ELISA酶聯(lián)法試劑盒操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗一般均用板式點。本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用，兩者均有詳細的使用說明，嚴(yán)格遵照規(guī)定操作，必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果。齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

首先齊一生物優(yōu)質(zhì)的試劑盒，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠必要條件。所以ELISA試劑盒的購買，試劑質(zhì)量的保證以及實驗前實驗儀器的檢察都是很有重要性的。保證實驗材料的質(zhì)量之后要嚴(yán)格按照實驗步驟進行。齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

【人細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原4（CTLA-4CD152）ELISA試劑盒】齊一生物ELISA試劑盒

1.精心挑選的進口抗體、標(biāo)準(zhǔn)品、顯色劑和酶標(biāo)板全部為進口產(chǎn)品實現(xiàn)*佳性能；

2.原材料批量進口加上自配的特殊配方稀釋劑保證高品質(zhì)產(chǎn)品性能的同時兼顧成本；

3.采用技術(shù)，嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)方案組裝生產(chǎn)；

4.預(yù)包被微孔板的批內(nèi)和批間變異系數(shù)均小于10 ％；

5.經(jīng)過嚴(yán)格交叉反應(yīng)和干擾測試及穩(wěn)定性試驗；

6.明確的敏感度；

7.針對所有樣品類型達到*佳的性能；

8.廣泛的檢測范圍可以滿足大多數(shù)檢測要求；

9.完善的售后服務(wù)和免費的技術(shù)支持免去您的后顧之憂；

10.強大的生產(chǎn)能力和充足的儲備、操作熟練的技術(shù)人員及高效的生產(chǎn)流程，隨時可以組裝出您定制的產(chǎn)品。

【人細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原4（CTLA-4CD152）ELISA試劑盒】齊一生物僅供實驗人、大鼠、小鼠、兔等動物實驗標(biāo)本檢測使用！得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細閱讀購買說明！齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

ELISA試劑盒問題描述

標(biāo)準(zhǔn)曲線梯度差：

吸液或加液不準(zhǔn)請檢查移液器及吸頭

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋不正確溶解標(biāo)準(zhǔn)品稍微旋轉(zhuǎn)瓶身，輕輕混勻使粉末完全溶解

洗滌不完全保證洗滌時間和洗滌次數(shù)及每孔的加液量

顯色很弱或無色：

孵育時間太短保證充足的孵育時間

實驗溫度不正確使用推薦的實驗溫度

試劑體積不夠或漏加、稀釋不正確檢查吸液及加液過程，保證所有試劑按順序足量添加

讀數(shù)數(shù)值低：

酶標(biāo)儀設(shè)置不正確 在酶標(biāo)儀上檢查波長及濾光片設(shè)置

提前打開酶標(biāo)儀預(yù)熱：變異系數(shù)大加液不正確檢查加液情況

【人細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原4（CTLA-4CD152）ELISA試劑盒】背景值高：

檢測抗體的工作濃度使用推薦的稀釋倍數(shù)

酶標(biāo)板洗滌不完全重新閱讀操作手冊，保證清洗完全；如果用自動洗板機，請檢查所有的出口是否有堵塞

洗液有污染配制新鮮的洗液

靈敏度低：

ELISA試劑盒保存按說明書要求保存相關(guān)試劑

讀數(shù)前未終止OD讀數(shù)前應(yīng)在每孔中加入終止液

齊一生物客戶寄標(biāo)本時需注明以下情況：

1、標(biāo)本編號；2、所測項目；3、是否做復(fù)孔；3、聯(lián)系方式；4、實驗后標(biāo)本是否寄回。

客戶必知：

客戶應(yīng)對所提供的材料及信息負責(zé)，如因客戶提供的材料及信息不準(zhǔn)確而引起的實驗延誤或經(jīng)濟損失由客戶承擔(dān)。

試劑盒樣本要求

在收集標(biāo)本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測，對收集后當(dāng)天就進行檢測的標(biāo)本，及時儲存在4℃?zhèn)溆�，如有特殊原因需要周期收集�?biāo)本，請造模取材后，將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差，蛋白極易降解，直接影響實驗質(zhì)量，所以避免反復(fù)凍融。具體操作注意事項請與我司技術(shù)人員溝通。齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

【人細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原4（CTLA-4CD152）ELISA試劑盒】液體類標(biāo)本：標(biāo)本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心。

3. 尿液、胸腹水、腦脊液：用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。

5. 培養(yǎng)細胞:檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

6. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶）。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清置于-20度或-70度保存，如有必要，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

7. 標(biāo)本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

8.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

9.如果樣品不能立即檢測，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解

凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

4518366artus HCV QS-RGQ Kit (72) CECNY

130815NeXtal CubicPhase 3w Mo µplate (2)CNY

4513265artus HI Virus-1 RG RT-PCR Kit (96) CECNY

129832GelPilot Small Fragment Agarose (100g)CNY

4506163artus HBV TM PCR Kit (24) CECNY

120012QIAprep 96 Plates (24)24 QIAprep 96 PlatesCNY

85600TissueLyser LTCNY

81620Centrifuge 4-16KS (220V, 50Hz)CNY

79656QIAshredder (250)250 disposable cell-lysate homogenizers for use in nucleic acid minipreps, capsCNY

79217Buffer EL1000 ml Erythrocyte Lysis BufferCNY

76104RNAlater (50ml)50 ml RNAlater RNA Stabilization Reagent for stabilization of RNA in 25 x 200 mg tissue samplesCNY

27193QIAprep 96 Turbo Miniprep Kit (24)For 24 x 96 high-purity plasmid minipreps, 24 each: TurboFilter 96 ａnd QIAprep 96 Plates; Flat-Bottom Blocks ａnd Lids, Reagents, Buffers, Collection Microtubes (1.2 ml), CapsCNY

69973TissueLyser 3 mm Bead Dispenser, 96-wellFor dispensing 96 beads (3 mm diameter) in parallelCNY

19155QIAGEN Protease (7.5 AU)7.5 Anson units per vial (lyophilized)CNY

19066Buffer PB500 ml Binding BufferCNY

12263QIAfilter Plasmid Maxi Kit (25)25 QIAGEN-tip 500, Reagents, Buffers, 25 QIAfilter Maxi CartridgesCNY

12181QIAGEN Plasmid Mega Kit (5)5 QIAGEN-tip 2500, Reagents, BuffersCNY

12163QIAGEN Plasmid Maxi Kit (25)25 QIAGEN-tip 500, Reagents, BuffersCNY

12145QIAGEN Plasmid Midi Kit (100)100 QIAGEN-tip 100, Reagents, BuffersCNY

11910Ultrapure 100 Buffer SetBuffers P1, P2, P3, QBT, QC, QN, ER, TE, Endotoxin-free water, RNase A; for preparation of up to 100 mg plasmid DNACNY

10262QIAGEN Genomic-tip 500/G10 columnsCNY

133264NeXtalStock PCB pH 9.5 (200)CNY

337631qBiomarker SYBR Green ROX Mastermix (8)CNY

337621qBiomarker SYBR Green Fluor Mastermix(8)CNY

949022Autopure Qubes D (192)CNY

9012787Shield safety, color code 9170, 120cmCNY

9012785Shield safety, color code 9170, 90cmCNY

931636QIAsymphony RNA Kit (192)CNY

929708QX Cartridge Stand (with Cover)CNY

133258NeXtalStock HEPES sod. salt pH 7.8 (200)CNY