收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的標(biāo)本，及時儲存在4℃?zhèn)溆�，如有特殊原因需要周期收集�?biāo)本，請造模取材后，將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差，蛋白極易降解，直接影響實驗質(zhì)量，所以避免反復(fù)凍融。具體操作注意事項請與我司技術(shù)人員溝通。齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

【人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒】液體類標(biāo)本：標(biāo)本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心。

3. 尿液、胸腹水、腦脊液：用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。

5. 培養(yǎng)細(xì)胞:檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

6. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶）。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清置于-20度或-70度保存，如有必要，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

7. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

8.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

9.如果樣品不能立即檢測，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解

凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

QY-HC0151    人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 SK-N-SH  SK-N-SH                            

QY-HC0152    人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H358 NCI-H358                                 

QY-HC0153    人肺腺癌細(xì)胞 NCI-H1975   NCI-H1975                                

QY-HC0154    人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞 DAMI   DAMI                                

QY-HC0155    人支氣管上皮細(xì)胞 HBE      HBE                            

QY-HC0156    人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 A172 A172                                  

QY-HC0157    人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤細(xì)胞 RT4      RT4                            

QY-HC0158    人乳腺腺癌細(xì)胞 MDA-MB-436  MDA-MB-436                            

QY-AC1446    大鼠心肌細(xì)胞 H9C22-1       H9C22-1CRL-1446                            

QY-AC9.1       小鼠肝上皮細(xì)胞 NCTC clone 1469 [derivative of NCTC 721   NCTCclone1469[derivativeofNCTC721CCL-9.1                             

QY-AC34 馬-達(dá)二氏犬腎細(xì)胞系 MDCK NBL-2 MDCKNBL-2CCL-34                               

QY-AC2528    豬鼻甲黏膜成纖維細(xì)胞 PT-K75 PT-K75CRL-2528                             

QY-AC2389    小鼠胰腺癌細(xì)胞 LTPA LTPACRL-2389                                 【人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒】

QY-AC2132    大鼠胰腺癌細(xì)胞 DSL-6A/C1     DSL-6A/C1CRL-2132                               

QY-AC2016    小鼠骨髓瘤B淋巴細(xì)胞 SP2/MIL-6   SP2/MIL-6CRL-2016                               

QY-AC2005    大鼠腦間質(zhì)細(xì)胞 DI TNC1  DITNC1CRL-2005                            

QY-AC1772    小鼠肌原細(xì)胞 C2C12   C2C12CRL-1772                               

QY-AC173      小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 3T3-L1     3T3-L1CCL-173                               

QY-AC1589    大鼠回腸細(xì)胞 IEC-18  IEC-18CRL-1589                              

QY-AC1586    非洲綠猴腎細(xì)胞 VERO C1008 [Vero 76, clone E6, Vero E6]   VEROC1008[Vero76,cloneE6,VeroE6]CRL-1586                             

QY-AC1581    小鼠骨髓瘤細(xì)胞 Sp2/0-Ag14      Sp2/0-Ag14CRL-1581                              

QY-AC141　 鴨子胚胎成纖維細(xì)胞Duck embryo　 Duckembryo　CCL-141                                  

QY-AC12203  雞胚胎成纖維細(xì)胞 UMNSAH/DF-1    UMNSAH/DF-1CRL-12203                              

QY-AC71 小鼠巨噬細(xì)胞 RAW 264.7   RAW264.7TIB-71                             

QY-AC10 倉鼠腎成纖維細(xì)胞 YXK-21 YXK-21CCL-10                                

QY-AC2007    小鼠表皮細(xì)胞 JB6 Cl 30-7b JB6Cl30-7bCRL-2007                               

QY-AC1658    小鼠胚胎細(xì)胞 NIH/3T3       NIH/3T3CRL-1658                            

QY-AC2586    小鼠血管內(nèi)皮瘤細(xì)胞 EOMA      EOMACRL-2586                               

QY-AC1503    小鼠胚胎纖維細(xì)胞 STO     STOCRL-1503                                   【人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒】

QY-AC001      大鼠肝上皮樣干細(xì)胞 WB-F344  WB-F344                                  

QY-AC002      小鼠乳腺癌細(xì)胞 4T1   4T1                            

9019756  Valve, solenoid, V2, QX        CNY                           

9019734  Sensor, Z, with cable, V2, QX             CNY                           

9019728  Board, motor control, Y, V2, QX          CNY                           

9013832  Reagent Holder, 1-bottle Holder for accommodating 1 bottle (5 ml). For use with QIAGEN Protease on the BioRobot MDx worktable       CNY                           

9013824  BGR Tischplatte P3041 Robotec(SN602)            CNY                           

9013719  RS 232 Servicecabel             CNY                           

9013506  96-well Thermostat Base Plate1.02              CNY                           

9013484  Cooling ａnd heating system, BR3000           CNY                           

9013442  Centrifuge, strip adaptor set          CNY                           

9013434  Maintenance kit, annual, BR9600 (A)           CNY                           

9019723  Transport lock, EZ1xl           CNY                            【人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒】

9019656  Hose w. quick lock socket, PyroQ96VW            CNY                           

9019581  Pulley, Idler Y-axis, Cxx        CNY                           

9019554  Rail, Z-axis 138 mm, Cxx             CNY                           

9019552  Rail, X-axis 444 mm, CQx           CNY                           

218060    miScript Reverse Transcription Kit (10)              CNY                           

216513    FastLane Cell Multiplex Kit (200)         CNY                           

204254    QuantiFast Probe PCR Kit (400)          CNY                           

9019440  Solid State Relay           CNY                           

9019433  Transformer 2x115VAC O/P 2x11VAC         CNY                           

9019431  Kit, lock ring 36W incl. lockknob, RG3              CNY                           

9019402  Transformer, heater, RG3             CNY                           

1027321  Mm/Hs_MAPK1 control siRNA (20 nmol)           CNY                           

9019329  Serial connector USB, internal cable, RG             CNY                           

9019238  Heating block, PyroQ24        CNY                           

9020478  Heating plate, GSC        CNY                           

1026965  PCR Buffer,10 x (1,2/2) without MgCl2              CNY                            【人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒】

9233466  Coupling, CPC, inline, male, 6mm        CNY                           

9233452  Coupling, X motor, BR8000          CNY                           

9019217  Lead screw - Y robot, PyroQ96MD             CNY                           

1017635  Protease Solvent 6x (10,2/15), Azid,KG              CNY                           

1066846  AIV-H5 RT-PCR REAGENT LE           CNY                           

1054250  Effectene Transfection Reag. Kit (0.3ml)            CNY