ELISA酶聯(lián)法試劑盒操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內醫(yī)學檢驗一般均用板式點。本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特殊儀器配合應用，兩者均有詳細的使用說明，嚴格遵照規(guī)定操作，必能得出準確的結果。齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

首先齊一生物優(yōu)質的試劑盒，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠必要條件。所以ELISA試劑盒的購買，試劑質量的保證以及實驗前實驗儀器的檢察都是很有重要性的。保證實驗材料的質量之后要嚴格按照實驗步驟進行。齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

【人煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）ELISA試劑盒】齊一生物ELISA試劑盒

1.精心挑選的進口抗體、標準品、顯色劑和酶標板全部為進口產(chǎn)品實現(xiàn)*佳性能；

2.原材料批量進口加上自配的特殊配方稀釋劑保證高品質產(chǎn)品性能的同時兼顧成本；

3.采用技術，嚴格按照標準生產(chǎn)方案組裝生產(chǎn)；

4.預包被微孔板的批內和批間變異系數(shù)均小于10 ％；

5.經(jīng)過嚴格交叉反應和干擾測試及穩(wěn)定性試驗；

6.明確的敏感度；

7.針對所有樣品類型達到*佳的性能；

8.廣泛的檢測范圍可以滿足大多數(shù)檢測要求；

9.完善的售后服務和免費的技術支持免去您的后顧之憂；

10.強大的生產(chǎn)能力和充足的儲備、操作熟練的技術人員及高效的生產(chǎn)流程，隨時可以組裝出您定制的產(chǎn)品。

【人煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）ELISA試劑盒】齊一生物僅供實驗人、大鼠、小鼠、兔等動物實驗標本檢測使用！得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細閱讀購買說明！齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

ELISA試劑盒問題描述

標準曲線梯度差：

吸液或加液不準請檢查移液器及吸頭

標準品稀釋不正確溶解標準品稍微旋轉瓶身，輕輕混勻使粉末完全溶解

洗滌不完全保證洗滌時間和洗滌次數(shù)及每孔的加液量

顯色很弱或無色：

孵育時間太短保證充足的孵育時間

實驗溫度不正確使用推薦的實驗溫度

試劑體積不夠或漏加、稀釋不正確檢查吸液及加液過程，保證所有試劑按順序足量添加

讀數(shù)數(shù)值低：

酶標儀設置不正確 在酶標儀上檢查波長及濾光片設置

提前打開酶標儀預熱：變異系數(shù)大加液不正確檢查加液情況

【人煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）ELISA試劑盒】背景值高：

檢測抗體的工作濃度使用推薦的稀釋倍數(shù)

酶標板洗滌不完全重新閱讀操作手冊，保證清洗完全；如果用自動洗板機，請檢查所有的出口是否有堵塞

洗液有污染配制新鮮的洗液

靈敏度低：

ELISA試劑盒保存按說明書要求保存相關試劑

讀數(shù)前未終止OD讀數(shù)前應在每孔中加入終止液

齊一生物客戶寄標本時需注明以下情況：

1、標本編號；2、所測項目；3、是否做復孔；3、聯(lián)系方式；4、實驗后標本是否寄回。

客戶必知：

客戶應對所提供的材料及信息負責，如因客戶提供的材料及信息不準確而引起的實驗延誤或經(jīng)濟損失由客戶承擔。

試劑盒樣本要求

在收集標本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。我們提倡新鮮標本盡早檢測，對收集后當天就進行檢測的標本，及時儲存在4℃?zhèn)溆�，如有特殊原因需要周期收集標本，請造模取材后，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差，蛋白極易降解，直接影響實驗質量，所以避免反復凍融。具體操作注意事項請與我司技術人員溝通。齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

【人煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）ELISA試劑盒】液體類標本：標本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成應再次離心。

3. 尿液、胸腹水、腦脊液：用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。如有沉淀形成，應再次離心。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。

5. 培養(yǎng)細胞:檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

6. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶）。用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清置于-20度或-70度保存，如有必要，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

7. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

8.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

9.如果樣品不能立即檢測，應將其分裝，-70 ℃保存，避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解

凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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